195813. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1,2-dihidro-2H-imidazo [4,5-b] kinolin-2-on származékok és ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
12 195813 13 tartalmaz) egy meghatározott részét szcintillécióa számlálóval vizsgáljuk. A vizsgált vegyűlet cAMP-foszfodieszteráz inhibiciós aktivitásét oly módon határozzuk meg, hogy a kapott eredményt ugyanezzel a vegyületlel 5 inkubált foszfodieszteráz enzimmel történő inkubálÓBa útján kapott eredménnyel hasonlítjuk össze. A kapott adag-reakció értékeket a vizsgált vegyületnek a foszfodieszteráz-aktivitést 50%-ban gótló moláris koncentrációja- 10 ban fejezzük ki (ICso-érték). Ezzel a vizsgálati módszerrel az inotrop szerként ismert milrinon - 5-ciano-2-metil-(3,4'-bipiridin)-6- -(lH)-on - ICso-értéke 2-10"’ mól. A kapott eredményeket ugyancsak az alábbi I. tabló- 15 zatban foglaltuk ÖBSze. In vitro inotrop aktivitás Ezt a vizsgálatot az Anderson, Drug Development Research, 3, 443-457 (1983) által leírt módszer módosított alakja szerint vé- 20 geztük. Tengerimalacok agyvelejének eltávolítása után a szívet gyorsan kivettük, a bal Bzívpitvarra selyemszálkötést helyeztünk, az így kezelt szivpitvart elkülönítettük és szövet-fürdőbe helyeztük őket, ahol elektromos ^5 úton stimuláltuk a szövetet. Egy kezdeti egyenBÚlybahozatali szakasz után a szívpitvart propranolol - l-(izopropil-amino)-3~(l-naftil-oxi)-2-propanol - 10*5 mól koncentrációjú oldatával kezeltük; ez a szer csökkenti a szívpitvar-szövet natív kontrakció-erejét, de ugyanakkor érzékenyebbé teszi a szövetet a foBzfodieszteráz-inhibitor szerek inotrop hatásával szemben. Ezekutón mértük az egyes vizsgálati vegyületeknek a szívpitvar kontrakció-erejét növelő hatását. A kapott eredményeket a propanolollal kapott kontroll-értékek százalékában fejeztük ki. Kívánt esetben meghatározható ebben a kísérletben a magától pulzáló jobb szívpitvar kronotrop reakciója is. A különböző (I) és (XII) általános képletü vegyúletekkel kapott eredményeket szintén az alábbi II. táblázatban foglaltuk össze. In vivo inotrop aktivitás Ezt a vizsgálatot menyéteken végezzük az alábbi módon: A koplaltatott és anesztetizélt menyéteket a hemodinamikus paramétereknek, valamint jobboldali szivkamra kontrakció-erejének mérésére alkalmas Walton-Brodie-fóle feszültségűiére műszerrel szereltük fel. A vizsgálandó vegyüleleket 1 ml vagy ennél kevesebb dimetil-szulfoxiddal készített oldatban, intraduodenólis úton adtuk be az állatoknak, majd a beadás után 60 percen keresztül mértük a vegyületnek a miokardiális kontrakcióra és egyéb paraméterekre kifejtett hatását. A kontrakció-erőnek a vizsgált vegyület hatására bekövetkező változását a kontrollal szembeni százalékban fejeztük ki. Ebben a vizsgálatban a milrinon 3 mg/kg adagban a jobboldali szívkamra kontrakció erejét (RVCP) 52%-kal növeli. A különböző (I) és (XII) általános képletü vegyületekkel kapott erdményeket a II. táblázat tartalmazza. I. táblázat Vérlemezke-aggregáció és ciklikus AMP foszfodieszteráz gátlása Példa sz.*> Vérlemezke-gátlÓB in vitro - nyúl-PRP ECso pg/ml ADP-vel kollagénnel szemben szemben Ex vivo ADP-vel Bzemben EDso mg/kg cAMP humán vérlemezke foszfodieszteráz ICss (mól) 16. 0.8 0.2 12.6 3 10-’ 17. 0.75 0.08 18.9 3 10-* 18. 0.08 0.03 13.3 3 10-» 19. 0.18 0.06 12.2 5 10-* 20. 0.4 0.125 14.9 5 10-* 21. 0.5 0.1 18.3 3 10-» 22. 0.1 0.03 3.2 1.5 10-» 23. 0.6 0.3 6.8 5 10-» 24. 0.15 0.1 8.4 1 10-’ 25. 0.1 0.1 7.3 4 10*» 26. 0.11 0.09 32 2 10-* 27. 0.04 0.02 5 2 10-* 28. 0.13 0.08 6 I0-» 29. 0.96 0.94 10«> 5 10-» 31. 0.3 0.2 1 10-’ 32. 0.15 0.1 8.2 8 10-" 33. 0.25 0.13 2 10-* 34. 0.4 0.7 >10 3 10-’ 35. 10 10 7 10-« 36. 7 7 3 10-* 8
