195820. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a spektinomicin új 6-alkil-analógjainak és az ilyen hatóanyagot tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
13 195820 14 Számított molekulatömeg: 839, 3480 Mért molekulatömeg: 839, 3466 5. referenciapélda N,N’-di(Benzil-oxi-karbonil)-2,-{0-acetil)-6-[(dimetil-amino)-metilén]-4’,5’didehidro-Bpektinomicin 39,0 ml dimetil-formamidban feloldunk 5,9 g N,N’-di(benzil-oxi-karbonil)-2,6-di-0- -formil-2’-(0-acetil)-4’,5’-dedehidro-spektinomicint, majd a kapott oldathoz 36,0 ml dimetil-formamid-dimetilacetélt adunk. Az így kapott reakcióelegyet 55-60 °C-on tartjuk 4 órán át, majd 36' ml metanolt adunk hozzá és a 55-60 °C-on a melegítést 3 órán ét folytatjuk. A maradékot ezután 15 ml kloroformmal felvesszük, majd az így kapott oldatot szűrőben 200 ml szilikagélre felvisszük. A terméket a visszamaradt dimetil-formamidtól 0,5 liter kloroformmal, 0,8 liter 5% acetonitrilt tartalmazó kloroformmal, 150 ml 30% acetonitrilt tartalmazó kloroformmal és 1 liter acetonitrillel egymásután végzett eluálás útján szabadítjuk meg. A megfelelő frakciókból 2,71 g cim szerinti vegyület különíthető el. CMR (Dí-aceton): 180,3, 171,2, 169,8, 157.0, 150,3, 137,9, 129.0, 128,8, 95,5, 95,2, 95,1, 94,8, 88,7, 75,3, 67,3, 66,2, 59,9, 65,7, 41.0, 31,4, 30,7, és 21,2 ppm. 6. referenciapélda N,N’-di(Benzil-oxi-karbonil)-2’-(0-acetil)-6’-{dimetil-amino-metil)-4’,5’-didehid ro-spe k tinomicin 200 ml metanolban feloldunk 20,0 g (28,78 roillimól) N,N’-di(benzil-oxí-karbonil)-2’-(0-acetil)-6’-(dimetil-amino-metil)-4’,5’-didehidro-spektinomicint és 5 mg metilnarancsot, majd az így kapott oldat pH-ját 4,0- -ra beállítjuk 2 n metanolos hidrogón-klorid-oldattal. Ezután 20 perc leforgása alatt beadagoljuk a reagáltatáshoz szükséges nátrium-ciano-bór-hidridet, a pH gyakori újból beállítása mellett, a beállításhoz 2 n metano- Iob hidrogén-klorid-oldatot használva. Miután összesen 2,0 g (31,83 millimól) nátrium-cianó-bór-hidridet beadagoltunk, a kapott oldatot szobahőmérsékleten 1 órán át keverjük. Az ekkor metanol és kloroform 1 : 9 térfogatarányú elegyével mint futtatószerrel végrehajtott vékonyrétegkromatogréfiás elemzés tanúsága szerint a kiindulási anyag átalakult. Az oldatot ezután először betóményítjük, majd 500 ml etil-acetáttal, 250 ml 0,1 n vizes nátrium-hidroxid-oldattal, 25 ml 1,0 n vizes nátrium-hidroxid-oldattal és végül 250 ml telített vizes nátrium-klorid-oldattal hígítjuk. A szerves fázist elválasztása után 200 ml, majd 100 ml telített vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk. A három különböző vizes fázist 200-200 ml etil-acetáttal mossuk, majd a szerves fázisokat egyesítjük, nátrium-szulfát fölött szárítjuk és bepároljuk. Így 17,93 g (89%) mennyiségben hab alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk. CD (CHaOH): (0)m = 12 000 ± 1100 (0)270 n» - ± 1100 UV-spektrum (C2H5OH): 273 nm (8800) és 377 nm (váll, 63). PMR (CDClj, i): 2,13 (3H, s), 2,17 (6H, s), 2,46 (3H, b), 3,05 (3H, s), 3,06 (3H, s), 5,05 (4H, d), 5,34 (1H, s), 5,89 (1H, s) és 7,26 (10H, d). CMR (CDsCOCDa): 20,9, 31,3, 45,0, 56,1, 57.1, 61,3, 66,1, 67,3, 74,0, 75,4, 93,7, 96,0, 103.1, 128,3, 129,1, 137.9, 157,2, 170,0, 174.9, és 183,1 ppm. 6a. referenciapélda N,N’-di(Benzil-oxi-karbonil)-2’-(0-ace-til)-6’-(dimetil-amino-metil)-4’,5’-didehidro-Bpektinomicin Összekeverünk 57,0 g (78,7 millimól) N,N’-di(benzil-oxi-karbonil)-2'-(0-acetil)-6’-[(dimetil-aminoJ-metilénJ-á’jS’-didehidro-apektinomicint, 450 . ml etil-acetátot és 105 ml metanolt, majd az így kapott elegy pH-értékét 4-re beállítjuk 2 n sósavoldattal. Ezután 5 perc leforgása alatt 7,3 g nátrium-ciano-bór-hidridet adagolunk, a pH gyakori újra beállítása mellett a beállításhoz 2 n sósavoldatot használva. A nátrium-ciano-bór-hidrid beadagolásának befejezését követően a reakcióelegyet további 15 percen át 4-es pH-n tartjuk, majd vékonyrétegkromatogrófián vizsgálatot végzünk, futtatószerként metanol és kloroform 1 : 9 térfogatarányű elegyét használva. A vizsgálat szerint a kiindulási anyag átalakult. A reakcióelegyet ezután 175 g nátrium-hidroxid 350 ml vízzel készült oldatával keverjük össze, majd a fázisokat elválasztjuk egymástól. A felső fázist 250 ml telített vizes nátrium-hidroxid-oldatal átmossuk, majd 150 ml Skellysolve B-t adunk hozzá az emulzió megtörése céljából. A két vizes fázist 300 ml etil-acetáttal, majd 75 ml SkellyBolve B-vel visszamossuk. Az egyesített szerves fázisokat nátrium-szulfát fölött szárítjuk, majd a nátrium-szulfátot kiszűrjük, a cím szerinti vegyületet tartalmazó szűrletet nyerve. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 8
