192864. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új lipopeptidek előállítására
29 192864 30 Az alkalmazott gliciltaurint ismert módon állítjuk elő N-(Boc-Gly)-taurin-nátriumsó trifluorecetsavval való hidrolízise útján. Az N-(Boc-Gly)-taurin-nátriumsót Boc-Gly-O-Su-ból és taurin-nátriumsóból kapjuk 90%-ob vizes metanolban. 6. példa 521 mg (0,588 mmól) oktanoil-Cys(2[R,S],3-didekanoiloxi-propíl)-Ala-D-Glu(OtBu)~ NHi-ot 20 térfogata trifluor-ecetsavat tartalmazó 5 ml metilén-kloridban 6 óra hosszat keverünk. Ezt követően az oldószert rotációs bepárlón 40°-os fűrdőhőmérsékleten lepároljuk, a maradékot vízzel eldőrzsőljük, leszívatóssal elkülönítjük, a tölcséren semlegesre mossuk és 40°-on 0,1 torr nyomáson 4 óra hosszat szárítjuk. Az így kapott nyers terméket etil-metil-ketonból átkristályositjuk, ily módon oktanoil-Cys(2[R,Sl,3-didekanoiloxi-propil)-Ala-D-Glu-NHí-ot kapunk. Op. 170-171«. [cclíM=-13» (CHCl3:metanol=l:l; c=l,723). Rf=0,5 (CHCl3:metanol=9:l). A kiindulási anyagot a következő módon állítjuk elő: 6.1 lépés 20 g (0,16 mmól) L-cisztein 150 ml piridin és 120 ml metilén-klorid elegyével készített oldatához 20-25«-on nitrogéngázban hozzácsepegtetünk 26,8 g (0,16 mól) kaprilsavklorid 30 ml metilén-kloriddal készített oldatát, majd az elegyet 17 óra hosszat szobahőmérsékleten keverjük. A rakcióelegyből körülbelül 40«-on vákuumban ledesztilláljuk a metilénkloridot. A maradékhoz hozzáadunk 150 ml piridint, 150 ml DMA-t és 150 ml vizet, így homogén oldatot kapunk. A reakcióelegy pH-ját 30%-os nátriumhidroxid-oldattal 9-re állítjuk be, 2 óra hosszat szobahőmérsékleten keverjük, utána a pH-t 2 n sósavval 5-re állítjuk be, ecetsav-etilészterrel extraháljuk, a szerves fázist vízmentesen nátrium-szulfát felett szárítjuk és rotációs bepárlón 40-45®-on bepároljuk. Ily módon oktanoil-Cys vegyület marad vissza sárga színű, viszkózus olaj alakjában. Rf=0,31 (kloroforra:metanol=7:3). {cc]dso=-16° (c=1,06; CHCU:MeOH=l:l). 6.2 lépés 40,4 g (0,163 mól) oktanoil-Cys vegyülethez és 52,8 g (0,383 mól) kálium-karbonáthoz 375 ml etanolban nitrogéngázban hozzáadunk 13,9 g (0,189 mól) gliceringlicidet. Gyenge nitrogénáramban 4 óra hosszat 75- -80®-on keverjük az elegyet, majd szobahőmérsékletre hűtjük, a szuszpenzióhoz 150 ml vizet adunk, az elegy ph-ját 2 n HCl-el körülbelül 3-ra állítjuk be és ecetsav-etilészter-el extraháljuk. A szerves fázist vízmentes nátriumszulfát felett szárítjuk, szűrjük és a szűrlelet bepároljuk, így oktanoil-Cys(2[ -l,Sl,3-dihidroxi-propil) vegyületet kapunk sárga Bzínű olaj alakjában. Rr=0,23 (CHCl3:MeOH:HiO=65:35:2). fcr]jJ0=-6 (CHCÍ3:MeOH=l:l; c=0,995). 6.3 lépés 2,01 g (6,32 mmól) oktanoil-Cys(2fR,S],3- -dihidroxi-propil) vegyületet feloldunk dimetil -acetamidban és hozzáadunk 2,28 g (9.22 mmól) EEDQ-t, 1,95 g (6,32 mmól) Ala-D-Glu(OtBu)-NHrHCl-t és 0,77 ml (6,32 mmól) trietil-amint. A reakcióelegy pH-ja 7. Az elegyet 40-45«-on 16 óra hosszat keverjük, majd az oldószert 45-50 °C-on nagyvákuumban ledesztilláljuk. A maradékot eldőrzsőljük 3- szór dietíl-éterrel és 3-szor ecetsav-etiléîzterrel és a folyékony fázist mindig dekíntáljuk. Az oldhatatlan maradékot 1 óra hosszat 40«-on és 1 torr nyomáson szárítjuk, rrajd 30 ml (9:1 arányú) THF(viz-elegyben oldjuk szobahőmérsékleten és 100 ml vízzel keverés közben ismét kicsapjuk. A csapadékot leszívatással elkülönítjük és 40°-on, 1 torr nyomáson szárítjuk, így oktanoil-Cys(2[R,S],3-dihidroxi-propil)-Ala-D-Glu(OtBu)-NHi-ot kapunk. Op 184-186 »C. Rf=0,61 (metilén-klorid:metanol=8:2). ;oc]oJO=-4 <CHCla:MeOH=l:l; c=0,479). 6.4 lépés 2.5 g (3,6 mmól) oktanoil-Cys(2[R,S],3- -dihidroxi-propil)-Ala-D-Glu(0tBu)-NH2-ot 18,9 ml (0,23 mól) piridinből és 18,9 ml szénié trakloridból álló elegyben 55-60°-on melegítünk és ezen a hőmérsékleten hozzáadunk 37,8 mg (0,31 mmól) 4-dimetil-amino-piridínt és 1,7 ml (8,1 mmól) kaprinsavkloridot. A reakcióelegyet 20 óra hosszat 55-60“-on keverjük, utána lehűtjük, 200 ml metilén-kloriddal hígítjuk, 50-50 ml 2 n HCl-oldattal 3-szor kirázzuk, utána vízzel semlegesre mossuk, a szerves fázist vízmentes NaaSO« felett szárítjuk és bepároljuk. A barna színű, gyantaszerű maradékot kisnyomású kromatográfiával kovasavgélen (0,040-0,64 mm) tisztítjuk, az eluálást 96:4 arányú CHjChlmetanoleleggyel végezzük. Ily módon oktanoil-Cys(2[R,S],3-didekanoiloxi-propil)-Ala-D-Glu(OtBu)-NH2-ot kapunk. Op. 144-146“. [oc]dío=-10« (CHCli:metanol=l:l; C=1,U7). Rt=0,64 (CHCh:metanol=9:l). 7. példa 0,972 g (1,03 mmól) oktanoil-Cys(2[R,S),-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 16
