192983. lajstromszámú szabadalom • Eljárás cefem-vegyületek előállítására
17 192983 18 Példaszám R1 R3 (képletszám) Kitermelés (%) ‘H-NMR (CFsCChD): á (ppm) 27. OCHa (11) 65 2,2-2,9 (m, 2 ciklopentén-H), 2,9-3,8 (m, 6H, SCH2 és 4 ciklopentén-H), 3,70 (s, 311, OCHa), 410 (s, CHjCO), 5,25- -6,20 (m, 4H, CH2-piridin és 2 laktáin-II), 6,7-7,45 (m, 3 tiofén-H), 7,65- -8,7 (m, 3H, piridin) A végtermék előállítása A példa 7-amino 3-f (2,3-ciklopenlano-l-piridi- 15 nio)-metill-cef-3-em-4-karboxilát a) kémiai hasítás 5,6 g (10,5 mmól) 3-f(2,3-ciklopenteno-l- 20 -piridinio)-metil]-7-(2-tienil-acetamido)-cef-3- -em-4-karboxilát-hidrotiocianát só (1. példa) 40 ml száraz metilénkloridban Felvett szuszpenziójához kevertetés közben 5,6 ml (44 mmól) N,N-dimetil-anilint és 2,8 ml 25 (22 mmól) trimetil-jód-szilánt adunk. A hőmérsékletet 27 °C-ra emeljük, miközben tiszta oldat keletkezik. Ezt 1 órán keresztül szobahőmérsékleten kevertetjük, majd -40 °C-ra hűtjük és egyszerre 4,6 g 30 (22,2 mmól) PCls-t adunk hozzá, miközben a hőmérséklet -25 °C-ra emelkedik. A sötétbarna oldatot 1 órán keresztül -30 °C-on kevertetjük, majd 9 ml izobutanol 18 ml metilénkloridban felvett és -40 °C-ra hűtött oldatát 35 öntjük hozzá. Csapadék keletkezik, melyet egy éjszakán keresztül hűtőszekrényben állni hagyunk. Ezután szűrjük, és metilénkloriddal mossuk. A nedves nyersterméket rögtön 15 ml -5 °C-os metanolban oldjuk és 40 80 ml metilénklorid/éter 1 : 1 elegyet csepegtetünk hozzá. A képződött csapadékot 2 órán keresztül -10 °C-on kevertetjük, majd szűrjük, acetonnal mossuk és PzOs felett vákuumban szárítjuk. így 3,3 g (az elméleti 45 78%-a) világosbarna kristályt kapunk. Elemanalízis á Ci«HnN303Sx2HCl összegképletre: számolt: C 47,41 H 4,97 Cl 17,49 N 10,37% talált: C 46,2 H 5,6 Cl 16,6 N 9,8% 50 IR (KBr): 1785 (laktám-CO) cm'3 ‘H-NMR (CF3CO2D): £ = 2,55-2,95 (m, 2H, ciklopentén-H) 3,15- -3,95 (m, 6H, 4 ciklopentén-H és SCH2), 55 5,53 (s, 2H, laktám-H), 5,55 és 6,03 (AB, J : 15 Hz, 2H, CH2-piridin), 7,65-8,70 (m, 311, piridin) ppm b) enzimatikus hasítás 106 g (0,2 mól) 3-í (2,3-ciklopenteno-l-piridinio)-metill-7-(2-tienil-aeetamido)-cef-3- -em-4-karboxilát-lűdroüocianát sót (1. példa) 600 ml vízben sz.uszpendálunk, hozzáadjuk 150 ml Amberlite LA-2 (Rohm and Haas) 800 ml etilacetátban felvett oldatát és a reakcióelegyet 30 percen keresztül jeges fürdőn kevertetjük. A fázisokat szétválasztjuk és a vizes oldatot kétszer 50 ml LA-2 (acetátforma) 150 ml metilizobutilketonban felvett oldatával extraháljuk, majd 4x100 ml metilénkloridal mossuk. A vizes fázist 500 ml térfogatra egészítjük ki és NaHCC>3-tal (0,2 g) pH = 7-re állítjuk. Hozzáadunk 100 g fixált penicillin G-amidohídroláz enzimet és 37 °C-on és pH c 7,1 mellett kevertetjük. A pH-értéket 1 N NaOH hozzácsepegtetésével stabilizáljuk. 2 óra alatt 90%-os átalakulás érhető el (VRK-rendszer: aceton/víz 5:1, Kiesel-gél lemezek). A fixált emzimet leszűrjük, 3x100 ml vízzé mossuk, a vizes fázist 2 N HCl-lel pH = 6-ra állítjuk és fagyasztva szárítjuk. Az amorf liofilizátumot 250 xnl metanollal elkeverjük, a kevés oldhatatlan anyagot kiszűrjük, és a szűrlethez 300 ml 15%-os alkoholos sósavat, majd 1 liter étert adunk. Az elegyet 2 órán keresztül 0 °C-on tartjuk, majd a csapadékot leszűrjük, éter/metanol 4 : 1 elegyével mossuk és vákuumban szárítjuk. Így 61 g (az elméleti 75%-a) színtelen terméket kapunk, amely minden tulajdonságában megegyezik az a) pont alatti termékkel. Az A. példával analóg módon állíthatók elő a megfelelő 2-tienil-acetamid-cefalosporin-Bzármazékból az alábbi (I) általános vegyületek. Példaszám A (képletszám) 12 4. tábláz at Módszer Kitermelés <%) a (b) 72 (69) ‘H-NMR (CFaCOíD): £ (ppm) 1.7- 2,4 (m, 4H, ciklohexén-H), 2.7- 3,95 (m, 6H, 4 ciklohexén-H és SCH2), 5,35-6,25 (m, 4H, OH2- -piridin és 2 laktám-H), 7,75- -8,65 (m, 3H, piridin) 10
