192918. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tumorellenes hatású N-6-[(2-amino-2-karbamoil-etil)-amino-metil]-piridin-2-karbonil-3-terc-butoxi-hisztidin-terc-butil-észter előállítására
7 192918 8 (1H kiszélesedett s), 5,67 (211, s), 7,16-8,96 (9H, m) infravörös spektrum (CHCh): 3510, 3470, 2990, 1725, 1680, 1585, 1510, 1435, 1335 cm'1. 101,1 mg (0,180 mmól) N,N’-diNpsACAPyC 4 ml metanollal készített oldatához 0 °C hőmérsékleten cseppenként 3 ml 0,1 n vizes lítium-hidroxid-oldatot adagolunk, és az elegye! szobahőmérsékleten 5 óra hosszat keverjük. Ekkor az elegyhez vizet öntünk és a metilalkoholt desztillációval eltávolitjuk. A visszamaradt anyagot 5 ml etil-acetáttal mossuk és a vizes fázist citromsavval megBavanyítva etil-acetáttal extraháljuk. A szerves fázist vízzel mossuk a citromsav nyomainak eltávolítása végett. Az így megtisztított szerves fázist azután vízmentes nátrium-szulfáttal víztelenítjük és bepároljuk, aminek eredményeképpen 84,2 mg tömegű sárga por formájában kapjuk meg a kívánt, tiszta N, N’-diNpsACAPyC-t. c) y helyében Nps-t tartalmazó (II) általános képletü vegyület előállítása A fentebb ismerteit a) lépésben kapott egész BHBE-mennyiséget, valamint 24,7 mg a fenti b) lépésben előállított N,N’-diNpsACAPyC-t argon védógázatmoszférában 3 ml acetonitrilben szuszpendálunk és 22 mikroliter trietil-amint majd 21 mikroliter DPPA-t adunk az acetonitriles szuszpenzióhoz és a reakcióelegyet szobahőmérsékleten egy éjszakára félretesszük. Ezután elvégezzük a reakcióelegy vékonyrétegkromatográfiás tisztítását. A futtató rendszer összetétele: etil-acetát(etonol)víz = 3 : 1 : 1. Az összegyűjtött (II) általános képletű - ahol a képletben Y jelentése Npa-csoport - termék mennyisége 23,3 mg (0,0287 mmól); külleme sárga olaj. Az előállított vegyület azonosítására szolgáló fizikai paraméterek: (oc)d23 = +39,2 (c = 0,8; CHCh) tömegspektrum: m/z = 812 (M*), 658 (M*Npys), 602 (M*-Npys-Bu‘) •HNMR (CDCb; TMS): 1,23 (9H, s), 1,48 (9H, s) 3,44-3,78 (2H, kiszélesedett, b) 3,80-3,96 (1H, m), 4,64-4,84 (1H, m), 4,75 (2H, s), 4,96-5,16 (1H, m), 5,28 (2H, s), 6,60 (1H kiszélesedett, s), 7,00 (1H, s), 7,20-8,90 (10H, m) infravörös spektrum (CHCh): 3450, 2970, 1730, 1675, 1585, 1335, 1155 cm’1. d) A PYML 4 szintézise A fenti c) lépésben kapott termék 2,1 mg-os (0,00259 mmól) mennyiségét 0,2 ml metanolban feloldjuk. Az oldathoz 5 mg 3-metil-indolt (fölös mennyiség) adunk és 0,4 ml O, 2 n hidrogén-bromid-oldat hozzácsepegtetünk. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten éjszakán át keverjük. A reakcióelegyet ezután 2 ml víz és 2 ml etil-acetát között megoszlatjuk; a vizes fázist két további alkalommal 1-1 ml etil-acetáttal mossuk. A vizes fázist 0,5 ml térfogatú Diaior® WA30 típusú ioncserélő gyantán (hidroxil alak) bocsájtjuk át és semlegesítjük. A gyantáról lefolyó oldatot szárazra pároljuk; ily módon 3,7 mg halványsárga port nyerünk. E porra 1 ml etil-acetátot öntünk a sárga komponens extrahálása céljából. Szárítás után 2,8 mg fehér port kapunk. Ezt a fehér port 1 ml vízben feloldjuk, és az oldatot 0,5 ml Diaior® SA 10A típusú, hidroxil alakban lévő gyantán átengedjük. A gyantát újabb 3 ml vízzel étöblítjük. Azokat az oldatrészleteket, amelyek 250 nm hullámhosszúságú ultraibolya fényben mind a ninhidrin-próbára, mind a Pauly-reakcióra pozitívak, összegyűjtjük és szárazra pároljuk. 0,8 mg (0,00159 mmól) fehér port kapunk. Hozam: 61,3%. Az előállított vegyület azonosítására szolgáló fizikai paraméterek: Rf = 0,83 (adszorbens: szilikagél; futtatószer: n-propanol: piridin:víz:jégecet : 15 : 10 : 12: : 3), 0,41 ( 10%-os vizes ammóniumacetát-oldat: metanol = 1:1) ninhidrin reakció: + Pauly-reakció: + (cc)d23 = +4,3 (c = 0,1; CH3OH) 1HNMR (DaO, aceton 2,19 : 1,19 (9H, s) EPR-spektrum: fCu(II)-komplex, Mn(II)l MgOAlb-4 86,9 (G) gn 2,225, gr 2,053, A(G) 185,0 infravörös spektrum (KBr-pasztilla): 3360, 2955, 2910, 1735, 1660, 1595, 1460, 1365, 1155, 1080 cm"1. Megjegyezzük, hogy az EPR-spektrumot az (I) képletü vegyület rézionnal képezett komplexével vettük fel. I. referencia példa N-benzil-oxi-karbonil-BHBE-előállitása 82,3 mg (0,481 mmól) eritro-3-hidroxi-L(s)-hisztidin 2 ml vízzel készült szuszpenziójához 80,5 mikroliter (1,2 mól egyenérték) trietil-amint, továbbá 158,5 mg (1,2 mól egyenérték) benzil-oxi-karbonil-klorid 2 ml dioxánnal készített oldatét adjuk a megadott sorrendben, 0 °C hőmérsékleten. Az elegy szobahőmérsékleten éjszakán ét keverjük, majd 5 ml vizet öntünk hozzá és az elegye! 10 ml dietil-éterrel kirázzuk. A vizes fázist szárazra bepároljuk, a bepárlási maradékot metanolban feloldjuk és az oldatot egy lezárt csőbe továbbítjuk. A metanolt nitrogénáramban ledesztilláljuk s a cső tartalmát vákuumban szárazra pároljuk. A bepár- Ióbí maradékhoz 2 ml diklór-metánt adunk, majd -78 °C hőmérsékleten izobutént fúvatunk az elegybe, amíg annak térfogata az eredeti térfogatának 1,5-szeresét el nem éri. Ezután öt csepp tömény kénsavat cseppentünk az elegybe és annak keverését szobahőmérsékleten 48 órán keresztül folytatjuk. A reakcióelegyet 5 ml diklór-metán hozzé-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
