193213. lajstromszámú szabadalom • Eljárás AAD 216 antibiotikum-komplex és fő komponensei előállítására kibdelosporangium aridum-mal történő fermentálássla

5

193213

6

Az AÀD 216 komplex, és komponensei, az AAD 216A, AAD 216B és AAD 216C újdonságát a vankomicin-risztocetin antibiotikum-osztály ismert tagjaival végzett összehasonlítás alapján határoztuk meg. Közelebbről, a Eh subtilissel biológiailag előhívott vékonyréteg-kromatográfiás Rf értékeket határoztuk meg, ismert antibiotikumokkal összehasonlítva. Az eredményeket az I. táblázatban adjuk meg.

I. táblázat: AAD 216A, AAD 216B és AAD 216C vékonyréteg-kromatográfiás Rf értéke különböző futtatóelegyek esetén, ismert antibiotikumokkal összehasonlítva

Antibiotikum

A

érték*

B

c

A-35512B

0,14

0,25

0

0,15

A-477

0,51

0,30

0,40

0

0,20

0,67

0,78

Aktap1anín

0,16

0,06

0,11

Aktínoídin A ésB

0,04

0,24

0.18 0,43

0,05

Avoparcin.

0,15

0,13

0,07

LL-AM-374

0,08

0,17

0,05

Risztocetin

0,1

0

0,10

0,04

Teíchomicin

0,34

0,12

0.33

0,47

0,77

Vankomicin

0,17

0

0.35

0,1

0,6

AAD 216A

0,35

0,33

0,83

AAD 21 6B

0,38

0,35

0,83

AAD 216C

0,44

0,34

0,82

Avicel rétegen, előhívás: B. subtilis elleni hatás alapján, a fő komponens R/ értéke aláhúzva

A:n-butanol—ecetsav—víz (4:1:5) C:n-propanol—víz (6:4)

B:n-propanol- -petroléter—cc. ammónium-hidroxid (4:1:2)

Az AAD 216A, AAD 216B és AAD 216C fordított fázisú nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással meghatározott retenciós idejét is összehasonlítottuk az ismert antibiotikumokéval. Mint a II. táblázat eredményeiből látható, a retenciós idők is különböznek az ismert antibiotikumok retenciós idejétől.

35

40

II.

Táblázat

folytatása

1

2

3

Risztocetin

3,6

5,4

Teichomicin A-2

13,6

13,8*

Vankomicin

6,0

7,4

45

többkomponensű elegy fő komponense

(cl) nagynyomású folyadékkromatográfiás rendszer: oszlop: Ultrasphere ODS, 5 mikron, 4,6X150 mm

II. táblázat

Antibiotikum

Retenciós

A rendló.)

szer

idő (perc)

B rendeb)

szer

1

2

3

AAD 216A

15,3

14,5

AAD 216B

15,9

15,2

AAD 216C

17,2

16,1

A-35512B

5,2*

6,1*

A-477

11,7*

8,9*

Aktaplanin

6,3*

7,5*

Aktinoidin A és

B 5,5*

8,1*

Avoparcin

5,8*

7,6*

LL-AM-374

5,1*

6,8*

oldószer: 7—35% acetonitril (7% az 1. perc- 50 ben, majd 13 perc alatt 34%-ra növeljük, és utána 34%-on tartjuk) 0,1 mól/l-es foszfát-pufferben (pH 3,2)

átfolyási sebesség: 1,5 ml/perc 55 detektálás: UV-abszorpció 220 nm-en

(b) nagynyomású folyadékkromatográfiás rendszer:

oszlop: Ultrasphere ODS, 5 mikron, 4,6 x x 150 mm

50 oldószer: 5-35% acetonitril (1. percben 5%, majd 13 perc alatt 35%ra növeljük, és utána 35%-on tartjuk) 0,025 mól/l-es foszfát-pufferben (pH 6,0)

65 átfolyási sebesség: 1,5 ml/perc

detektálás: UV-abszorpció 220 nm-en.

4