194547. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szubsztituált transz-1,2-diamino-ciklohexilamid-származékok, valamint ezeket a vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 194 547 2 fonsav, benzol-szulfonsav stb. — vagy ezek keverékével reagál tatjuk. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek szabad bázisai bizonyos fizikai tulajdonságok - például poláris oldószerekben való oldhatóság — tekintetében g eltérhetnek a savaddíciós sóktól, de a találmány célja szempontjából egyenértékűek. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek jelentős fájdalomcsillapító hatást mutatnak, ugyanakkor a túlzott hozzászokás veszélye minimális, mert szelektív kappa-opioid receptor megkötő tulajdonságokkal rendelkeznek. A fájdalomcsillapító hatáson túlmenően a szelektív kappa-agonjsták az opioid receptorok által kiváltott nyugtató, vizelethajtő és kortikoszteroid növelő hatást is mutatnak. Ezért a találmány szerinti eljárással ig előállított vegyületek nemcsak fájdalomcsillapító, hanem vizelethajtó és pszichoterápiás gyógyszerek hatóanyagaiként is használhatók. Állatokon, például egereken végzett szokásos laboratóriumi vizsgálatokban az (I) általános képletű vegyüle- 20 tek fájdalomcsillapító hatást mutatnak. Ha például az egérnek 100 mg/testsúly-kg 1. példa szerinti vegyületet tartalmazó készítményt adunk be szubkután, akkor a kontrollmintához képest hosszabb ideig, több mint 20 másodpercig (maximum 40 másodpercig) tűri az 55 °C- 25 ra felmelegített lemezt. Az acetil-kolin hatására fellépő vonaglást is csökkenti az 1. példa szerinti vegyületet tartalmazó készítmény 20 és 200 mg/kg-os szubkután dózisban . A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek- 3Ç nek a kappa opioid recepíorhelyekhez való kötődési aktivitását a következő módszerrel mértük: tengerimalacok agyából minden nap friss homogenizátumot készítettünk, és a Gillan és munkatársai [Br. I. Pharm., 80, 481 -490 (1980)] által leírt eljárást alkalmaztuk. 35 A triciummal megjelölt etorfinnak az agyszövethomogenizátumhoz való kötődését a találmány szerinti eljárással előállított, jelöletlen vegyületek jelenlétében mértük (kompetitiv reakcióval) oly módon, hogy a delta, illetve mű opioid receptorok telítése céljából 200 nano- 4p mól D-Ala-D-Leu-enkefalint (DADLE) és 200 nanomól D-Ala-MePhe-Gly-ol-enkefalint (DAGO) alkalmaztunk. A reakciót gyors szűréssel fejeztük be, és a szüredék radioaktivitását folyadék-szcintillációs spektrofotográfiával mértük. A találmány szerinti eljárással előállított vegyieteknek a mű és delta opioid receptorhelyekhez való kötődési aktivitását a következő módszerrel mértük: tengerimalacok agyából minden nap friss homogenizátumot készítettünk, és Gillan és munkatársai által leírt, fent idézett módszert alkalmaztuk. A homogenizátumokat a mű rcceptorhelyekhez való kötődés meghatározására 150 percen át 0°C-on, triciummal megjelölt DAGO-val inkubáltuk, a delta opioid receptorhelyekhez való kötődés meghatározásához pedig ugyanilyen körülmények között triciummal megjelölt DADLE-t alkalmaztunk, jelöletlen DAGO tízszeres feles legének jelenlétében. A nem-specifikus kötődést 10~6 M DAGO és 10~6 M DADLE jelenlétében határoztuk meg. A reakciókat gyors szűréssel fejeztük be, és a szüredék radioaktivitását folyadék-szcintillációs spektrofotográfiával mértük. A kapott eredményeket a Scatchard [Ann. N. Y. Acad. Sei., 51 660-672 (1949)] és Hill [J. Physiol., 40 IV—VIII (1910)] által leírt módszerekkel elemeztük. Annak meghatározásához, hogy a hűtött ligandumok milyen mértékben gátolják a triciummal megjelölt etorfin, DAGO és DADLE kötődését, felhasználtuk a specifikus kötődés inhibíciós százalékának, illetve a hűtött ligandum koncentrációjának regresszióját (mindkettőt logaritmusos léptékben). Az inhibíciós állandót az alábbi egyenletből számítottuk: ' 1 + [L]KD ’ ahol [L] a megjelölt ligandum koncentrációja, Kg pedig a ligandum disszociációs egyensúlyi állandója. A találmány szerinti eljárással előállított néhány vegyületre vonatkozó vizsgálati eredmények az I. táblázatban láthatók. I. táblázat Rí R2 n X R<j> R7 (Ki M) Kappa Mű Pirrolidinil 1 0 4-C1, H 9,2 X 10~7 > 10"5 pirrolidinil 1 0 2,3-di Cl 10-7-10"8 > 10'6 pirrolidinil 1 0 ■ 3,4-di Cl 3,48X 10'8 6,2 IX 10 7 pirrolidinil 1 0 2,4-di Cl 1,71 X 10~7 > 10'6 pirrolidinil 1 s H, H ~ 10~6 > 10"6 pirrolidinil 1 0 4-F, H 1,16X 10~7 4,03 X 10’6 pirrolidinil 1 0 3-C1, H 9,25 X 10~8 L38X10'6 pirrolidinil 1 0 2,6-d: Cl 2,14X 10~6 3,96 X 10'6 pirrolidinil 1 0 4-O-C H3 > 10~6 > 10~6 pirrolidinil 1 0 H, H ~ 10~6 > 10~6 pirrolidinil 1 0 2-C1, H 1,99X10'7 > 10-6 pirrolidinil 1 0 4-CHj.H 8,63 X 10~7 3.33X10'6 4
