193890. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a központi idegrendszerre ható piridazin-származékok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
193890 Eredmények A példa száma Átlagos hatásos koncentráció (EC50) triciált GABA helyettesítésében (pm) 11 35 2,8 36 1,34 23 2,9 37 10 32 0,70 30 1,25 26 5,0 40 2,4 39 10,5 45 3,0 41 0,83 29 7,0 28 3,2 33 0,71 Konklúzió A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek képesek kiszorítani a gamma-amino-vajsavat szinaptikus receptoraiból. Ezt az in vitro vizsgálatot a következő in vivo vizsgálatokkal egészítettük ki. 1 ) Egerek mozgékonyságára kifejtett hatás A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek trankvilláns-szedatív hatását egerek spontán mozgékonyságának mérésével, a Boissier, J.R. és Simon, P. által az Arch. Int.Pharmacodyn., 158, 212-221 szakirodalmi helyen ismertetett módszer szerint vizsgáljuk. A vizsgálathoz Apelab típusú, 26 cm hoszszú, .21,5 cm széles és 10 cm magas ketreceket használunk. A ketreceken két fénynyaláb hatol át, és ezek egy fotoelektromos cellára hatnak. Az állatokat egyenként helyezzük el a ketrecekben 45 perccel a kísérleti vegyület orális beadását követően, és mindegyik fénynyaláb keresztezését egy individuális számlálóberendezéssel számláljuk. Az állatok mozgásának megfelelő eredményösszegeket 10 percre állapítjuk meg. Dózisonként 12-12 egeret használunk. 2) Reserpine-nel kiváltott ptózis antagonizálása A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek antidepresszív hatását a reserpine-nel egereken kiváltott ptózis antagonizálásán alapuló tesztben határozzuk meg. A vizsgálat során 20±1 g tömegű nőstény egereket használunk, egy-egy dózis vizsgálatához 10-10 egeret. A kísérleti vegyületeket intraperitoneálisan adjuk be ugyanakkor, amikor 2 mg/kg dózisban intravénásán a reserpine-t (3,4,5-trimetoxi-benzoil-rezerpát; Merck Index, 8. kiadás, 912. oldal). A beadás után 1 órával egyenként megfigyeljük a kísérleti egereket. A megfigyelés 15 másodpercében ptózist nem mutató állatokat tekintjük antagonizáltaknak. A csak hordozóanyaggal és reserpine-nel kezelt kontrollállatoknál kivétel nélkül ptózis mutatkozott. Az eredményeket ED50-ként, vagyis a kezelt állatok 50%-ánál a ptózis megelőző dózisként adjuk meg. 3) Egereken a forgási viselkedésre gyakorolt hatás a nigro-striatum 6-hidroxi-dopaminnal történő unilaterális megsértése után Ezt a hatást a striatum unilaterális (egyoldali megsértése után a forgási viselkedés analízis útján vizsgáljuk. A vizsgálat alapját a Protais, P. és munkatársai által a J. Pharmacol., 7. 251 (1976) szakirodalmi helyen közöltek képezik. A kísérletek megkezdése előtt 20-24 g súlyú, a Charles River CDI törzsbe tartozó nőstény egereknél a striatumot unilaterális megsértésnek vetjük alá 6-hidroxi-dopamint sztereotaxikusan injektálva 8 mcg/állat arányban. Ezután az operáció után egy héttel a vizsgálni kívánt vegyületeket 7-7 egértől álló kísérleti csoportoknak adjuk be intraperitoneálisan. A vizsgálandó vegyület beadása után 1 órával a forgások számát 2 percen át megállapítjuk. A sérülésre vonatkoztatva azonos oldalon végbemenő forgásokat pozitiven, míg az ellentétes oldalon végbemenő forgásokat negatívan számoljuk. A kezelt állatok egy adott csoportjánál végbemenő forgások algebrai összegét összehasonlítjuk a csak a hordozóanyaggal (fiz ológiás szérum) kezelt kontrollállatok csoportjánál végbemenő forgások algebrai összegével. Az eredményeket a kezelt állatoknál végbemenő forgásoknak a kontrollállatoknál végbemenő forgásokhoz viszonyított százalékában fejezzük ki. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek közül a 38. példa szerinti vegyülettel kapott eredményeket a IV. táblázatban ismertetjük. 12 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 Egerek mozgékonysága Reserpine-nel Egerek forgási Dózis Hatás kiváltott ptózis viselkedése (mg/kg) antagonizálása Dózis Hatás EDso (mg/kg) (mg/kg) 100-48%** 29 0,5 -50% x * 50-33% * (26-32)* 2 -62% *x * = p 0,05 x/ = p 0,01
