192864. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új lipopeptidek előállítására
25 192864 26 famicin SV vagy a rifamicin B antibiotikumokat vagy ezek félszintetikus származékait, különösen a rifampicint említjük meg. A következő példák a találmány szerinti eljárást közelebbről is bemutatják, de a találmány köre nem korlátozódik csupán a példákban leírtakra. A hőmérsékletértékeket Celsius-fokokban adjuk meg. Az Rr-értékeket kovasavgél-vékony réteglapokon határoztuk meg. Az oldószerelegyek összetételét térfogatban adjuk meg, amennyiben másként nem jelöljük. Az anyag koncentrációját az oldószer(elegy)ben az optikai forgatóképesség esetében százalékban (súly/térfogat) adjuk meg. Rövidítések a példákban: Boc terc-butoxi-karbonil-csoport Bz benzilcsoport DMA dimetil-acetamid-csoport DMP dimetil-formamid-csoport EEDQ 2-etoxi-N-etoxi-karbonil-l,2-dihidro-kinolin-csoport Et etilcsoport Me metilcsoport nBu n-butilcsoport Su szukcinimidilcsoport tBu terc-butilcsoport Z benziloxi-karbonil-csoport 1 1. példa a) 4,1 g (3,89 mmól) palmitoil-Cys(2fRl,3- -dilauroiloxi-propil ) -Ala-D-Glu (OtBu ) -NH2-0I feloldunk 18 ml trifluor-ecetsavból és 42 ml metilén-kloridból álló elegyben. Az oldatot 6 óra múlva vákuumban betöményitjük sziruppá, a maradékot éterrel eldörzsöljük és így színtelen, kristályos maradékot kapunk. Ezt a maradékot ismét extraháljuk éterrel és etanolból kétszer átkristályosítjuk, így palmitoil-Cys(2[R],3-dilauroiloxi-propil)-Ala-D-Glu-NHi-ot kapunk. Rf=0,23 (CHCb: EtOH=9:l). Op. 158-161». r«:]D20=-12»(CHCl3: NeOH=l:l; c=l,04). A kiindulási anyagot a következő módon állítjuk elő: b) 5,4 g (6,67 mmól) palmitoil-Cys(2[Rl,- 3-dilauroiloxi-propil) vegyületet, 2,2 g (7,1 mmól) Ala-D-Glu(OtBu)-NHj HCl-ot és 1,1 g (8,1 mmól) N-hidroxi-benztriazolt feloldunk 120 ml abszolút dimetilformamidból és 180 ml metilén-kloridból álló elegyben és az oldathoz hozzáadunk 1,67 (8,1 mmól) diciklohexilkarbodiimidet és az oldat pH-ját körülbelül 7-re állítjuk be 1 ml trietilaminnal. Az elegyet 16 óra hosszat szobahőmérsékleten tartjuk és utána vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot vízzel extraháljuk, a kivonatot elöntjük és a maradékot kétszer átkristályositjuk metanolból. Ily módon színtelen kristályos anyagot kapunk, amely a palmitoil-Cys(2fRl,3-dilauroiloxi-propil)-Ala-D-Glu(OtBu)-NHj. Op. 196-198». |Vd20=-11» (CHCb: MoOH=l;l; c=0,98). Rp 0,44 (CHCb:EtOH=9:l). c) A kiindulási anyagként alkalmazott palmitoil-Cys(2rR],3-dilauroiloxi-propil) vegyületet a megfelelő benzhidril-észterböl állítjuk elő trifluor-ecetsavval a következő módon: 8 g benzhidril-észtert 20 ml trifluor-ecetsavból és 80 ml metilén-kloridból álló elegyben 3 óra hosszat állni hagyunk szobahőmérsékleten, az elegyet vákuumban sziruppá bepároljuk és utána jeges vízzel extrahá'juk. Az anyagot 300 g szilikagélen kromatográfiásan tisztítjuk, az eluálást 95:5 arányú metilén-klorid/etanol-eleggyel 9:1 arányú metilénklorid/etanol-eleggyel 7:3 arányú kloroform/metanol-eleggyel végezzük. Az anyagnak a pH-ját az oszlopra való felvitel előtt trietil-aminnal körülbelül 5-re állíLjuk be. Bepárlás után először szirupszerú tiszta frakciókat kapunk, amelyeknek az Rr értéke 0,22 (CHCb: MeOH=9:l), kristályos formában metanol hozzáadására, utána pedig palmitoil-Cys(2rR],3-dilauroiloxi-propil) keletkezik. Op 52-55». [ocl )M=-7» (dioxán; c=0,65.). 2. példa a) 300 mg palmitoil-Cys(2(Rl,3-dipalmito-iloxi-propil)-Ala-D-Glu-(Ala-OBz)-NH2-ot (7:3 arányú) 50 ml dimetilformamid/tetrahidrofurán-elegyben 200 mg Pd-korommal hidrogénezünk 50 óra hosszat 45»-on. Ezután a katalizátort szűréssel elkülönítjük és 30 ml me’eg oldószereleggyel extraháljuk. Az old ltokat vákuumban betöményitjük és a ma -adékot 10 g kovasavgélen tisztítjuk, az eluálást 9:1 arányú kloroform/metanoleleggyel végezzük. A tiszta frakciók bepárlása után színtelen kristályokat kapunk, amely palmitoil-Cys(2fR],3-dipalmitoiloxi-propil)-Ala-G-Glu(Ala)-NH2, amely 224-229» hőmérséklet tartományban bomlás közben olvad. foci >so=-12° (CHCb:MeOH=l:l; c=0,91). Ri=D,31 (CHCb:MeOH=8:2). A kiindulási anyagként használt benzilésztert a következő módon állítjuk elő: b) 0,6 g 0,659 mmól/palmitoil-Cys(2fRl,3- -dipalmitoiloxi-propil) vegyületet, 257,6 mg (0,659 mmól) Ala-D-Glu(Ala-OBz)-NIb-HCl-t, 106,9 mg (0,79 mmól) N-hidroxi-benztriazolt és 92 jul trietil-amint feloldunk 20 ml abszolút dimetil-formamidból és 50 ml metilén-kloridból álló elegyben és az oldathoz hozzáadunk 164 mg (0,79 mmól) diciklohexil-karbo-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 14
