194910. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új D-glükopiranóz-származékok és az ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
194910 vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat szerint csak melléktermékeket tartalmaz — kiöntjük. A terméket úgy kapjuk meg, hogy a katalizátort erőteljesen extraháljuk kloroform/ /etil-acetát 1:1 arányú elegyével és metanollal (0,53 g), majd kovasavgélen (1:100) kromatografálva, kloroform/metanol/víz 70:30:5 arányú elegyével (3 ml-es frakciók) tovább tisztítjuk. A 66-125. frakcióban lévő anyagot, ami részben nátriumsóként van jelen, (= kovasavgélből) vízben oldjuk, erősen savas ioncserélő oszlopra visszük (Dowex 50, H-alak) és először vízzel, majd dimetoxi-etán/víz 1:1 arányú elegyével eluáljuk (2 ml-es frakciók). Az eluátumokat egyesítjük,és a dimetoxi-etánt vákuumban elpárologtatjuk. Ezt a szuszpenziót terc-butanolban oldjuk és millipor szűrőn (teflon; 0,2 p.) szűrjük és liofilezzük. 0,327 g (36%) N-acetil-normuramil-L-(0- - [N-behenoil-glicil] ) -szeril-D-izoglutamint kapunk laza por alakjában, amelynek R/ értéke 0,19 (kloroíorm:metanol:víz 70:30:5 arányú elegyével), R; értéke 0,38 (acetonitrih.víz 3:1 arányú elegyével), R/ értéke 0,45 (etil-acetát/n-butanol/piridin/jégecet/víz 42:21 : :21:6:10 arányú elegyével). A példában alkalmazott kiindulási anyagot a következőképpen állíthatjuk elő: 2,3 g N-acetil-la-0-benzil-4,6-0-izopropilidén-normuramil-L- (0- [N-benzil-oxi-karbonil-glicil] ) -szeril-D-izoglutamin-terc-butilésztert 50 ml dimetoxi-etán/víz 20:1 arányú elegyében oldunk és 0,5 g palládium-szén-katalizátor. (10%-os) hozzáadása után 20 percen át hidrogénnel kezelünk. Az oldat pH értékét 0,1 n sósav (vizes) hozzáadásával 5-re állítjuk be. A katalizátort leszűrjük, a reakcióoldatot bepároljuk, és a maradékot foszfor-pentoxid fölött szárítjuk. Az így előállított anyag 2 g-ját 20 ml piridinben oldjuk, 0,26 g N-metil-morfolint adunk hozzá és 0°C-on keverés közben 1 ml metílén-kloridban oldott 1,9 g behénsav-kloridot adunk hozzá. Szobahőmérsékleten 4 órán át keverjük, majd a piridint csökkentett nyomáson lepároljuk, a maradékot 200 ml etil-acetáttal felvesszük és 20-20 ml-es adagokkal a következőképpen extraháljuk: 2-szer vízzel, majd 2- -szer nátrium-hidrogén-karbonát - oldattal (0,3%-os) és végül 3-szor vízzel. Vízmentes nátrium-szulfát fölötti szárítás után az oldószert elpárologtatjuk, és a maradékot kovasavgélen (1:50) kloroíorm/izopropanol 95:5 arányú elegyével (15 ml-es frakció) kromatografáljuk. A megfelelő frakciókat (265-370.) egyesítjük, szárazra pároljuk és ekkor 2,0 g N-acetil-la-0-benzil-4,6-0-izopropílidén-normuramil-L-0- [N-behenoil-glicil] -szeril-D-izoglutamin-terc-butilésztert kapunk halvány sárgás habként, Rj=0,85 (kloroform/metanol/ /víz 70:30:5 arányú elegye), Rf= (kloroform/ /izopropanol/jégecet 70:8:2 arányú elegye). 23 2.5 g (3,7 mmól) N-acetil-la-0-benzil-4,6- O-izopropilidén-normuramil-L-szeril-D-izoglutamin-terc-butilésztert, 0,75 g benzil-oxikarbonil-glicint, 0,45 g dimetil-amino-piridint és 1,0 g 1-hidroxi-benztriazolt 25 ml dimetil-formamidban oldunk, 0°C-ra lehűtjük és 0,85 g diciklohexil-karbodiimidet adunk hozzá, majd az egészet 22 órán át keverjük szobahőmérsékleten. A szuszpenziót szűrjük, és a csapadékot etil-acetáttal mossuk. Az egyesített szürletekhez annyi etil-acetátot adunk, hogy a térfogat 250 ml legyen, 3-szor mossuk 20-20 ml vízzel, 3-szor 20-20 ml 2%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és végül 4- -szer vízzel. Vízmentes nátrium-szulfát fölötti szárítás után az oldószert elpárologtatjuk,és a maradékot kovasavgélen kloroform/ /izopropanol 9:1 arányú elegyével kromatografáljuk (10 ml-es frakciók). A 75-190. frakciót összegyűjtjük, szárazra pároljuk, a színtelen habot 20 ml etil-acetátban oldjuk, majd 20 ml éter és 100 ml petroléter hozzáadása után kristályosítjuk. Leszívatásés vákuumtan szárítás után 2,7 g (az elméleti hozam 87%-a) N-acetil-la-0-benzil-4,6-0-izopropilic'én-normuramil-L- [0- (N-benzil-oxi-karbonil-glicil) ] -szeril-D-izoglutamin-terc-butilésztert tápunk, amelynek bomláspontja 104°C. [a]£°= +75+1° (c=0,9; etil-acetát), R/=0,78 (kloroform/metanol/víz 70:30:5 aráryú elegye) Rf=0,30 (kloroform/izopropanol/jégecet 70: :3:2 arányú elegye) 7,0 g (14,35 mmól) N-acetil-la-0-benzil- i,6-0-izopropi lidén-norm ura mi nsav-nátrium - sót 70 ml dimetil-formamidban szuszpendálunk, 4,7 g L-szeril-D-izoglutamin-terc-butilészter-hidrokloridot és 4,3 g N-etoxi-karbonil-2-etoxi-1,2-dihidrokínolint adunk hozzá, és az egészet 19 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Szárazra pároljuk,és a maradékot kovasavgél-oszlopra visszük (1:20), a keletkezett kinolint kloroformmal lemossuk,és a terméket kloroform/metanol 95:5 arányú elegyével eluáljuk 5 ml-es frakciókban. A 35-100. frakciókból kapott tiszta anyagot összegyűjtjük 6,6 g (az elméleti hozam 68%-a) N-acetil-la-0-benzil-4,6-0-izopropilidén-normuramil-L-szeril-D-izoglutamin-terc-butilésztert kapunk színtelen habként. [iz]^°= + 81±1° (c= 1, metanol) 2. példa 2.5 g N-acetil-la-0-benzil-4,6-0-izopropilidén-normuramil-L- (0-behenoil) -szeril-D-izog'utamin-terc-butilésztert az 1. példa analógiájára 40 ml 2n sósavval etil-acetátban reagálhatunk. Szobahőmérsékleten 1 órás keverés u*án 50 ml vízmentes éter hozzáadásával a terméket kicsapjuk, 15 perces keverés után (t idegen) leszűrj ük, és a csapadékot nátriumazbeszt fölött szárítjuk. R =0,43 (kloroform/metanol/viz 70:30:5 arányú elegye). Az enyhén szennyezett terméket 25 ml dimetoxi-etán/víz 20:1 arányú elegyével bári-24 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 13
