193928. lajstromszámú szabadalom • Eljárás bbm-1675 jelű daganatellenes hatású antibiotikumok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására

193928

Minimális gátlási koncentráció agar-diffúziós teszttel (mcg/ml)

33 34

Törzs

BBM-1675 Ai

a2

a3

A^

S. aureus 209P

^0,0008

0,0063

0,0063

0,012

S. aureus Smith

^ 0,0008

0,0031

0,0063

q,oi2

E. subtilis PCI 219

Z 0,0008

0,05

0,012

0,025

M. luteus 1001

0,0016

0,0063

0,012

0,05

M. flavus

Z0,0008

0,0016

0,0063

0,012

Mycobacterium 607

0,05

0,1

0,16

0,16

E. coli NIHJ

0,1

0,8

1,6

3,1

K. pneumoniae D11

0,4

0,8

1,6

3,1

P. aeruginosa D15

0,8

1,6

3,1

3,1

B. fragilis A20928

0,2

1,6

0,2

0,4

C. difficile A21675

0,4

0,8

0,05

0,4

C. perfringens A9635

0,05

0,8

0,4

0,4

C. albicans IÁM 4888

0,4

0,4

1,6

6,3

C. neoformans

1,6

3,1

1,6

6,3

A profág aktivitás indukciójának értékét a BBM-1675 komponensekre lizogén E. coli W1709 (lambda) baktériumon Leinet al. (Nature, 196, 783-784 (1962)) módszerével határoztuk meg. A vérlemezek számlálását agar lemezeken végeztük, amelyek a vizsgált anyagot (T) és a kontroll vérlemezt (C) tartalmazták. A vérlemez számlálása során a 3,0 értéket

meghaladó T/C arányt ítéltük szignifikáns- 25 nak és a lizogén indukciós aktivitást (1LB aktivitás) a vizsgált vegyület indukciót előidéző minimális koncentrációjában fejeztük ki. Amint a XVII. táblázat bemutatja a BBM-1675 komponensek erős ILB aktivitást mutattak a 30 lizogénbaktériumoknál, ezáltal felvetve azt, hogy tumorellenes hatásúak lehetnek.

XVII. Táblázat

A BBM-1675 komponensek lizogén indukciós aktivitása

Antibiotikum Indukciót kiváltó minimális koncentráció (mcg/ml)

BBM-1675

Ai

0,0063

BBM-1675

a2

0,0125

BBM-1675

a3

0,05

BBM-1675

a4

0, 10

BBM-1675

Bi

0.10

BBM-1675

b2

0,20

A BBM-1675 A, és A2 daganatellenes hatását különféle egér-tumor rendszereken határoztuk meg. Limfocita leukémiát (P-388), limfoid leukémiát (1-1210), melanózisos melanomát (B-16) és Lewis tüdőkarcinomát ültettünk be intraperitoneálisan BDF, hím egerekbe egerenként 106, 105, 5 x 105 és 106 sejt inokulálásával, az előbbi felsorolás sorrendjében vonatkoztatva. A daganatsejtek beültetését követően 24 óra múlva a vizsgált vegyületek lépcsőzetes adagjait adtuk be intraperitoneáüsan az egereknek. A kezelést az első napon csak egyszer, az 1., 4. és 7. napokon (q3d x 3), naponta egyszer 9 napon át (qd l->9) vagy 11 napon át (qd 1 —* 11 ). Az A3 és A4 kompo-18

nenseket csak a P-388 leukémiára teszteltük q3d x 3 adagolással az anyagellátás szűkössége miatt.

A BBM-1675 A,-et, A2-t, A3-at és A4-et fiziológiás konyhasó oldatában oldottuk, - amelyben 10% dimetil-szulfoxid volt. összehasonlító anyagnak ugyancsak fiziológiás konyhasóban oldva chromomycin A3-at (Toyomycin, Takeda) alkalmaztunk. A kezelt és kezeletlen egerek elhullását vagy túlélését naponta feljegyeztük, és a közepes túlélési időt (MST) minden kezelt (T) és kezeletlen (C) csoportra kiszámítottuk. A 125%-ot elérő vagymeghaladó T/C érték számottevő daganat-60

65