194854. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a (+)-katechin új krisztálymódosulatainak és az azokat tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
194854 szati készítmények készítése vagy tárolása szempontjából. (Lásd a 3. táblázatot és a 3. ábrát). A mellékelt 1. ábra a találmány szerinti eljárással előállított a-monohidrát víztartalom-változását mutatja, ami a rajz szerint nem függ a környező atmoszféra nedvességtartalmától. Az is látszik az 1. ábrán, hogy a kristályvíz nélküli ö-módosulat könnyen átváltozik a-monohidráttá, de az a-monohidrát alacsony (0—20%) relatív nedvességtartalomnál alig mutat víztartalom-változást, és magas (60%-ná 1 nagyobb) relatív nedvességtartalomnál sincs lényeges változás. A 4. ábra hasonlóképpen, az ismert tetrahidrát, a ß-monohidrdt, és a kristályvíz nélküli rpmódosulat víztartalom-változását mutatja. A 4. ábra görbéiből látható, hogy ezeknek az ismert kristályvizes és kristályvíz nélküli módosulatoknak a víztartalma érzékenyen változik a környező atmoszféra nedvességtartalmának függvényében. A 2. ábrán a ß-monohidrdt és az a-monohidrát ultraibolya fénnyel szembeni stabilitását láthatjuk. A görbékből látható, hogy a ß-monohidrát elszíneződik (fehér színűből barna színűvé változik), míg az a-monohidrát nem mutat színváltozást ultraibolya fény hatására. (Lásd az alább következő 4. példát és a 2. ábrát.) Gyógyászati készítmények készítésénél a találmány szerinti eljárással előállított új (%)-katechin kristálymódosulatok, különösen az a-monohidrát, jelentős és döntő előnyökkel bírnak az ismert kristálymódosulatokkal szemben. Először: mivel az a-monohidrát nedvesség (vízzel) szemben stabil, a gyógyászati készítmények előállítása és tárolása alatt semmiféle nedvesség-(víztartalom)-szabályozásra nincs szükség. Továbbá, konstans hatóanyagtartalmú gyógyászati készítményeket állíthatunk elő. Végül, az ismert ß-monohidrátot tartalmazó gyógyszerkészítményektől eltérően, a találmány szerinti eljárással előállított új kristálymódosulatokat tartalmazó szilárd gyógyászati készítmények igen kis súly-, vastagság- és keménységváltozást mutatnak (lásd az 1. példát és a 3. táblázatot), és igen stabilak. Az aktív hatóanyagnak a gyógyászati készítményből való kioldódása nem változik (lásd a 7. példát, és a 4. táblázatot), és a gyógyszerkészítmény ultraibolya fénnyel szemben stabil (lásd a H. példát és a 3. ábrát). A találmány szerinti eljárással előállított új kristálymódosulatok, például az a-monohidrát biológiai aktivitása ugyanaz, mint az ismert ß-monohidrüte. (Lásd a 2. összehasonlító példát és az 5. ábrát.) Az új a-monohidrát, ha az a) eljárás szerint forró vízből kristályosítjuk, vagy vizes szuszpenzió formájában állítjuk elő a b) eljárás szerint, sokkal kevésbé keserű ízű, mini az ismert kristályformák. Ez azt jelenti, hogy a ( +)-katechint kisérő keserű ízt 10 17 a találmány szerinti eljárással eljárva, kiküszöböljük. A találmány szerinti eljárással előállított a-monohidrát, valamint a kristályvíz nélküli y- és ő-módosulatok, és az ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények ugyanolyan terápiás célokra, ugyanolyan beadási módokon, és ugyanolyan dózisokban alkalmazhatók [( + )-katechinra számítva], mint az ismert tetrahidrát vagy a ß-monohidrät. Például, akut hepatitisz kezelésénél, az új kristálymódosulatok orálisan, körülbelül 1,5—3,0 g/nap dózisban (kristályvíz nélküli (-(-)-katechinre számítva) adhatók személyenként, napi egy-két vagy három részletben. Az alábbi példák a találmány szerinti eljárást ismertetik részletesebben, anélkül, hogy igényünket ezekre a példákra korlátoznánk. Az alkalmazott jelölések: HPLC: nagynyomású folyadék-kromatográfia, RP típusú oszlop, az oldószer: metanol:ecetsav:víz 250:10: : 1000 TLC: vékonyréteg-kromatográfia, cellulóz-adszorbens, víz:dioxán 100:10 oldószerrendszer. 1. példa a) Előre tisztított (-f-)-katechin tetrahidrát vizes oldatát (4000 1, 10,5 t%tí% kristályvíz nélküli (-E)-katechint tartalmaz) keverés közben 3—4 óra alatt 75°C-ról 60°C-ra hűtjük. 65°C hőmérsékleten 1 kg a-monohidrát oltókristályt adunk hozzá. A reakcióedényt nitrogéngázzal elárasztjuk (1,2— 1,3 bar) és folyamatos keverés mellett hagyjuk 20°C-ra hűlni. Amikor a kristályosodás megszűnik, a szuszpenziót körülbelül 30 percig centrifugáljuk, amíg a kapott a-monohidrát kristályok víztartalma 21,6% nem lesz. A szárítást fluidizációs szárítóban 50°C hőmérsékleten körülbelül még egy óra hosszat folyatatjuk, ekkor a hőmérsékletet néhány percre 100°C fölé emeljük. A szárításnak akkor van vége, amikor a kristályvíztaúalom csak 1 mól (Karl-Fischer módszerrel ellenőrizve). A kapott ( + )-katechin monohidrát fizikai adatai: [a]o°=15° (víz:aceton 1:1 v/v) Víztartalom: számított: 5,85% talált: 6,23% (Karl-Fischer) HPLC: 101,3% ( + )-katechin (kristályvíz nélküli formára számítva) és 0,1%-nál kevesebb epikatechin; a HPLC vagy a TLC semmi egyéb szennyezést nem mutat; a röntgen-por-diagram a-monohidrát jelenlétét jelzi. A kapott ( + )-katechin a-monohidrát por-röntgen-diffrakciós spektrumának Angströmben (A) kifejezett rácsállandóit a CmK^n sugarak (L = 1,5405 Â) diffrakciós vonalaiból számítottuk, amelyeket Guinier IV kamera segítségével filmen rögzítettünk. Stan-18 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
