195858. lajstromszámú szabadalom • Eljárás teicoplanin A2 komplex egyes fő komponenseinek szelektív feldúsítására
5 195858 6 zorként linolsavat, annak valamely, a mikroorganizmusra nézve nem mérgező bázissal képzett sóját vagy 1-6 szénatomszámú, mono- vagy polihidroxi-alkanolokkal képzett észtereit alkalmazzuk, b) a T-A2-2 komponens arányának növelésére megfelelő prokurzorként valint (cc-amino-izovaleriónsav), annak a mikroorganizmusra nem mérgező savakkal vagy bázisokkal képzett sóit, alfa-keto-izovaleriánsavat, annak a mikroorganizmusra nem mérgező bázisokkal képzett sóit vagy 1-6 szénatomszámú monovagy polihid roxi-alkanolokkal képzett észtereit, izovajsavat, annak a mikroorganizmusra nem mérgező bázisokkal képzett sóit vagy 1-0 szénatomszámú mono-vagv polihidroxi-aikanolokieal képzett észtereit, izobutanoll. vagy annak a mikrooganizmusra nem mérgező savakkal képzett észtereit alkalmazzuk. c) a T-A2-3 komponens arányának növelésére megfelelő prekurzorként olajsavat, annak a mikroorganizmusra nem mérgező bázisokkal képzett sóit, vagy 1-6 szénatomszámú mono-, illetve polihidroxi-alkanolokkal képzett bázisait alkalmazzuk, d) a T-A2-4 komponens arányának növelésére megfelelő prekurzorként izoleucint, annak a mikroorganizmusra nem mérgező savakkal vagy bázisokkal alkotott sóit alfa-keto-béta-metil-valeriánsavat, annak a mikroorganizmusokra nem mérgező bázisokkal alkotott sóit vagy 1-6 szénatomszámú mono- vagy polihidroxi-alkanolokkal képzett észtereit, 2-metil-vajsavat, annak a mikroorganizmusra nem mérgező bázisokkal alkotott sóit vagy 1- -6 szénatomszámú mono- vagy pohhidroxi-alkanolokkal képzett észtereit, 2-metil-butanolt vagy annak a mikroorganizmusokra nem mérgező savakkal képzett észtereit alkalmazzuk, e) a T-A2-5 komponens arányának növelésére megfelelő prekurzorként leucint, annak a mikroorganizmusra nem mérgező savakkal és bázisokkal képzett sóit, izovalerinánsavat, annak a mikroorganizmusra nem mérgező bázisokkal alkotott sóit, vagy 1-6 szénatomszámú monovagy polihidroxi-alkanolokkal képzett észtereit, alfa-keto-izokapronsavat, annak a mikroorganizmusra nem mérgező bázisokkal képzelt sóit vagy 1-6 szénatomszámú mono- vagy polihidroxi-alkanolokkal képzett észtereit, izoamilalkoholt vagy annak a mikroorganizmusokra nem mérgező savakkal képzett észtereit alkalmazzuk. A mikroorganizmusra nem mérgező bázisokkal képzett sók azok, melyekben az adott kation jellege és koncentrációja olyan, hogy nem gátolja számottevő mértékben a mikroorganizmus-tenyészet fejlődését, sem pedig a kívánt antibiotikus hatású anyag termelését. Ilyen kationok pl. a nátrium, kálium, ammonium stb. A kis szénatomszámú mono- és polihidroxi-alkanolokknl képzeli észterek olyan (Ci-Csl-alkanolok, melyek molekulánként 1, 2, 3, 4, 5 vagy 6 funkciós CBoporlol tartalmaznak. Ha 4-6 szénatomszámú alkanolokat alkalmazunk, ezeknek eltérőnek kell Jenniök . azoktól, amelyeket a T-A2 egyéb fő komponenseinek prekurzoraként alkalmazunk (mint pl. izobutanol, izoamil-alkohol vagy 2-metil-butanol), kivéve azt az esetet, mikor egyidejűleg egy vagy több ilyen komponens mennyiségét is növelni akarjuk. Előnyösen alkalmazható polihidroxi-alkariolok, pl. a glicerin és a propilén-glikol. Az alkanolok különböző enantiomerek és epimerek alakjában lehetnek jelen, akkor a leírásba és az igénypontokba beleértjük mindkét formát külön-külön, valamint az egyes formák bármilyen arányú keverékeit is. A mikroorganizmusra nézve nem mérgezőt k azok a 2-22 szénatomszámú alkanoil-észterek, melyeknél az alkanoil molekularész jehege és az észter koncentrációja olyan, hogy a fermentáció során sem a mikroorganizmus-tenyészet fejlődését, sem pedig a kívánt antibiotikus hatású anyag előállítását nem gátolja számottevő mértékben. Általában előnyösek az egyenes szénláncú 2-4 szénatomos alkanolok. A találmány szerinti eljárás abból áll, hogy a fent említett törzset olyan vizes táptalajban fermentáljuk, mely táptalaj asszimilálható nitrogénforrást és szervetlen sókat tartalmaz, a teicoplanin termelésére a technika állásában leirt szokásos körülmények között, azon módosítással, hogy a fermentációs közeghez annak beoltása előtt vagy a fermentálási folyamat sorén valamely megfelelő prekurzorból szelektive hatásos mennyiséget adunk azzal a céllal, hogy a T-A2-1, T-A2-2, T-A2-3, T-A2-4 vagy T-A2-5 teicoplanin A2 komponensek közül egynek vagy töl bnek a mennyiségét szelektive megnöveljük. Az „annak valamely olyan mutánsa, mely azonos melabolikuB úton T-A2 komplexet termei” kifejezés az Actinoplanes l eichomyce- Licus ATCC 31121 (anyatörzs) azon természetes vagy mesterséges mutánsaira utal, melyf k a T-A2 komplex termelése során a komplex 11’ zsirsav-acil molekularészének előállításához lényegében ugyanolyan enzimrendszert. használnak, mint az anyatenyészet. A leírásban és az igénypontokban a „szelektive hatásos mennyiség" a szelektív prekurzornnk azon mennyiségét jelenti, melyet a fermentációs közeghez hozzáadva a T-A2 komplex egy meghatározott komponensének mennyiségét szelektive megnöveli anélki'r, hogy a mikroorganizmusra mérgező hatást fejtene ki. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
