192960. lajstromszámú szabadalom • Eljárás lankacidin-termelés fokozására
9 192960 10 3. táblázat Táptalajhoz adott ciklodextrinek koncentrációja (rnmól/1) Lankacidin C (mmól/1) Lankacidin A (mmól/1) cc-ciklodextrin 5 3.21 0.40 •j-ciklodextrin 5 cc-ciklodextrin 3 0-ciklodextrin 3 3.02 0.38 •j-ciklodextrin 3 ciklodextrin 0.40 0.05 nélkül 4. példa 25 ml, 2,8 vegyesX oldékony keményítőt, 3,0 vegyesX nyerB földimogyoróliBztet, 0,5 vegyesX melaszt, 0,5 vegyesX Polipeptont, 0,3 vegyesX kalcium-karbonátot, 0,25 vegyesX nátrium-kloridot, 0,003 vegyesX cink-szulfátot, 0,0007 vegyesX réz-szulfátot, 0,0007 vegyesX mangán-szulfátot és 0,2 vegyesX szójaolajat tartalmazó táptalajt 200 ml-ea lombikba mérünk és sterilezzük. A táptalajt egy kacs ferde agaron fenntartott Streptomyces griseofuscus (IFO 12 870) tenyészettel beoltjuk, ób 200 fordulat/perc sebességű rázógépen 28 °C-on 30 órán keresztül rázatjuk. A kapott tenyészetet a továbbiakban inokulumként használjuk. 25 ml fenti összetételű táptalajt a 4. táblázatban ismertetett koncentrációban és összetételben különböző ciklodextrinekkel egészítjük ki. Az elegyeket 200 ml-es lombikba mérjük és sterilezzük. A fentebb kapott inokulumból 1 ml-t mérünk minden egyes ciklodextrin-tartalmú elegybe, és a táptalajokat 200 fordulat/perc sebességű rotációs rázógépen 24 °C-on 96 órán keresztül rázatjuk. A táptalajban felhalmozódott lankacidinek mennyiségét az 1. példa (1) lépésében leírtak szerint határozzuk meg. Az eredményeket a 4. táblázatban adjuk meg. 4. táblázat Táptalaj-Lankacidin C Lankacidin A hoz adott ciklodext(mmól/1) (mmól/1) rin koncentrációja (mmól/1) 0-ciklodextrin 10 1.55 0.21 ic-ciklodextrin 10 0.31 0.04 •j-ciklodextrin 10 1.10 0.12 0-ciklodextrin 5 1.50 0.19 cc-ciklodextrin 5 ^-ciklodextrin 5 1.53 0.20 ■j-ciklodextrin 5 tc-ciklodextrin 5 1.12 0.13 S-ciklodextrin 5 ir-ciklodextrin 3 ó-ciklodextrin 3 1.11 0.13 •jj-ciklodextrin 3 ciklodextrin 0.15 0.02 nélkül 5. példa 500 ml, 3 vegyes% glükózt, 3,5 vegyes% kukoricalekvárt, 0,02 vegyes% magnézium-szulfátot, 0,1 vegyes% dikólium-hidrogén-foszfátot, 0,05 vegyes% szójaolajat, és 1,5 vegyesX kalcium-karbonátot tartalmazó táptalaj pH-jót 20 vegyesX-os vizes nátrium-hidroxid-oldattal 7,0-re állítjuk. A táptalajt 2 1- -es Sakaguchi-lombikba helyezzük, vattadugóval lezárjuk és sterilezzük. A táptalajt ezután ferde agaron tenyésztett Streptomyces rochei subsp volubilis (IFO-12 507) tenyészettel beoltjuk és lengő rázógépen 28 °C-on 24 órán keresztül rázatjuk. 30 1 fenti összetételű táptalajt 50 1-es fermentorba mérünk és Bterilezzük. A fenti tenyészet 500 ml-ével beoltjuk a fermentorban levő táptalajt és a tenyésztést 24 °C-on levegőztetés (1 levegőtérfogat/perc/táptalaj-térfogat) és keverés (150 fordulat/perc) mellett 24 órán keresztül folytatjuk. Az ily módon kapott tenyészetet inokulumként használjuk. 200 1-es fermentorba 100 1 10 vegyes% glicerint, 2 vegyesX Proflo-t, 0,5 vegyes% kukoricalekvárt, 1 vegyesX Polipeptont, 0,1 vegyes% vas-szulfátot, 0,1 vegyesX szójaolajat és 1 vegyesX 0-ciklodextrint tartalmazó táptalajt mérünk és sterilezzük. A fenti táptalajt beoltjuk 5 1 fentebb ismertetett módon kapott inokulummal, és 24 “C-on levegőztetés 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 C
