193151. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gangliozid-származékok és ilyen hatóanyagokat tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
193151 nátrium-karbonát-oldattal kezeljük 1 órán át 60°C-on, elhasadnak az észterkötések, és visszakaphatjuk az eredeti gangliozid vegyületeket. A gangliozid keverék belső észtereinek infravörös spektruma, kálium-bromid pasztillán végezve, jellemző észter abszorpciót mutat 1750 cm-1 értéknél. 5. példa 8 g GMrt (nátriumsó) 80 ml desztillált vízben oldunk, és az oldatot átvezetjük 10 g Dowex 50 w x 8 ioncserélő gyantával töltött oszlopon, ahol a gyanta piridinium-alakban van, és 100—200 mesh méretű szemcsékből áll. A nagy vákuumban víztelenített anyagot 800 ml vízmentes tetrahidrofurán és 2,1 g (30 mM) etoxi-acetilén elegyében oldjuk. Az elegyet 3 órán át forraljuk visszafolyató hűtő alatt, ahol a víztelenítő szeleppel ellátott hűtőt —10°C-on tartjuk. Az oldószer és az etoxi-acetilén feleslegének eltávolítása után a maradékot kloroform és metanol 1:1 arányú elegyének 80 ml menynviségében oldjuk, és a terméket 400 ml aceton hozzáadásával kicsapjuk. Ilyen módon 7,2 g (91,0%) belső észtert kapunk. Vékonyrétegkromatográíia: a vizsgálatot szilikagél réteggel ellátott lemezeken végezzük. A futtató oldószerelegy kloroform, metanol és 0,3%-cs katcium-klorid 55:45:10 arányú elegye. A végtermék Rf értéke nagyobb (0,70), mint a kiindulási vegyület Rt értéke (0,65). A kromatográfiás eredmények teliát azt mutatják, hogy kiindulási anyag nincs jelen. Ha a terméket 0,1 n nátrium-karbonát-oldattal kezeljük 1 órán át 60GC-on, az észterkötés felhasad, és visszakaphatjuk az eredeti gangüozidot. A GM, belső észterének infravörös spektruma, kálium-bromid pasztillán végezve, azt mutatja, hogy 1750 cm-1 értéknél jellemző észter abszorpció jelenik meg. ti. példa 9 g gangliozid keveréket (nátriumsó) 80 ml desztillált vízben oldunk, és az oldatot 20 g Dowe.x 50 w x 8 ioncserélő gyantával töltött oszlopon vezetjük át, ahol a gyanta piridinium-alakban van jelen, s 100—200 mesh méretű szemcsékből áll. A nagy vákuumban víztelenített anyagot 200 ml vízmentes piridinben oldjuk, és az oldalút hozzáadjuk 5,52 g (10 mM) ikerionos Wood ward-reagens [N-etil-5-fenil-izoxazolíum-3’-szulfonát. Woodward és munkatársai, .1. Am. Chem. Soc., 83, 1010—1012 (1961)] 200 ml vízmentes piridinnel készült szuszpenziójához. A reakcióelegyet 10 napig keverjük szobahőmérsékleten. A reagens feleslegét szűrjük, az oldószert teljes mértékben eltávolítjuk, a maradékot kloroform és metanol 1:1 arányú, 90 ml meny-9 6 nyiségű elegyében oldjuk, és a terméket 450 ml aceton hozzáadásával kicsapjuk. Ilyen módon 7,2 g (81,8%) belső észtert kapunk. Vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat: szilikagél réteggel ellátott lemezeken végezzük, a futtató oldószerelegy kloroform, metanol és 0,3%-os kalcium-klorid 55:45:10 arányú elegye. A belső észterek keverékének Rf értéke 0,7—0,85 között van. A végtermékek Rf értéke meghaladja a kiindulási vegyületek keverékének Rf értékét. A kromatográfiás vizsgálat eredményei tehát azt mutatják, hogy kiindulási anyag nincs jelen. Ha a terméket 0,1 n nátrium-karbonát-oldattal kezeljük 1 órán át 60°C-on, az észterkötések felhasadnak, és visszakaphatjuk az eredeti gangliozid vegyületeket. A gangliozid keverék belső észtereinek infravörös spektruma, kálium-bromid pasztillán mérve, jellemző észter abszorpciót mutat 1750 cm-1 értéknél. 7. példa 8 g GMrt (nátriumsó) 80 ml desztillált vízben oldunk, és az oldatot 10 g Dowex 50 w x 8 ioncserélő gyantával töltött oszlopon vezetjük át, ahol a gyanta piridinium-alakban van jelen, s 100—200 mesh méretű szemcsékből áll. A nagy vákuumban víztelenített anyagot 200 ml vízmentes piridinben oldjuk, és az oldatot hozzáadjuk 1,26 g (5 mM) ikerionos Woodward-reagens [N-etil-5-fenil-izoxazo!ium-3’-szulfonát] 200 ml vízmentes piridinnel készített szuszpenziójához. A reakcióelegyet 10 napig keverjük szobahőmérsékleten. A reagens feleslegét szűrjük, az oldószert teljes mennyiségében eltávolítjuk, a maradékot kloroform és metanol 1:1 arányú, 80 ml mennyiségű elegyében oldjuk, és a terméket 400 ml aceton hozzáadásával kicsapjuk. Ilyen módon 6,3 g (79,5%) terméket kapunk. Vékonyrétegkromatográíia: a vizsgálatot szilikagél réteggel ellátott lemezeken végezzük, a futtató oldószerelegy kloroform, metanol és 0,3%-os kalcium-klorid 55:45:10 arányú elegye. A végtermék Rf értéke (0,70) meghaladja a kiindulási vegyület Rt értékét (0,65). A kromatográfiás vizsgálat eredményei tehát azt mutatják, hogy kiindulási anyag nincs jelen. Ha a terméket 0,1 n nátrium-karbonát-oldattal kezeljük 1 órán át: 60°C-on, az észterkötés elhasad, és visszakaphatjuk az eredeti gangliozidot. A GM] belső észterének infravörös spektruma, kálium-bromid pasztillán mérve, jellemző észter-abszorpciót mutat 1750 cm-1 értéknél. Jóllehet a gangliozidok egyes belső észterszármazékait és az előállításukra szolgáló eljárást leírták már a szakirodalomban, nem foglalkoztak korábban a belső észter-származékok biológiai aktivitásával, sem pedig a lehetséges gyógyászati felhasználásaival. 1° 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
