193591. lajstromszámú szabadalom • Eljárás dihidropiridazinon-származékok, valamint ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
193591 280 nm-nél történik. Széles csúcsot kapunk, melyből három frakciót gyűjtünk össze. Mindegyik frakció hozzávetőlegesen 0,08 g anyagot tartalmaz. Az első, az oszlopról eluált frakció (—)-izomernek bizonyult, mely kb. 90% enantiomert tartalmazott. A második frakció kb. 50:50 izomerelegyet, a harmadik pedig 80— 85% ( + )-izomert tartalmazott körülbelül. Az enantiomerek tisztaságát analitikai oszlopban határoztuk meg, mely ugyanazzal a királis anyaggal volt megtöltve, mint a preparatív oszlop, de kovalens kötéssel 5 pm-es y-aminopropil-szilanizált szilícium-dioxidot tartalmazott. További kromatográfiai elkülönítése az optikai enantiomereknek, azonos körülmények között a (—)-izomert (0,050 g) több mint 97%-os enantiomer mennyiségben és a ( + )-izomert (0,050 g) kb. 90% enantiomer menynyiségben eredményezte. Az utóbbi anyag további kromatográfiás elkülönítése 0,010 g ( + )-izomert eredményezett, nagyobb mint 93% enantiomer arányban. A szétválasztott oszlop eluátumokat bepároljuk, dietil-éterrel eldörzsöljük, leszűrjük és a maradék szilárd anyagot dietil-éterrel mossuk,majd 80°C-on 18 óra hosszat szárítjuk, így (—)-6-(4-amínofenil)-5-metil - 4,5-dihidro-3(2H)-piridazinont kapunk. Olvadáspont: 203—204°C; [a]25 = —399° [koncentráció 0,74% etanol: :H20:HC1 (tömény) (17:2:1) oldószerelegygyel]. A kapott ( + )-6-(4-aminofenil)-5-metil-4,5-dihidro-3(2H) -piridazinon olvadáspontja: 206—208°C; [a]?,5 = +376°. Az in vitro vizsgálatban a tengerimalacokra kifejtett inotropikus aktivitás vizsgálatánál a (—)-izomer EC50 értéke 1,4 x 10-°M és a (-t-)-izomer EC50 értéke 11,3 x 10-6M. Az altatott macskákkal végzett kísérlet esetében a (—)-izomer sokkal aktívabb volt mint a ( + )-izomer, a pozitív inotropikus és vasodilatációs hatást tekintve. 14. példa ( — ) -6- [4- (N3-metil-N2-cianoguanidino) - -fenil] -5-metil-4,5-dihidro-3(2H) -piridazinon előállítása 0,240 g (—)-6-(4-aminofenil)-5-metil-4,5- -dihidro-3(2H)-piridazinont 0,38 g dimetil-cia-no-ditio-imino-karbonáttal együtt 4 ml vízmentes piridinben visszafolyatás közben 6 óra hosszat keverünk. Ezután a reakcióelegyet bepároljuk, vákuumban, 50°C-on, míg olajos szilárd anyagot kapunk. Körülbelül 20 ml dietil-étert adunk a reakcióelegyhez és keverjük míg szilárd anyagot nyerünk. A szilárd anyagot ezután szűrjük, alaposan mossuk kb. 20 ml dietil-éterrel, így a megfelelő 6- [4- -(N-ciano-S-metil-izotioureido) -Tenií] -5-metil-4,5-dihidro-3(2H)-piridazinont kapjuk. A fenti terméket 3 óra hosszat feleslegben lévő metil-amin-etanol (33%; 20 ml) elegyben melegítjük. A reakcióelegyet 3,0 g 40— 15 60 pm-es szilícium-dioxidon abszorbeáltjuk; közepes nyomású rendszerbe helyezzük, 48 g 15—25 pm-es szilícium-dioxidon 1794 KPa nyomáson és diklór-metán/metanol (20:1) oldószereleggyel eluáljuk 1035 KPa nyomáson Az elkülönített oszlop eluátumokat bepárolva szilárd anyagot kapunk, melyet dietiléterrel eldörzsölünk, leszűrünk, dietil-éterrel alaposan mosunk és 80°C hőmérsékleten 16 óra hosszat szárítunk. így a 0,249 g cím szerinti vegyületet kapunk, olvadáspont: 228°C; [a]p5 = —384° (0,74% dimetil-formamidban). Az NMR spektrum megfelel a szerkezetnek. A 14. példa szerinti reakciókörülmények között, vagyis piridinben, visszafolyatással és az elkülönítést metil-aminban végezve a kiindulóanyag semmi racemizációt nem mutat. Az in vitro vizsgálatban a tengerimalacokra kifejtett inotropikus aktivitás a (—)-izomer esetében a következő: EC50 érték 0,71 x 10_6M. Az altatott patkányokkal végzett kísérletnél a vasodilatációs aktivitás vizsgálatánál azt találtuk, hogy a hátsó láb véráramlásának 50%-os növekedését 2,4 mikromól/kg dózis váltotta ki. Az altatott macskákkal végzett kísérletnél a ( — )-izomer sokkal aktívabb volt mint a megfelelő, 15. példa szerinti (-(-)-izomer, a pozitív inotropikus és vasodilatációs hatást illetően. 15. példa ( + ) -6- [4- (N3-metil-N2-cianoguanidino) - fenil] -5-metil-4,5-dihidro-3(2H) -piridazinon előállítása A 14. példához hasonló módon 0,130 g ( + )-6-(4-aminofenil)-5-metil-4,5 - dihidro - 3(2H)-piridazinon megfelelő .6-(4-(N-ciano- S-metil-izotioureido)-fenil) -5-metil-4,5-dihid•0-3(2H)-piridazinont eredményezett. Ezt metil-aminnal reagáltatva 0,138 g cím szerinti vegyületet kapunk; olvadáspont: 235°C; [«]» =+364° (0,65% dimetil-formamidban). Az in vitro vizsgálatoknál tengerimalacok notropikus aktivitására nézve a (-j-)-izomer EC5q értéke 4,3 x 10~6M. Altatott patkányok esetében a vasodilatációs aktivitást illetően a hátsó láb véráramlásának 50%-os növekedését 8,6 mikromól/kg dózis váltotta ki. 16. példa 6- [4- (N3-metil-N2-cianoguanidino) -íenil] - -5-metil-4,5-dihidro-3(2H) -piridazinon előállítása 61 mg (1,45 mmól) cián-arnid, 418,4 mg (1,0 mmól) S-metil-N-metil-N”[4-(4-metil-6- -oxo- l,4,5,6-tetrahidropiridazin-3-il) - fenil] - izotiouronium-hidrogén-jodid, 9,21 g etanol es 106 mg trietil-amin (1,04 mmól) reakcióelegyet keverjük és a visszafolyatás hőmérsékletén melegítjük, így oldatot kapunk. 17 órás visszafolyatás után szilárd anyag válik ki, ekkor az oldatot lehűtjük és szűrjük, így 0,137 g (48%) cím szerinti vegyületet kapunk, melynek olvadáspontja 264— 265°C. 16 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 9
