193803. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vérkompatibilitás vizsgálatára
193803 1 A találmány tárgya eljárás vérkompabilitás vizsgálatára, származásvizsgálat céljára. Ismeretes, hogy a bírósági eljárások során vagy egyéb esetekben az apaság megállapítása jelenleg a kizárásos vércsoport-vizsgálat mellett a terhességi időtartam, a vélelmezett apa nemzőképessége, az antropológiai és öröklésbiológiai vizsgálatok, valamint a tényállás jogászi bizonyítása alapján történik. Mindazonáltal az apaságot ezen tényezők egyike sem bizonyítja, legfeljebb a lehetőségét zárja ki. Ez vonatkozik az apasági vércsoport-vizsgálatára is, amelynek során az anya, a gyermek és a vélt, apa vércsoport tulajdonságait vizsgálják oly módon, hogy mindegyikükre vonatkozóan külön-külön meghatározzák valamennyi lehetséges vércsoportot és azután az egyes csoportok öröklődési szabályai alapján egyenként vizsgálják: lehetséges e, hogy az adott két szülőtől származzék a vizsgált gyermek (dr.M. Bujdosó Györgyi: X vagy apaságvizsgálat, igazságszolgáltatás, Akadémia Kiadó 1986, 81-143., old.). Ez a módszer azonban meglehetősen nehézkes és számos alapvető hátránnyal rendelkezik. A vércsoport-vizsgálat során mintegy 9-12 csoportot tudnak vizsgálni a ma ismert körülbelül 270 vércsoport közül. Nyilvánvaló, hogy az apaság így teljes bizonysággal nem állapítható meg. A bírósági eljárás során tehát csupán a kizárhatóság fennállása bizonyító erejű. A vércsoport-vizsgálat további hátránya, hogy csak mindkét szülő jelenlétében vizsgálható, tehát ha az anya meghalt, az apaság kizárása sem lehetséges. A vizsgálat a hozzá szükséges anyagok és műszerek, továbbá a jelentős munkaigény miatt meglehetősen költséges. Hátránya az eljárásnak az is, hogy elvégzéséhez különleges szakmai felkészültség és speciális laboratórium szükséges és a sokféle tevékenység miatt még viszonylag nagy a hibalehetőség. Ugyancsak az eredmény biztonságát csökkenti, hogy a felhasznált szérumok a tárolás során veszítenek hatékonyságukból. További hátránya ennek a hagyományos eljárásnak az is, hogy a vizsgálatok bonyolultsága és hosszadalmassága miatt (egy héten mindössze 6-8 vizsgálat elvégzése lehetséges egy laboratóriumban) a bíróság és a felek közvetlenül nem ellenőrizhetik a vizsgálatot, így a visszaélés lehetősége elvileg nincs kizárva. A jelen találmánnyal ezért olyan új eljárás kidolgozása a célom, amelynek segítségével az említett hátrányok kiküszöbölhetők és amely lehetővé teszi a származásvizsgálat gyors, egyszerű és a korábbinál megbízhatóbb lefolytatását, sőt adott esetben egyébb célokra is alkalmazható. A kitűzött feledatot olyan eljárással oldottam meg, amelynek során a vizsgálati egyedektől vérmintát veszünk, a minták egy részét összekeverjük és a keverékből vérplazmát állí- 2 2 tünk elő, a vérminták egy részéből vörösvértestet nyerünk és az egyedek egyik részétől nyert plazma keverék, valamint az egyedek másik részétől nyert vörösvértestek reakciójának eredményét vizsgáljuk oly módon, hogy a centrifugálással nyert leülepedett vörösvértesteket tárgylemezre kenjük és szárítjuk, majd adott esetben festjük, végül mikroszkóp segítségével meghatározzuk és/vagy deformált vörösvértestek mennyiségét, illetve arányát. Ehhez egy célszerű foganatosítási mód szerint 1000 vörösvértestet számolunk le és százalékosan meghatározzuk azon összetapadt vörösvértestek számát, amelyek közül az egyik a tapadási irányban megnyúlt. Egy másik foganatosítási mód szerint a vörösvértesteken tapadó vagy a sejthártyát megsértő antitestek kimutatására peroxidáz festést is lehet alkalmazni. Ilyenkor a sérült vörösvértesteken sötétkék foltok láthatók (pozitív peroxidáz reakció). A találmány szerinti eljárás végezhető oly módon, hogy legalább egy szülő és vélt gyermeke, valamint legalább egy kontrollegyed vérét vizsgáljuk. Ezen belül vizsgálhatjuk az anya és gyermeke, valamint egy vélt apa vérét oly módon, hogy az anyától vett vért keverjük a vélt apától, valamint egy, a vélt apával azonos vércsoportú személytől vett vérrel, majd a keverékekből plazmát nyerünk és a plazmákat összehozzuk a gyerektől vett vér vörösvértestével és azok elváltozását regisztráljuk. Vizsgálhatjuk egyetlen szülő és gyermeke vérét is oly módon, hogy legalább két, a gyerekkel azonos vércsoportú személy vérét külön-külön összekeverjük a szülő vérével, majd az előbbiekhez hasonló módon a keverékekből plazmát nyerünk és a plazmákat összehozzuk a gyerektől vett vér vörösvértesteivel és azok elváltozását regisztráljuk. A vérmintákat, illetve keverékeket célszerű fiziológiai sóoldattal keverni, majd hűteni, előnyösen legalább két órán át; 1-10°C hőmérsékleten. A plazmát és a vörösvértestet centrifugálással nyerhetjük. A plazma és a vörösvértest összekeverése előtt célszerű a vörösvértestből és fiziológiás sóoldátból szuszpenziót készíteni. összekeveréskor a plazma, illetve plazma keverék és a vörösvértest szuszpenzió aránya célszerűen 100:1. A plazma-vörösvértest szuszpenzió keveréket ismét mintegy két órán át hűtőszekrényben hűtjük, majd centrifugáljuk. Az eljárás során célszerűen mindig azonos mennyiségű vérmintákat keverünk össze. A találmány szerinti eljárás alapvető előnye, hogy a hagyományos vércsoport-vizsgálatoknál lényegesen egyszerűbb, gyorsabb, olcsóbb és olyan esetekben is információt adhat, amelyekben egyetlen más eljárás sem ad eredményt. A vizsgálat nem igényel speciális szakképzettségű munkaerőt, különleges laboratóriu-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65