193866. lajstromszámú szabadalom • Eljárás humán növekedési hormont kódoló DNS-szekvenciát tartalmazó plazmid E. coli baktérium előállítására
24 31 193866 34 32 Alá Phe Asp Thr Tyr Gin Glu Plie Glu Glu Alá Tyr He Pro Lys---G GCC TTT 40 CAC ACC TAC 43 CAG GAG TTT GAA GAA CCC TAT ATC CCA AAG Glu Gin Lys Tyr Ser Phe Leu Gin Asa Pro Gin Thr Ser Leu Cys GAA CAG AAG TAT TCA TTC CTG 60 c:ag AAC CCC CAG ACC TCC CTC TGT Phe Ser Glu Ser He Pro Thr Pro Ser Asn Arg Glu Glu Thr Gin TTC TCA GAG TCT ATT CCG ACA CCC TCC AAC AGG 80 GAG GAA ACA CAA Gin Lys Ser Asn Leu Glu Leu Leu Arg He Ser Leu Leu Leu He CAG AAA TCC AAC CTA GAG CTG C1C CGC ATC TCC CTG CTG CTC ATC Gin Ser Trp Leu Glu Pro Val Gin Phe Leu Arg Ser Val Phe Alá CAG TCG 100 TGG CTG CAG CCC GTG CAG TTC CTC AGG AGT CTC TTC GCC Asn Ser Leu Val Tyr Gly Alá Sár Asp Ser Asn Val Tyr Asp Leu AAC AGC CTG GTG TAC GGC GCC TCT GAC AGC AAC GTC TAT GAC CTC Leu Lys Asp Leu Glu Glu Gly He Gin Thr Leu Met Gly Arg Leu CTA AAG GAC CTA GAG GAA GGC ATC CAA ACG CTG ATG GGG AGG CTG 140 Glu Asp Gly Ser Pro Arg Thr Gly Gin He Phe Lys Gin Thr Tyr GAA GAC GGC AGC CCC CGG ACT GGG CAG ATC TTC AAG CAG ACC TAC Ser Lys Phe Asp Thr Asn Ser Hís Asn Asp Asp Alá Leu Leu Lys AGC AAG TTC GAC ACA AAC TCA CAC AAC GAT GAC GCA CTA CTC AAG 160 Asn Tyr Gly Leu Leu Tyr Cys Phe Arg Lys Asp Met Asp Lys Val AAC TAC CGG CTG CTC TAC TGC TTC AGG AAG GAC ATG GAC AAG GTC 180 Glu Thr Phe Leu Arg He Val Gin Cys Arg Ser Val Glu Gly Ser GAG ACA TTC CTG CGG ATC GTG CPG TGC CGC TCT GTG GAG GGC AGÇ 191 Cys Gly Phe TGT GGC TTC TAG CTGCCCGGGTGGCATCCCTGTGACCCCTCCCCAGTGCCTCTC CTGGCC---3' A találmány szerinti eljárással először vált 45 lehetségessé egy magasabbrendű szervezetből, például gerincesből származó specifikus reguláló fehérjét kódoló adott nukleotid-sorrendű nukleinsav izolálása, az ebben lévő genetikai információ átvitele egy mikroorga- 50 nizmusba, ahol az függetlenül replikálódik. A találmány szerinti eljárást felhasználhatjuk az emberi inzulin gén izolálására és tisztítására, továbbá ennek mikroorganizmusba való bevitelére. Ugyancsak elkülö- 55 níthetjük az emberi növekedési hormon génjét és más fehérjét kódoló géneket, bejuttathatjuk őket mikroorganizmusokba, ahol azok replikálódnak. A találmány szerinti eljárás során több új rekombináns plazmidot ismer- qq tétünk, mindegyik saját adott nukleotid-sorrendű nukleinsaván belül egy magasabbrendű szervezetből származó gént tartalmaz. A találmány szerinti eljárás során több új mikroorganizmust ismertetünk, mindegyiket az jellemzi, hogy egy magasabbrendű 65 szervezetből származó adott nukleotid-sorrendű nukleinsavat tartalmaz. A találmány szerinti eljárás gyakorlati felhasználhatóságát azzal szemléltettük, hogy a patkány preinzulin I proteinjét kódoló gé it Escherichia coli törzsbe juttattuk, ugyancsak bejuttattuk egy Escherichia coli törzsbe a pa'kány növekedési hormonjának génjét. Az átvitt gén fő részének szekvenciáját minden esetben meghatároztuk, úgy találtuk, hogy az tartalmazza a patkány proinzulin I teljes aminosav-sorrendjének vagy a patkány növekedési hormon teljes aminosav-sorrendjének kódját; a vizsgálatokat az ismert genetikai kóddal összehasonlítva végeztük, amely minder élőlényben azonos. A találmány szerinti eljárást adott kiviteli példákkal szemléltettük, érthető módon azonban a találmány oltalmi köréhez tartozik bármely olyan eljárás, amely gyakorlatában, alapgondolataiban vagy szellemében a jelen leírásban megadottakkal kapcsolatos. 17
