193887. lajstromszámú szabadalom • Eljárás enkefalináz-gátló szubsztituált alanin-származékok és e vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
193887 A fenti reakcióban, amikor a reakciópartnerek reakciója vízképződéssel jár (például a (II) és (III) általános képletű vegyületek kondenzációja az 1. eljárásban) a reakció végbemenetelét elősegíthetjük a képződött víz alkalmas, magas forráspontú oldószerekkel, például toluollal vagy xílolial végzett azeotróp desztillácíójával. A reakció úgy is elősegíthető, ha dehidratáló szereket, például molekulaszűrőt vagy hasonlókat alkalmazunk. A fentebb leírt eljárásokban és előállításokban alkalmazandó különféle közbenső termékeket az 54862 számú európai szabadalmi leírásban ismertetett közvetlen vagy analóg eljárásokat követve állíthatjuk elő. A találmány szerinti vegyületek előállításának egy sor közbenső terméke a kereskedelemben kapható vagy a szakirodalomban található eljárásokkal könnyen előállítható. A találmány szerinti vegyületek nagy számának előállításához szükséges közbenső termékeket vagy azok szintézisét írják le a peptidkémiára vonatkozó közlemények és tanulmányok, így például J.H. Jones a „Comprehensive Organic Chemistry” 2. kötet, D. Barton és W.D. Ollis szerkesztésében (Pergamon Press, 1979, 819—823. oldal és 2., 29—31. citátumok) Ezen közlemény vonatkozó részeit utalás formájában beépítettük a leírásba. A következő példák a találmány szerinti vegyületek előállítását mutatják be. 1 1. példa N- [N- [L-l-Karboxi-2-(4-fenil)-fenil-etil] -L-fenil-alanil ] -ß-alanin-benzil-eszter A) 4-feniI-piroszőlősav 150 ml dietil-oxaláthoz kis részletekben 40 g kálium-terc-butoxidot adunk keverés közben. A kezdeti exoterm reakció lejátszódása után az elegyet gőzfürdőn, nitrogén atmoszférában melegítjük, hogy a szilárd anyag feloldódjon. Szobahőmérsékletre való hűtés után egy részletben 79 g 4-bifenil-ecetsav-metil-észtert adunk az elegyhez, majd 60—70°C-on keverjük 2 óra hosszat, miközben az alacsony forráspontű anyagot vákuumban eltávolítjuk. Szobahőmérsékletre hűtés után viszkózus maradékot kapunk, amelyet 200 ml éterrel és 350 ml vízzel keverünk el hűtés közben. Az éteres réteget elválasztjuk és egyszer 100 ml vízzel extraháljuk. A vizes rétegeket egyesítjük, egyszer éterrel extraháljuk, majd hűtés közben tömény sósavval megsavanyítjuk és két alkalommal 300—300 ml éterrel extraháljuk. Egy kevés szilárd anyag nem oldódik az éteres rétegben, ezt kiszűrjük. Az éteres réteget aztán szárazra pároljuk és a félig szilárd maradékot az előbbi szilárd anyaggal egyesítjük. 160 ml tömény sósav és 350 ml ecetsav elegyét adjuk a szilárd/félig szilárd maradék keverékéhez, és 2,5 óra hosszat forraljuk. Ezután 50°C-ra hűtjük és szilárd anyag válik ki, amit szűrünk és 150 ml vízzel mossuk. A nedves szilárd anyagot öt percig 150 ml acetonitrillel keverjük, majd 7 szűrjük és szobahőmérsékleten nagyvákuumban 3 órán át szárítjuk. így 42,2 g cím szerinti terméket kapunk, amely 215—218°C-on olvad. B) N- [ N- [ N-terc-Butil-oxi-karbonil] -L-fenil-alanil] -ß-alanin-benzil-6szter Egyenként 0,023 mól di(terc-butil)-di(karborát, L-fenil-alanin, ß-alanin-benzil-0szter-(p-toluol)-szulfonát, hidroxi-benzotriazol, N-dimetil-amino-propil-N’-etil-karbodiimid-hidroklorid 75 ml száraz N,N-dimetil-formamiddal készült elegyéhez jégfürdőben keve rés közben 5 ml N-etil-morfolint adunk és az elegyet szobahőmérsékleten keverjük 3 óra hosszat, majd 600 ml jeges vízbe öntjük és háromszor 150 ml éterrel extraháljuk. Az éteres rétegeket egyesítjük és egyszer 150 ml 0,3 n sósavval, majd 2x300 ml vízzel extraháljuk és nátrium-szulfáton szárítjuk. Szűrés és 28°C-on vákuumban való szárazra párlá5 után 9,0 g gumiszerü szilárd maradékot ke punk. C) N-(L-Fenil-alanil)-ß-aIanin-benzi!-0szter-hidrokiorid 4,0 g az 1B) példa szerint kapott terméket 25 ml etil-acetátban 0°C hőmérsékleten hidrogén-klorid gázzal keverünk 10 percig. A keverést 0°C-on 1,5 óra hosszat, majd 10°C-on 30 percig folytatjuk. Nitrogén áramot vezetünk az oldatba a só hidrogén-klorid feleslegének eltávolítására. Az oldatot 200 ml éterbe öntjük élénk keverés közben, és a kivált szilárd anyagot kiszűrjük, majd szobahőmérsékleten nagyvákuumban szárítjuk 2 óra hosszat, így 3,35 g terméket kapunk. D) N- [N-[L-l-Karboxi-2-(4-fenil)-fenil-etil] - -L-fenil-alanil]-ß-alanin-benzil-eszter 9,10 g N-(L-fenil-alanil)-ß-alanin-benzilészter-hidroklorid és 8,40 g, az 1A) példa szerint kapott termék elegyéhez 500 ml tetraűdrofurán-éter 9:1 elegyben pH = 6,6-ig trietil-amint adunk, és szobahőmérsékleten 1,5 ára hosszat keverjük. 2,0 g nátrium-ciano-bór-hidrid 100 ml tetrahidrofurán-etanol elegyével készült oldatát keverés közben két óra alatt a fenti oldathoz csepegtetjük. A keverés szobahőmérsékleten egy éjszakán keresztül folytatjuk, a reakcióelegyet vákuumban, 40°-on 75 ml-re bepároljuk. A maradékot 400 ml, 0,5 n sósavval és 400 ml éterrel keverjük 1 óra hosszat. Az éteres réteget nátrium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és vákuumban szárazra pároljuk. Sárga viszkózus szirupot kapunk, amelyet 25 ml etanolban oldunk. Az oldatot egy éjszakán át hűtjük, miközben szilárd anyag válik ki, amelyet szűrünk, hideg etanollal mosunk (4,2 g termék), majd 300 g kovasavgélt tartalmazó oszlopon kromatografálunk kloroform : metanol : ecetsav = 200:10:2 arányú elegyét használva eluálószerként. Az eluátumot frakciók formájában gyűjtjük, ezeket vákuumban szárazra pároljuk. Ily módon 600 mg cím szerinti szilárd terméket kapunk, amely 192—194°C-on olvad. 8 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
