194315. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új szénhidráttartalmú antibiotikumok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására

1

194 315

2

lódisok és csatolások: delta« (DMSO-d6):

10.64 (s, 1H, N5 -H), 9,27 (d, 1H, Cl-H or Cl H), 9.18 (d, 1H, G H vagy Q-H)„7.88 (d, 1H, C4- -H), 7.73 (m, 2H, C3-H és C3 -H), 7.49 (m, 2H, C2-H és C2’H), 6.91, (d, 1H, GT(), 5.48 (brs, 111, C3 -OH), 4.81 (brs, 1H, C3 -QH), 4.21 (brd, 1H, C6? -H), 4.08 (brd, 1H, Ç? -H), 3.99 (dd, 1H, C6b -H), 177 (d<?„ 1H, Q ,-H), 3.(>0- 3.70 (m, 6H, C2 -H, Cr -H, -H, C5a , -H. C5b”, -HY 3.68 (s, 3H, C4-H -OCH3), 3.40 (m, 1H, C4 H átfedés H,O-val), 3,25 (s, 3H, N8-CH3), 2.30 (111, 2H, C4 ,-NH, C2 -H). 2.22 (s, 3H, C4’”-NCH3), 1.78 (m, 1H, C2b ,-H).

1 *C NMR-spektrum (90 MHz)

A mért kémiai eltolódások és hozzárendelések:

delta^ (DMSO-d6):

PPM

Szénatom

PP

Szénatom

169.0

C7

117.6

C5b

169.0

C7’

116.4

C4

140.2

C4a

112.1

C4

138.1

C4a’

99.0

ci”’

130.0

C5a

84.7

Cl

129.7

C3

78.8

C3

129.5- C5a’

78.1

C4 ,

127.8

C3

77.5

C5

125.3

C5c

72.2

C2”

124.6

Cl

66.5

C3’

123.4

Cl

66.0

C6

122.4

C2

61.8

C5

121.4

C5c’

61.7

C4”’

121.3

C6

60.1

C4-OCH3

121.0

C2’

37.0

C2,„

119.2

C6’

33.9

C4 -NCH3

118.4

C5b

23.6

CtCH3

Tömegspektrum (CI-MS-CH4): M/Z

= (M ♦ 1 )

Vili. táblázat

AT 2433 A2 : olyan (I) általános képletű vegyület, amelyben X klóratomot és R hidrogénatomot jelent.

Leírás: Sárga amorf szilárd anyag összegképlet: C33H33C1N409 Molekulatömeg: 665,10 Térdaszorpciós kis- és nagyfelbontású tömegspektroinetriás módszerrel meghatározva

US-spektrum: lambda ^ (c 0,0158 g/1 CH3OH) A mért maximumok és elnyelések (zárójelben) = 198 nm (45.9), 233,5 (mn (58.2), 286 nm (0.6), 314 nm (66.1), 394 nm (5.2).

IR-spektrum: lambda (KBr): 3420, 3355, 2930, 1745, 1691, 1575, 1472, 1458, 1438, 1380, 1330, 1278, 1240, 1140, 1120, 1080, 1045, 765, 755 cm'1.

lH NMR-spektrum (360 MHz): A mért kémiai eltolódások és csatolások: delta« (DMSO-d6):

10.64 (s, 1H, N5’-H), 9.27 (d, 1H, G-H vagy Cl’-H), 9.18 (d, 1H, G-H vagy Cl-H), 788 (d, 1H, C4’-H), 7.33 (m, 2H, C3-H és C3’-h), 7.49 (m, 2H, C2-H és C2’-H), 6.91 (d, 1H, CP'-H), 5.48 (brs, 1H, C3”OH), 5.14 (m, 1H, G”,-H), 5.06 (brs, 1H, C2”'OH), 4.81 (brs, 1H,C3”,-0H), 4.21 (brd, 111, C6a”-H), 4.08 (brd, 1H, C5”-H), 3.99 (dd, 1H, C6b”-H), 3.68 (s, 3H, C4---OCH3), 3.72-3.30 (m, 7H, C2”-H, C3”-H, C4”-H, C3’” -H, C4’”-H, C5a’”-H, C5b’”-H átfedés H2 O-val), 3.25 (s, 3H, N8-CH3), 2.55 (m, 2H, C4”’-HN2), 2.32 (m, 1H, C2a’”-H), 1.73 (m, 1H, C2b’”-H).

Tömegspektrum: Térdeszorpdós kis- és nagyfelbontású mérések:

FD-LR-MS. m/z 664 (M)+

M/Z 687 (M+Na)+

FD-HR-MS: m/z 664,1795 mért,

664,1936 a C33H33C1N40» összegképlet alapján számított

4. példa

Az AT2433 Bx és fí2 elválasztása:

Egy 2,65 cm belső átmérőjű és 60 cm magas Glenco oszlopot Baker C-18 kovasavgél (0,040 mm az átlagos részecskeméret) metanolos szuszpenziójával töltünk meg. Az oszlopot közepes nyomású kromatográfiás rendszerbe kapcsoljuk, és 3 rész acetonitrilt, 3 rész metanolt és 4 rész 0,1 mólos ammóniumacetátot tartalmazó eluálószerrel hozzuk egyensúlyba. A 2D) példában kapott AT 2433 B anyag 360 mg-ját 2 ml dimetü-szulfoxidban a mintatartóba visszük, és az eluálószerrel az oszlopra szivatjuk. Megkezdjük az eluálást, és az eluátumot ISCO UV- detektorral 405 és 435 nm-nél vizsgáljuk. A 14—19. frakciókból 5 rnikrolitemyi mennyiségeket u-Bondapak C-18 oszlopon HPLC technikává] kromatografálunk, 4 rész acetonitrilt, 3 rész metanolt és 3 rész 0,1 mólos ammónium-acetátot tartalmazó elegyet használva eluálószerként. A 14-16, frakciókat összeöntjük, és 500 ml kloroformmal extraháljuk. Az alsó, klorofonnos fázist elválasztjuk és szárazra pároljuk, így AT 2433 B2-t kapunk. A 17-24. frakciókat is egyesítjük és 500 ml kloroformmal extraháljuk. Az alsó, kloroformos fázist elválasztjuk, és szárazra pároljuk, így nyers AT 2433 Bi-t kapunk. A nyers AT 2433 B2 -t újrakromatografáljuk, és a fentiek szerint különítjük el, így megközelítőleg 180 mg tiszta AT 2433 B, -t kapunk.

Az AT 2433 Bt és B2 fizikai és kémiai tulajdonságait a IX. és X. táblázatban foglaltuk össze:

IX. táblázat

AT 2433 B, : olyan (1) általános képletű vegyület, amelyben X hidrogénatomot és R metilcsoportot jelent.

Leírás: sárga amorf szilárd anyag összegképlet: C34H36N409 Molekulatömeg: 644,68 'Térdeszorpdós kis- és nagyfelbontású tömegspektroinetriás és CI-MS-CH4 módszerrel meghatározva UV-spektrum: lambda (c 0,0222 g g/1 CH3OH),

A mért maximumok es elnyelések (zárójelben) = 202 nm (45.0), 234 nm (64.1), 284 nm (52.2), 316 nm (72.9), 400 mn (6.3).

IR-spektrum: lambdarn„Y (KBr): 3363, 2940, 1750, 1692, 1575, 1475,a 1460, 1435, 1380, 1332, 1240,1185, 1105,1010, 750 cm'1.

1H NMR-spektrum (360 MHz): A mért kémiai eltolódások és csatolások: deltaH (DMSO-d6):

10.50 (brs, 1H, N5’-H)?932 (d, 1H, Cl-H vagy Cl’-H), 9.21 (d, 1H, Cl’-H vagy Cl-H), 8.14 (d, 1H, C4-H), 7.86 (d, 1H, C4’-H), 7.68 (m, 2H, C3-H és C3'H), 7.48 (m, 2H, C2-H és C2"H), 6.44 (d, 1H, Cl’-H), 5.6—4.6 (br. m, 4H, C3”-oH, C’”-H, C2”-OH, C3”-OH), 4.3-3.2 (m, 10H, C2”-H, C3”-H, C4”-H, C5”-H, C6a”-H, C6b”-H, C3”'-H, C4’”-H, C5a’”-H, C5b”’-H), 3.68 (s, 3H, C4”-OCH3), 3.25 (s, 3H, N8-CH3), 2.35 (m, 1H, C4”’-NH), 2.30 (s, 3H, C4’”-NCH3), 2.03 (m, 1H, C2a”’-H), 1.60 (m, lH,C2b”’-H).

11

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60