193283. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 4-dezacetil-indol-dihidroindol alkaloidok bifunkciós észter-származékainak előállítására
13 193283 14 Tömeg-spektrum: 866 (M-f ), 864, 880, 894, 908, 339 (M-vindolin maradék) 139. IR-spektrum vmax (cm'1): 1743 NMR-spektrum (CDCI3): 6 (ppm): 8,03, 7,55, 7,16, 6,60, 6,10, 5,89, 5,46, 5,39, 3,82, 3,72, 3,64, 2,76. 4. példa 4-Szukcinil-VLB-amid előállítása 1 g VLB-4-hemiszukcinátot kb. 25 ml metilén-kloridban oldunk. Az oldathoz 200 mg N-metil-morfolint adunk nitrogén-atmoszférában, miközben a reakcióelegyet jeges fürdőn hűtjük. Hozzáadunk 200 mg izobutil-kiór-formiátot, és a reakcióelegyet szobahőmérsékleten, majd 0°C-on 15 percen át keverjük. A reakcióelegyet ezután szárazra pároljuk, sárgásbarna gumiszerü anyagot kapunk. A szilárd anyagot metanolos ammóniában oldjuk és nitrogénatmoszférában kb. 48 órán át szobahőmérsékleten tartjuk. Az illékony komponensek elpárologtatása után maradékként a VLB-4-hemiszukcinát amidját kapjuk (a 4- -szukcináton), amelyet az egyszerűség kedvéért 4-szukcinil-VLB-amidnak nevezünk. Az amid fizikai állandói az alábbiak: [R-spektrum Vmax (Cm*'1 ) ! 1738, 1685 Tömegspektrum: 867 (M + ), 355, 154 NMR-spektrum (CDCI3) ô (ppm): 9,86, 8,04, 7,53, 7,12, 6,63, 6,10, 5,85, 5,48, 5,32, 3,81, 3,80, 3,73, 3,62, 2,72, 0,90, 0,82. R; (szilikagél, 1:1 arányú etil-acetát-metanol) = 0,38 szulfát-só: Rf (szilikagél, 1:1 arányú etil-acetát-metanol) = 0,33. A megfelelő hidrazidot, vagyis a 4-szukcinil-VLB-hidrazidot a fentiekhez hasonló módon állítjuk elő, metanolos hidraziddal, és lényegesen rövidebb reakcióidőt alkalmazva. A vegyület fizikai állandói az alábbiak: R/ (szilikagél, 1:1 arányú etil-acetát-metanol) = 0,23. IR-spektrum vmax (cm-1): 3400, 3450, 1739, 1680 NMR-spektrum (CDC13) 6 (ppm): 9,88, 8,03, 7,53, 7,12, 6,55, 6,10, 5,85, 5,46, 5,27, 3,79, 3,60, 2,30, 0,88, 0,81. 5. példa Metil-VLB-4-adipát előállítása 1,4 g 4-dezacetil-VI.B-t 50 ml metilén-kloridban oldunk. Hozzáadunk 3 g adipinsavat, majd 3 g diciklohexil-karbodiimidet. A reakcióelegyet vízmentes atmoszférában szobahőmérsékleten tartjuk kb. 24 órán keresztül, majd leszűrjük, és a szűrőt metilén-kloriddal mossuk. A metilén-klorid elpárologtatása után kapott maradékot szilikagélen kromatografálva tisztítjuk, eluensként 1:1 arányú etil-acetát-metanol elegyet használunk. A kromatográfiás eljárással kapott fő komponens a metil-VLB-4-adipát, amely nyilvánvalóan az átalakulatlan diciklohexil-karbodiimid és metanol jelen8 létében a kromatografálás során keletkezik a hozam 220 mg. NMR-spektrum: 3,63 (CH30- új metil-észter) ; Tömegspektrum csúcsok: 910 (M+), 924 (M+14), 879, 852, 355, 154. A találmány szerinti eljárással előállítható az (I) általános képletü 4-(3-metoxi-karbonil) -propionil-vinkrisztinsav is. Azok a találmány szerinti eljárással előállított (I) általános képletü vegyületek, amelyek képletében Z jelentése hidroxil-, amino-, hidrazino-, vagy 1-3 szénatomos alkoxicsoport, egérben transzplantált tomorok elleni szerként használhatók. Azok a vegyületek, amelyek képletében Z jelentése szukcinimid-oxi-csoport, ellenanyag-konjugátumok előállítására használhatók. A Z helyén hidroxil-, amino-, hidrazino-, vagy 13 szénatomos alkoxicsoportot tartalmazó (1) általános képletü vegyületek mitózist gátló hatását és metafázist megszakító képességét standard módszerek szerint határozzuk meg. A vizsgálatok eredményét az I. táblázatban közöljük. Az 1. táblázat 1. oszlopában a vegyületek nevét, a 2. oszlopban a vegyületek azon koncentrációját tüntettük fel pg/ml-ben kifejezve, amely koncentrációban az adott vegyület megszakítja a metafázist. I, táblázat Vegyület neve Metafázls leállítását kiváltó koncentráció ( ug/ml) 4-szukcinoil--VLB-amid 0,2 Metil-VLB-4--hemiszukcinát--szulfát 0,02 Metil-vindezin-4-hemiszukcinát-szulfát 0,2 VLB-4-hemiglut arát-szulfát 0,2 Yindezin-4--hemiszukcinát-szulfát 0,2 A fenti vegyületek némelyike egérbe transzplantált tumorok ellen is hatásosnak bizonyult. A fenti vizsgálatok eredményeit a II. táblázatban foglaljuk össze, a táblázat 1. oszlopában a vegyület nevét, a 2. oszlopban a tumor nevét, a 3. oszlopban a dózisszintet mg/kg-ban és a 4. oszlopban a tumor növekedésének %-os gátlását tüntettük fel. A PI534J egy leukémia-tumort, a 6C3HED pedig egy limfoszarkómát jelent. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
