195815. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új 3-oxadiazol- és 3-karbonsav-béta-karbolin származékok előállítására
5 195815 6 tett, 7,1 pH-jú szuszpenzió (5-10 mg szővet/minta) 0,5 ml-ét 0°C-on 40-60 percig inkubáljuk 3H-diazepammal (specifikus aktivitása 14,4 Ci/mmól, 1,9 nM), vagy ■5U-flui'itrazepammal (specifikus aktivitása 87 Ci/mmól, 1,0 nM). Az inkubálás után a szuszpenziót üvegszűrön szűrjük, a maradékot, hideg pufferoldattal kétszer mossuk és a raciioaktivitást szcintillációs számlálóval mérjük. A kisérletet ezután megismételjük, de úgy, hogy a radioaktív izotóppal jelzett benzodiazepinek hozzáadása előtt az elegyhez hozzáadjuk annak a vegyületnek a meghatározott mennyiségét, vagy fölöslegben alkalmazott mennyiségét, amelynek kiszorító hatását meg akarjuk határozni. A kapott értékek alapján azután ki lehet számítani az ICso-értéket. Az EDso-érték egy vizsgált vegyületnek azt a dózisát mutatja, amely a flunitrazepam specifikus kötődését az élő agy benzodiazepin-receptorához a kontrollérték felére csökkenti. Az in vivo vizsgálatot a következőképpen végezzük: A vizsgálandó vegyületet egerek csoportjainak különböző dózisokban és általában intraperitoneális injekcióban adjuk be. 15 perc múlva az egereknek 3H-flunitrazepainot adunk be intravénásán. További 20 perc az egereket megöljük, elülső agyvelejüket eltávolítjuk, és az agymembránokhoz specifikusan kötött radioaktivitást szcintillációs számlálóval megmérjük. Az EDso-értéket a dózis/hatás görbékből határozzuk meg. A találmány szerinti vegvületek a farmakológiái vizsgálatokban különösen anxiolitikus és antikonvulzív hatást mutatnak. Az antikonvulzív hatás vizsgálatára pentilén tetrazollal (pentazollal) kiváltott görcsöt feloldó hatást vizsgáljuk. A pentazolt 150 mg/kg mennyiségben, sósavas oldat (pH = 2-3) alakjában szubkután adjuk be 15-30 perccel a vizsgálandó vegyület intraperitoneális beadása után. Ez a mennyiség klónusos és tónusos görcsöket vált ki, amelyek kezeletlen állatoknál halálhoz vezetnek. Feljegyezzük azoknak az egereknek a számát, amelyeknél görcsöt lehet megfigyelni, és azokét is, amelyek a pentazol beadása után 30 perccel elpusztultak. A táblázatban megadott EDso-értékeket Litchfield és Wilcoxon módszerével [J. Pharmacol. exp. Ther., 96, 99-103, (1949)] határozzuk meg, mint azt az anyagmennyiséget, amely az állatok 50%-át megvédi a görcsöktől és az elpusztulástól. Az új, (I) általános képletü vegyületeknek értékes farmakológiai tulajdonságai vannak. Különösképpen a központi idegrendszerre hatnak, és ezáltal pszichofarmakonokként alkalmazhatók a humán gyógyászatban. Az új vegyületek különösképpen depresszióval, epilepsziával, alvászavarokkal, görcsös állapotokkal és anesztézia során fellépő izomrelaxációval kapcsolatos szorongások kezelésére használhatók. A találmány szerinti vegyületek amnéziás illetve emlékezóképességet fokozó hatást is mutatnak.’ A találmány szerinti vegyületeket gyógyászati készítmények, például embereknek és emlős állatoknak orálisan vagy parenterálisan beadható gyógyszerkészítmények formázására használhatjuk fel, a galenikus készítmények előállításéra önmagéban ismert módszerekkel. A gyógyászati készítmények formázásához segédanyagként olyan fiziológiailag elfogadható, enterálisan és parenterélisan beadható, szerves és szervetlen hordozóanyagok használhatók, amelyek a találmány szerinti vegyületekkel szemben semlegesek. Hordozóanyagként megemlíthetjük például a vizet, sóoldatokat, alkoholokat, polietilénglikololcat, a polihidroxi-etoxilezett ricinusolajat, a zselatint, a laktózt, az amilózt, a magnézium-sztearátot, a talkumot, a kovasavat, a zsírsav-mono- és diglicerideket, a pentaeritrol-zsirsavésztereket, a hidroxi-met.il-cellulózt és a polivinil-pirrolidont. A gyógyászati készítményeket sterilizálhatjuk és/vagy segédanyagokkal, mint lubrikánsokkal, tartósítószerekkel, stabilizátorokkal, térhálósitószerekkel, emulgeálószerekkel, pufferekkel és színezőanyagokkal keverhetjük. Parenterális alkalmazásra különösen az injekciós oldatok vagy a szuszpenziók alkalmasak, elsősorban a hatóanyag vizes oldatai polihidroxi-etoxilezett ricinusolajban. Orális alkalmazásra különösen a tabletták, drazsék vagy kapszulák alkalmazhatók, amelyek talkumot és/vagy egy széhidrogén hordozó- vagy kötőanyagot, például laktózt, kukorica- vagy burgonyakeményitőt tartalmaznak. A készítmények folyékony formában is alkalmazhatók, mint például olyan folyadékként, amelyhez adott esetben édesítőszert is adunk. A találmány szerinti vegyületeket egy fiziológiailag elfogadható hordozóanyagban 0,05-100 mg hatóanyagot tartalmazó egységadag formájában alkalmazzuk. A találmány szerinti vegyületeket 0,1--300 mg, előnyösen 1-30 mg napi dózisban használjuk. A találmány szerinti (I) általános képletü vegyületeket önmagában ismert módszerekkel állíthatjuk elő. Az (T) általános képletü vegyületeket előállíthatjuk például úgy, hogy a) valamely (II) általános képletü vegyületet - a képletben R* és R4 jelentése a fenti - egy (V) általános képletü vegyülettel - a képletben R'2 jelentése a fenti - reagáltatunk, igy X helyén (a) általános képletü cso.portot - a képletben R2 jelentése a fenti - tartalmazó (I) általános képletü vegyületet kapunk, vagy 5 H) 15 20 25 30 35 40 45 50 55 GO 65 4
