193358. lajstromszámú szabadalom • Eljárás kolekalciferol-származékok előállítására

193358

4

(előnyösen lítium-alumínium-hidridet) alkalmazhatunk és inert szerves oldószerben (pl. valamely alkil-éterben, mint pl. dietil-éterben), szobahőmérsékleten és inert atmoszférában (pl. argon) dolgozhatunk.

Ily módon a megfelelő (III) általános képletű védett és/vagy nem-védett vegyületet kapjuk — a képletben R4 jelentése a fent megadott —, az oldallánc 5-helyzetében képezett epimerek keveréke alakjában. A (III) általános képletű vegyületet tisztíthatjuk (pl. szilikagélen végzett kromatogra fái ássál).

A (III) általános képletű vegyületböl a szililtartalmú védőcsoportokat kationcserélő gyanta segítségével hasíthatjuk le és az epimer-keveréket nagyteljesítőképességű folyadékkromatográfiás (HPLC) úton szétválaszthatjuk, tisztítás után (pl. szilikagélen végzett folyadékkromatografálás). Amennyiben az epimerek keveréke a kívánt végtermék, a nagyteljesítőképességü folyadékkromatografálás elhagyható.

A (III) általános képletű nem-védett vegyületet oxidálószerrel kezelhetjük. Oxidálószerként kromátsókat (pl. piridinium-halogén-kromátokat, előnyösen piridiniűm-klór-kromátot) alkalmazhatunk. A reakciót előnyösen szobahőmérsékleten, inert oldószerben végez-I. táblázat

3

betjük el. Reakcióközegként halogénezett alkánokat (pl. klór-alkánokat, előnyösen metilén-kloridot) alkalmazhatunk. A reakció során V helyén hidrogénatomot tartalmazó (IV) 5 altalános képletű ketont kapunk.

Az ily módon kapott ketont izolálás nélkül reagáltathatjuk a trimetil-szilil-védőesoportnak az oldalláncra történő bevitelére képes szerrel (pl. trimetil-szilil-imidazollal), 10 szobahőmérsékleten, inert atmoszférában. Ily módon Y helyén trialkilezett Si csoportot tartalmazó (IV) általános képletű vegyületet kapunk.

Az Y helyén hidrogénatomot vagy trial- 15 kilezett Si csoportot tartalmazó (I) és (IV) általános képletű vegyületek újak és előállításuk szintén találmányunk tárgyát képezi.

A 26,26,26-trifluor-la,25-dihidroxi-kolekalciferol D3-vitaminszerű hatással rendelke- 20 zik és burjánzásgátló, valamint differenciálást előidéző hatást fejt ki. A burjánzásgátló és differenciálást előidéző hatást HL—60 sejteken in vitro ismert módszerekkel igazoljuk (Progress in Cancer Research and Therapy, 25 23. kötet; Maturation Factors and Cancer, Ed. M.A.S. Moore, Raven Press, N.Y. (1982); Nature 270 (1977) 347—349. és Blood 54 (1979) 429—439.). Az eredményeket az 1. táblázatban foglaljuk össze.

Teszt-vegyület

Koncentráció01 / x10-9 mól/

Burjánzó

Differenciálódás

HL-60 sejtek Sejtper ml szám x10 14 7.-os csökkenése

NBT csökkenés formazán "+" sej tek/összes megszámolt sejtek

% "+"- /kontroll közeg/

84,7±4,3-3/368

<t1

Hordozóanyag /0,1 % etanol/

78,9+4,9

0

4/356

1

25R-vegyület

1

59,1 + 1 ,9

30

81/353

23

25R-vegyület

10

27,2+0,3

68

299/318

94

25R~vegyület

100

22,9±1,0

73

360/367

98

25R-vegyület

1000

22,0+0,7

74

340/344

99

25S-vegyület

1

60,2+3,9

29

84/334

25

25S-vegyület

10

27,0±1,4

68

338/354

96

25S-vegyület

100

22,3+2,6

74

323/330

98

25S-vegyület

1000

20,2±0,5

76

353/358

99

“= Az összes kísérleti tenyészetben a hordozó koncentrációja 0,1 térfogat/térfogat %, etanol.

b= A sejtek életképessége az összes tenyészetben 97% feletti érték. Az összes tenyészetet 2X104 HL—60 sejt mennyiséggel iniciáltuk.

Az 1. táblázat adatai igazolják, hogy a

26,26,26-trifluor- la,25-dihidroxi-kalciferol —

különösen a 25R- vagy 25S-forma — in vitro gátolja a humán promielocitikus tumorsejtek burjánzását, ugyanakkor a sejtekre 00 nem-toxikus. Ezenkívül a fenti vegyületek kis koncentrációja (10~9 — 10'8 mól) jelenlétében tenyésztett sejtek az éretebb sejt-típus irányában differenciálódnak, ahogyan azt az enzim-aktivitás és sejtfunkció alakulása iga- 65 zolja. A fenti vegyületek várhatóan a rendellennes sejtburjánzással és/vagy differenciá-3