195668. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 9-dezoxi-4''-dezoxi-4''-amino 9a-aza-9a-homoeritromicin származékok előállítására
1 195 668 2 szettel. Egyidejűleg olyan kontroll kísérleteket is végzünk, melyeknél az egerek kisebb hígítású inokulumot kapnak, hogy ellenőrizzük a kísérleti organizmus virulenciájának esetleges változását. A vizsgálandó vegyületet a beoltás után 0,5 óra múlva adjuk be és 4, 24 és 48 óra múlva a kezelést megismételjük. Túlélőknek minősítjük az utolsó kezelés után 4 nap múlva életben levő egereket és feljegyezzük a túlélők számát. Emlősök, különösen az ember baktériumos fertőzésének in vivo kezelésére használva a III általános képletű vegyületeket előnyösen gyógyszerészetileg elfogadható vivő- vagy hígítóanyagot tartalmazó gyógyszerkészítmények formájában alkalmazzuk. E készítményeket orálisan alkalmazhatjuk például tabletták vagy kapszulák alakjában, vagy parenterálisan adagoljuk például szubkután és intramuszkuláris injekció formájában. A gyógyszerészetileg elfogadható vivőanyag az alkalmazás tervezett módjától függ. Például tablettákban laktózt, nátrium-citrátot és foszforsav-sókat használhatunk szétesést elősegítő anyagokkal (mint keményítő) és síkosító anyagokká (mint magnézium-sztearát, nátrium-lauril-szulfát és talkum) együtt gyógyszerészetileg elfogadható vivőanyagként. Kapszulákban használva is hasznos gyógyszerészetileg elfogadható vivőanyag a laktóz és a nagy móltömegű polietilénglikolok (például 2000-4000 móltömegűek). Parenterális alkalmazáshoz steril oldatokat vagy szuszpenziókat készíthetünk, melyekben a gyógyszerészetileg elfogadható vivőanyag vizes (például víz, izotóniás sóvagy izotóniás dextrózoldat) vagy nem vizes (például növényi eredetű zsírok, olajok, mint gyapotmag- vagy földimogyoróolaj, vagy poliolok, mint glicerin vagy propiléngjikol). Ha a III általános képle tű vegyületeket in vivo használjuk, a gyógyszerkészítmény szokásosan a gyógyszerészetileg elfogadható vivőanyagot és a III általános képletű vegyületet 4: 1 — 1:4 tömegarányban tartalmazza. Emlősök baktériumos fertőzéseinek in vivo kezeléséhez (orális vagy parenterális) a III általános képlet ,'í baktériumellenes vegyületnek szokásos napi dózisa 5— 100, különösen 10—50 mg/testtömeg-kg, egyedi vág/ osztott dózisokban. A következő példák és preparálások célja kizárólag a találmány további ismertetése. A pFotonmagiieses magrezonancia spektrumokat (1H-NMR spektrumok) deutero-kloroformos (CDC13 oldatokban vettük fel és a jellemző abszorpciós csúcsokat milliomodrészekben (ppm) adjuk meg a tetrametil-szilán vonatkozási anyag vonalára vonatkoztatva. A csúcsok alakjára a következő rövidítéseket alkalmazzuk: s, szingulett; bs, széles szingulett; d, dublett;m, multiplett. 1. példa 9-Dezoxo-9a-metil-4"-dezoxi-4"-beta-amino-9a-aza-9a-homoeritromicin A A. 9-Dezoxo4”-dezoxi4 "-beta-benzil-oxi-karbonil-amino-9a-aza-9a-homoeritromicin A 0,5 g (0,68 millimól) 9-dezoxo4”-dezoxi4"-beta -amino-9a-aza-9a-honioeritromicin A és 0,11 ml (1,0 mii limól) piridin 20 ml diklór-metánnal készült oldatához keverés közben 5 ml diklór-metánban oldott 0,15 ml (1,0 millimól) benzil-oxi-karbonil-kloridot (benzil-klór formiát) adunk. A reakcióelegyet szobahőmérsékletei 30 percig keverjük, majd fölöslegben vizet adunk hozzá A vizes fázis pH-ját 2-re állítjuk be, és a szerves fázist elválasztjuk és elöntjük. A vizes fázis pH-ját 5-ig emeljük, majd a vizes fázist kloroformmal extraháljuk és a kloroformos kivonatot elöntjük. A vizes fázis pH-ját 8-ra állítjuk be és a vizes fázist ismét kloroformmal extraháljuk. Az utóbbi kloroformos kivonatokat vízzel mosva, szárítva és vákuumban bepárolva 0,43 g 4”-beta-benzil-oxi-karbonil-amino-származékot kapunk. B. 9-Dezoxo-9a-metil-4" -dezoxi-4"-beta- benzil- oxi-karbonil-amino-9a-aza-9a-homoeritromicin A -, Az A. pont szerint előállított termék (0,43 g), 0,2 ml 37%-os vizes formaldehidoldat, 0,05 ml 98%-os hangyasav és 30 ml kloroform keverékét visszafolyatás közben 3,5 óráig forraljuk. Ezután a reakció keveréket lehűtjük és fölös mennyiségű vízzel hígítjuk. A pH-t 9-re állítjuk be és a keveréket kloroformmal extraháljuk. A klorofonnos kivonatokat vízzel mosva, szárítva és vákuumban bepárolva 0,40 g 9a-metilszármazékot kapunk. C. 9-Dezoxo-9a-metil-4" -dezoxi- 4"- beta-amino-9a-aza-9a-homoeritromicin A A B. pont szerűit kapott terméket (0,40 g) 5 ml jégecetben oldjuk, majd nitrogéngáz alatt 100 mg • 10% Pd/C katalizátort adunk hozzá. A keveréket hidrogénatmoszférában 5,5 óráig rázatjuk körülbelül 3,924.105 Pa nyomáson, majd a katalizátort szűréssel eltávolítjuk. A szűrlethez etil-acetátot és vizet adunk és a vizes fázis pH-ját 9,5-re állítjuk be. Az etil-acetátos réteget eltávolítjuk és a vizes réteget további etil-acetáttal extraháljuk. Az etil-acetátos oldatokat egyesítjük, vízzel mossuk és szárítjuk. Bepárolva 0,04 g 9-dezoxi-9a-metil- 4''-dezoxi4''-beta-ainino-9a-aza-9a-homoeritromicin A-t kapunk. A termék 1 H-NMR spektruma abszorpciós csúcsai: 2,13 (széles szingulett, 9IT) és 3,28 (szingulett, 3H) ppm. 2. példa )-Dezoxo-9a-metil-4"-dezoxi-4"-alfa-amino-9a-aza-9a -homoeritromicm A A címben megadott vegyületet 9-dezoxo4"-dezoxi- 4"-alfa-amino-9a-aza-9a-homoeritromicin A-ból állítjuk elő bcnzil-oxi-karbonil-klodddal, majd formaldehid-hangyasawal reagáltatva, végül hidrogenolízist végezve az 1. példa A, B. és C. pontjának eljárásait alkalmazva. 3. példa 9-Dezoxo-4"-dezoxi-4"-alfa-amino-9a-aza-9a-homoeritromicin A A. 4"-Dezoxi-4"-alfa-amino-eritromicin A-oxirn 6,4 g (8,6 millimól) 4"-dczoxi4"-alfa-ainino-eritromicin A, 3,2 g (46 millimól) hidroxil-amin-hidroklorid és 65 ml piridin keverékét 50 °C-ra melegítjük és körülbelül 18 óráig ezen a hőmérsékleten tartjuk. Ezután a reakciókeveréket dietil-éter és víz keverékéhez adjuk, és a vizes réteg pH-ját 10-re állítjuk be. A rétegeket szétválasztjuk, és a vizes réteget éterrel tovább extraháljuk. Az egyesí: tett éteres oldatokat vízzel, majd telített nátrium-kloridoldattal mossuk, és az éteres oldatot szárítjuk (Na2S04) Az éteres oldatot bepárolva hab képződik. A habhoz is5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
