193157. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 4"-epi-eritromicin a és származékainak előállítására
193157 In vitro alkalmazás esetén, például helyi felhasználásnál a kiválasztott terméket gyakran gyógyszerészetileg alkalmazható hordozóanyaggal (például növényi vagy ásványi olaj, lágyító krém) keverjük el, de oldhatjuk vagy diszpergálhatjuk folyékony hordozóanyagokban, például vízben, alkoholban, glikolban vagy ezek keverékében, de használhatunk gyógyszerészetileg alkalmazható más, a hatóanyagra inert hordozóanyagot is. Ezekben a keverékekben a hatóanyag mennyisége 0,01 — 10%, a készítmény teljes súlyára számítva. A találmány szerinti vegyületek közül sok, in vivo is hatásos Gram-pozitív és bizonyos Gram-negatív (például Pasteurella multicida és Neisseria sicca) mikroorganizmusokkal szemben, orális és/vagy parenterális alkalmazás esetén állatoknál és embereknél is. Érzékeny organizmusok vonatkozásában in vivo hatásosságuk korlátozottabb. Ennek meghatározására az ismert módszert alkalmazzuk, amikor is azonos súlyú egereket a vizsgálandó organizmussal, majd azt követően orálisan vagy szubkutána vizsgálandó vegyülettel kezelünk. A gyakorlatban a következőképpen járunk el: az egereket (például 10-et) a megfelelően hígított tenyészettel — ez az LDioo (az organizmus legalacsonyabb koncentrációja, amely 100%os kimúlást okoz) érték 1 — 10-szerese — intraperitoneáiisan beoltjuk. Ezzel egyidőben kontroll vizsgálatot is végzünk — az egereket alacsonyabb hígítású oltóanyaggal kezelve — a vizsgálandó organizmusok fertőzőképességének lehetséges változatainak ellenőrzésére. A vizsgálandó vegyületet 0,5 órával az oltóanyag beadása után adagoljuk, majd 4, 24 és 48 óra múlva megismételjük. Négy nappal az utolsó kezelés után jegyezzük fel az életben maradt egerek számát. A találmány szerinti vegyületeket in vivo alkalmazás esetén orálisan vagy parenterálisan, például szubkután vagy intramuszkuláris injekció formájában használjuk, naponta 25—200 mg, előnyösen 150—200 mg testsúlykilogrammonkénti mennyiségben. A parenterális injekciók alkalmas hordozóanyagai lehetnek vagy vizes oldatok, mint például víz, izotóniás sóoldat, izotóniás dextrózoldat, Ringer-oldat, vagy nem vizes hordozóanyagok, mint növényi eredetű zsíros olajok (gyapotmag-, földimogyoró-, gabona-, szezám-olaj), dimetil-szulfoxid és más olyan anyagok, amelyek a készítmények gvógyhatását nem gátolják, és az alkalmazott mennyiségben nem mérgezőek (glicerin, propilénglikol, szorbit). Továbbá előnyösen készíthetők olyan kompozíciók, amelyeket közvetlenül a felhasználás előtt a készítmény oldásával lehet alkalmazni. Ezek a kompozíciók a kívánt tulajdonságok elérése érdekében tartalmazhatnak folyékony hígítószereket (például propilén-glikol, dietilkarbonát, glicerin, szor-5 4 bit, stb.), puffereket, helyi érzéstelenítőket és szervetlen sókat. A vegyületeket kombinálhatjuk különböző olyan gyógyszerészetileg alkalmazható inert hordozóanyagokkal (szilárd hígítóanyagok, vizes hordozók, nem mérgező szerves oldószerek), amelyek segítségével kapszulák, tabletták, pirulák, száraz keverékek, szuszpenziók, oldatok, elixírek és parenterális oldatok és szuszpenziók állíthatók elő. Általában, a vegyületeket különböző készítmények formájában alkalmaztuk, menynyiségük 0,5-90% a készítmény összsúlyára számítva. A következőkben leírt példáink kizárólag illusztrálják és nem korlátozzák a találmány szerinti eljárást. Ezeken kívül számosiovábbi variációs lehetőség van a foganatosításra, amelyek nem térnek el a találmány lényegétől. 1. példa 4”-Epi-eritromicin A-l 1,12-karbonát-észter 109 g Raney-nikkel iszap és 100 g 4”-dezoxi-4”-oxo-eritromicin A-l 1,12-karbonát-észter (4 150 220 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás) keverékét 1 liter etanolban 344 kPa nyomású hidrogén atmoszférában éjjelen át szobahőmérsékleten rázzuk, majd a szilárd részt szuper-cel-en leszűrjük, és a szűrletet vákuumban 550-600 mire besűrítjük. A tömény szűrletet gőzfürdőn 600 ml meleg vízzel kezeljük, majd az oldatot 1,5 órán át szobahőmérsékleten keverjük, a kikristályosított terméket szűrjük és szárítószekrényben 50°C-on éjjelen át szárítjuk. Kitermelés: 59,8 g. A terméket etanolvíz elegyből átkristályosítással tisztítjuk, kitermelés: 49,1 g, o. p.: 141 — 143°C, NMR- spektrum (CDC1S) : 3,69 (2H, q), 3,29 (3H, s), 2,27 (6H, s) és 1,58 (3H, s) ppm. 2. példa 4"-Epi-eritromicin A-l 1,12-karbonát-észter A. 4”-epi-eritromicin A 100 g Raney-nikkel iszapot 100 g 4”-dezoxi- 4”-oxo-eritromicin A-t (4 150 220 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás) tartalmazó 1 liter etanolban hidrogén atmoszférában 344 kPa nyomáson, szobahőmérsékleten éjjelen át rázunk. A kimerült katalizátort szuper-celen leszűrjük, a szűrletet vákuumban 300 ml-re betöményítjük. A tömény szűrlethez 700 ml vizet adunk, és a tej szerű oldatot gőzfürdőn melegítjük. Az oldathoz kevés etanolt adunk, hogy a kiváló csapadék elgyantásodását megakadályozzuk, majd a keveréket 2 órán át szobahőmérsékleten keverjük, a terméket szűrjük, szárítjuk, (57,6 g), a szűrletet vákuumban a kiválás kezdetéig (haze point) töményítjük, majd a keveréket 1 órán át keverjük, szűrjük, szárítjuk (21,4 g). A kapott két anyagot egyesítjük, o. p.: 141 — 144°C. NMR-spektrum (CDC13): 3,3 (3H, s), 2,3 (6H, s) és 1,4 (3H, s) ppm. Hasonló módon, ha 200 mg 4”-dezoxi-4”oxo-eritromicin A és 600 mg 10%-os, faszén-6 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
