193887. lajstromszámú szabadalom • Eljárás enkefalináz-gátló szubsztituált alanin-származékok és e vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
193887 2. példa N- [N- [L-l-Karboxi-2-(4-fenil)-fenil-etil] -L-fenil-alanil] -ß-alanin Az 1. példában leírt módon kapott termék 590 mg-ját 100 ml etanolban szuszpendáljuk és Parr készülékben 200 mg 10%-os palládium-szén katalizátorral egy éjszakán át rázzuk. A kapott elegyet 40 ml etanollal és 10 ml vízzel hígítjuk, majd rövid ideig gőzfürdőn melegítjük, hogy a fehér csapadék teljesen feloldódjon. Hűtés után a katalizátort kiszűrjük. A szűrletet 50°C-on vákuumban 5 ml-re bepároljuk. A szilárd anyagot kiszűrjük, etanollal mossuk és szobahőmérsékleten, nagyvákuumban 6 órán át szárítjuk, így 155 mg cím szerinti terméket kapunk, amely 226— 228°C olvad. ]a]o = —16,8° (c = 0,5, DMF) 3. példa N- [N- [L- [1- [Pivaloil-oxi-metoxi] -karbonil ] - -2-fenil-etil] -L-fenil-alanil] -ß-alanin-pivaloil-oxi-metil-észter A) N-(terc-Butil-oxi-karbonil)-ß-alanin-pivaloil-oxi-metil-észter Egy 1 literes gömblombikba 40 g N-terc-butil-oxi-karbonil-ß-alanin és N,N’-dimetil-formamid elegyéhez 32,4 ml trietil-amint adunk szobahőmérsékleten, nitrogén atmoszférában. Az oldatot 15 percig keverjük és 36,6 g klór-metil-pivalátot [M. Rasmussen and N.J. Leonard, J. Amer. Chem. Soc. 89, 5439 (1967)] csepegtetünk hozzá 0°C-on. Az oldatot éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük majd etil-acetáttal hígítjuk, szűrjük, vízzel, majd telített nát rium-klorid-oldattal mossuk és bepároljuk, így 70 g nyersterméket kapunk, amelyet ko vasavgélen kromatografálunk és eluálószerként 15% etil-acetátot tartalmazó hexánt használunk, így 62,5 g terméket különítünk el. B) ß-Alanin-pivaloil-oxi-metil-eszter-trifluor-acetát A 3A) példában kapott 62 g termék 180 ml metilén-kloriddal készült oldatához 0°C-on 100 ml trifluor-ecetsavat adunk. Az elegyet szobahőmérsékleten két órán át keverjük és az oldószert vákuumban eltávolítjuk, így 100 g halványsárga olajat kapunk. C) N- [L-l-(Fenil-metoxi)-karbonil-2-fenil - -etil] -L-fenil-alanin 190,4 g (0,652 mól) L-fenil-alanin-benzil-észter-hidrokloridot 960 ml abszolút metanolban szuszpendálunk, 6,7 liter, 3A molekulaszürőn szárított tetrahidrofuránt adunk hozzá és a szuszpenziót keverjük, miközben kb. 50 ml trietil-amint adunk hozzá, hogy a pH értéke 6,5—7,0 legyen. A pH-t a pH=5—10 tartományban mérő EM Reagents ColorpHast indikátorral ellenőrizzük, amelyet használat előtt megnedvesítünk. A semleges szuszpenzióhoz 200 g (0,98 mól) nátrium-fenil-piru - vát-hidrátot (Sigma) adunk, majd 240 g aprított 3A molekulaszűrőt (a szűrőt elég mozsárban aprítani, nem kell, hogy finoman porított legyen). Ha túl finom szemcséjű, nehéz szűréssel eltávolítani). A szuszpenziót 9 6 szobahőmérsékleten keverjük, miközben 61,6 g (0,98 mól) nátrium-ciano-bór-hidrid 40 ml metanollal és 300 ml száraz tetrahidrofuránnal készült oldatát csepegtetjük hozzá 5 óra alatt.A reakcióelegyet szobahőmérsékleten 48—72 óra hosszat keverjük,miközben vékonyrétegkromatográfiásan követjük a benzil-észter eltűnését. A reakcióelegyből a molekulaszűrőt kiszűrjük, forró metanollal lemossuk róla a rákristályosodott terméket. A szűrletet forgó bepárlóban 50°C-on sziruppá koncentráljuk. Ezt a szirupot 2,4 liter été ben oldjuk egy 12 literes gömblombikban és jeges fürdőben való hűtés közben 2,4 liter 2,5%-os vizes sósavat adunk hozzá. A nagymennyiségben fejlődő hidrogén-cianidot nátrium-hidroxidos csapdába vezetjük. Az elegyet 2,5—3 órán át keverjük, miközben a fázis-határon fehér szilárd anyag válik ki fokozatosan és a hidrogén-cianid fejlődés megszűnik. A kétfázisú elegyet szűrjük (a vizes fázis nagyrészét elválaszthatjuk a szűrés előtt, mivel a termék a fázishatáron marad) és a szilárd anyagot éterrel alaposan mossuk és vákuumban 50°C alatt szárítjuk. így 80-90 g terméket kapunk, amely 175—180°C-on olvad. Ez az anyag a vékonyrétegkromatográfiás becslés alapján 90—95%-os tisztaságú L,L-izomcr. A nyers terméket kb. 10 liter forró, abszolút metanolban újra oldjuk, a kevés finomeloszlású fehér, szervetlen oldatlan anyagot kiszűrjük és a szűrletet a forrás hőmérsékletén 5 literre pároljuk be, amikor is pelyhes fehér kristályok jelennek meg. A terméket hagyjuk lassan szobahőmérsékletre hűlni, és aztán 0°<>on hagyjuk állni 2—3 óra hosszat. A szilárd anyagot szűrjük és vákuumban 50°C-on szárítjuk, így 57- 60 g terméket kapunk, an ely 185—186°C-on olvad, [n]£6 = 5,9— 6,3° (néhány sarzs eredménye) (DMSO, c — 1). A termék vékonyrétegkromatográfiás és nagynyomású folyadékkromatográfiás analízis szerint 98%-nál több L,L-izomert tartalmaz. D) N-(L-1-Benzil-oxi-karbonil-2-fenil-etil)-L feniI-alanin-(piyaloil-oxi-metil)-észter 4,03 g (10 mmól) 3C) példa szerint kapod termék és 1,5 ml (11 mmól) trietil-amin 20 ml dimetil-formamiddal készült oldatához szobahőmérsékleten 1,6 ml (11 mmól) klór-metil pivalátót adunk, és az elegyet 50—60°C-on keverjük 24 óra hosszat. A kapott szuszpenziót vízbe öntjük és 3x100 ml éterrel extraháljuk. Az oldatlan részt kiszűrjük és az éteres fázist vízzel mossuk, szárítjuk és bepároljuk, így 4,8 g olajat kapunk az NMR-spektrum megfelel a cím szerinti vegyület szerkezetének. Ei N-(L-Karboxi-2-fenil-etil)-L-fenil-alaninpivaloil-oxi-metil-észter A 3D) példában kapott 4,8 g nyers diészte t Parr készülékben 4,13 bar nyomáson 50 ml metanolban és 5 ml vízzel készült oldatban OH g 10%-os palládium-szén jelenlétében 3 óra hosszat hidrogénezzük. Ezután a reakcióelegyet szűrjük, majd szárazra pároljuk, a 10 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
