195245. lajstromszámú szabadalom • Eljárás és berendezés sejthalmazból meghatározott biológiai sejtek kiválasztására, a kiválasztott sejtek legalább egy tulajdonságának megfigyelésére
meg, amelyek egymásra merőlegesek,és így négyszögletes mátrixszerü struktúrát alkotnak. A 2 nyílások számát mindenkor a kiválasztandó sejtek számától függően választjuk. így- például soronként és oszloponként száz-száz nyílást kialakítva összesen 10 000 nyílást kapunk,amelyekben 10000 sejt helyezhető el a leírt kialakítású 1 sejthordozó mellett,és mindegyik sejtnek meghatározhatjuk az egyedi X és Y koordinátával jellemzett pozícióját. Az 1 sejthordozó kör alakú elemként is létrehozható, mint azt a 6C. ábra mutatja. A 6C. ábrából kitűnik, hogy az 1 sejthordozók 8 fülekkel vannak kiképezve, amelyek révén a 8 füleket befogadó 9 illesztésekkel kialakított 40 első hordozószerkezetbe helyezhetők. A 9 illesztések olyan bemélyedés nyúlványaiként indulnak ki, amelyben az 1 sejthordozó megtámasztható. A 40 első hordozószerkezetben a bemélyedés folytatásaként annak tengelyirányában nyílás van kialakítva. Az illesztés más módon is megoldható, például különleges alakban létrehozott tartóelemekkel és hasonlókkal. Az I sejthordozó különböző anyagokból készülhet. Különösen előnyösnek bizonyult a fémek közül a vörösréz, az arany, a nikkel és az ezüst felhasználása, de a műanyagokkal is kedvező eredmények voltak elérhetők. Ez utóbbi esetben célszerű 101 vezetékek beépítése, mint amilyenek a 17. ábra szerinti megoldásban 100 sejthordozó 102 nyílásait kapcsoló vezető elemek. Minden, a kiválasztott sejtet tartalmazó 102 nyílásnál ebben az esetben a villamos potenciál szabályozhatóan állítható be, és ennek révén a 101 vezetékek a sejt villamos töltésével kölcsönhatásba lépő elektromos teret generálnak. A különböző 102 nyílásoknál a potenciált vezérelve lehetővé válik a bennük levő sejtek elektrosztatikus töltés révén történő megfogása, illetve eltávolítása. Az eljárás foganatosítása céljából a lymphocitákat tartalmazó oldat, például vér néhány cse^pjét az 1, 100 sejthordozóra juttatjuk. A folyadék az 1, 100 sejthordozóban kialakított 2, 102 nyíláson áthalad, és a megfelelő méretű, sejtek az 1 sejthordozóban maradnak. Mivel a 2 nyílások méreteit oly módon választjuk, hogy csak a lymphocitákat fogják be, ezért ezek a sejtek kerülnek a 2 nyílásokba, mégpedig mindegyikbe egy-egy. A nagyobb méretű, vagy felesleges sejteket a sejthordozó felületéről mosófolyadék távolítja el. A sejtek lehetnek olyan nagyok, hogy nem férnek be a 2 nyílásokba, vagy pedig onnan kiszorulnak. Ezt követően a sejteket megfelelően rögzíthetjük a 2 nyílásokban, hogy a hordozóról való távozásukat megakadályozzuk. Erre a célra például az 1 sejthordozót megfelelő kolloid ragasztóanyaggal vonjuk be vagy kihasználjuk az elektromos és mágneses tér nyújtotta lehetőségeket. További kombi-6 g nált módszert az említett sejtpopuláció szigetelésére és egyúttal az I sejthordozóban való rögzítésére a későbbiekben a 10., 11., 12A. és 12B. ábra kapcsán ismertetünk. Minden olyan 1 sejthordozót, amely a’ kiválasztott sejtek csoportját, például a szükséges nagyságú lymphocitákat tartalmazza megfelelő, például 20. ábra szerinti 10 első hordozószerkezetben helyezzük el, ami lehetővé teszi a sejtek tesztvizsgálatát, vagy mérését, amint erről a későbbiekben szó lesz. A 2A., 2B., 2C, 2D., 3A. és 3B. ábrán bemutatott tartóeszköz első kiviteli alakjában 1 sejthordozók egy nagyobb csoportját 10 első hordozószerkezeten (2D. és 3A. ábra) helyezzük el. Az 1 sejthordozóknak csak egyetlen elrendezése lehetséges oly módon, hogy a perforálások (2 nyílások) az I sejthordozókon X és Y tengelyeknek megfelelően legyenek elrendezve (1A. ábra). A 10 első hordozószerkezet, amely 15 átlátszó fallal kialakított átfolyáskamra felső részét alkotja, az átfolyáskamrában 11 második hordozószerkezet fölött van cserélhetően elrendezve (2A. ábra) .All második hordozószerkezet 12 csatornákat határoz meg, amelyek mindkét végükön egy-egy kívánt oldat betáplálására és elvezetésére alkalmas 13. csőre csatlakoznak, és alsó felületével az átfolyáskamra 14 alsó tartóelemen (2B. ábra) van megtámasztva, amely 15 átlátszó lemezt is hordoz. Erre akkor van szükség, ha az I sejthordozón levő sejteket beeső és áteresztett fényben kívánjuk elemezni. A 3A. ábra szerinti felépítésben, ahol a 12 csatorna irányára merőleges keresztmetszet látható (az oldat a rajz síkjára merőleges irányban folyik) 16 áramlásirányító elem biztosítja, hogy az oldat az 1 sejthordozóval kapcsolatba kerüljön. A 3B. ábrán ugyanennek az elrendezésnek vázlatos oldalnézeti metszete látható. Az 1 sejthordozókat befogadó 10 első hordozószerkezeten különböző személyektől (betegektől) vett mintákat tartalmazó 1 sejthordozók helyezhetők el a 12 csatorna mentén egyetlen bemélyedésben, míg az ugyanahhoz a személyhez tartozó mintákat tartalmazó 1 sejthordozók a 12 csatornára merőlegesen vannak elrendezve. A 12 csatorna egyetlen tesztvizsgálat elvégzésére szolgál, és így a tesztvizsgálatok számát meg lehet határozni azzal, hogy az átfolyáskamrában a 12 csatornák közül hányat alkalmazunk. A 12 csatornák bármelyikén átáramló oldat az I sejthordozókon az adott 12 csatorna mentén elrendezett sejtek mindegyikét benedvesíti, és ezzel a különböző betegektől vett minták sejtjeinek vizsgálatát lehetővé teszi. Az 1 sejthordozók 17 üveglappal boríthatok le, aminek révén nagy törésmutatójú folyadék alkalmazása válik lehetővé optikai 10 195245 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
