192431. lajstromszámú szabadalom • Eljárás karbapeném antibiotikumok előállítására
1 2 lel töltött oszlopon kromatografáltuk,. eluálószerként hexánt, etilacetát és hexán elegyek, végül pedig etilacetátot használtunk. Ilyen módon 2,04 g (44%) 1- -(etoxi-karbonil-metil)4H(hjdroxi-metil)-l,2,3.triazolt kaptunk kristályos szilárd anyag alakjában. NMR-spektrum (deutero-kloroform) delta-értékek: 1,28 (3H, triplett, J = 7 Hz), 4,23 (2H, kvartett, J = = 7 Hz), 4,75 (2H, szingulett), 4,85 (2H, szingulett), 7,73 (1H, szingulett). 5,47 g (20,8 mmól) trifenil-foszfin 100 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készült oldatához nitrogén atmoszférában, jeges hűtés közben hozzácsepegtettünk 4,11 ml (20,8 mmól) diizopropil-azodikarboxilátot. 30 perc elteltével hozzáadtuk 1,93 g (10,4 mmól) fenti alkohol, 1,49 ml (20,8 mmól) tiolecetsav és 50 ml vízmentes tetrahidrofurán jéggel hűtött oldatát nitrogén alatt. A reakcióelegyet 2 órán át jeges fürdőben tartottuk, majd további 12 órán át szobahőmérsékleten folytattuk a reagáltatást. Ezután az oldószert lepároltuk, a maradékot 40 g szilikagélen kromatografáltuk, eluálószerként. hexán, 5%, 10%, 15%...50% etilacetátot tartalmazó hexán 100-100 ml mennyiségét használva. A tiolacetátot tartalmazó frakciókat egyesítettük és 60 g szilikagélen ismét kromatografáltuk, eluálószerként hexán, 5%, 10%, 15% és 20% etilacetátot tartalmazó hexán és 22,5%,25%,27,5%...35% etilacetátot tartalmazó hexán 200—200 ml mennyiségét használva. Ilyen módon 1,24 g (49%) 1 -(etoxi-karbonil-metil)-4-(acetil-tio-metil)-I,2,3-triazoIt kaptunk kristályos szilárd anyag alakjában. MMR-spektrum delta-értékek: 1,28 (3H, triplett, J = 7 Hz), 2,37 (3H, szingulett), 3,87 (2H, szingulett), 3,90 (2H, kvartett, J = 7 Hz), 5,12 (2H. szingulett), 7,63 (1H, szingulett), infravörös-spektrum (nujol), 1735,1780cm , és 1,40 g további anyagot kaptunk, amely trifenil-foszfin-oxiddal volt szennyezve. 1,00 g (4,12 mmól) fenti triazol 5 ml vízmentes diklórmetánnal készült jéggel hűtött és kevert oldatához hozzácsepegtettünk 0,51 ml (4,53 mmól) trifluo-metánszulfonsav-metilésztert. A jeges fürdőt 0,5 óra elteltével eltávolítottuk, majd további 0,5 óra múlva vákuummal elszívtuk az oldószert. így fehér szilárd anyag maradt vissza, amelyet 15 ml vízben szuszpendált és a szuszpenziót keverés közben jeges fürdőben hűtőn ük. 0,69 g (12,4 mmól) káliumhidroxid 5 ml vízzel készített oldatát adtuk hozzá, és a reakcióelegyet 1 órán át kevertük. Ezután vízzel 30 ml térfogatúra hígítottuk, és szilárd kálium-dihidrogén-foszfát hozzáadásával a pH értékét 8,0-ra állítottuk be. Ebből az oldatból 22 ml mennyiséget (amely körülbelül 3,0 mmól tiolkarboxilátot tartalmazott) hozzáadtunk 1,60 g (2,76 mmól) enol-foszfát 30 ml tetrahidrofuránnal készült oldatához keverés és jeges hűtés közben. 30 perc elteltével nagy vákuumban eltávolítottuk a reakcióelegyből a tetrahidrofuránt. A sárga oldatot ezután 35 x 120 mm méretű fordított fázisú oszlopon kromatografáltuk. Az elúciót először 300 ml vízzel, majd 5%, 10%, 15%...30% acetonitrilt tartalmazó víz 100-100 ml mennyiségével végeztük. A kívánt vegyületet tartalmazó frakciók liofilizálásával 930 mg p-nitro-benzil-észtert kaptunk sárga szilárd anyag alakjában. Ezt nyomásálló készülékbe vittük át, amely 25 ml étert, 25 ml tetrahidrofuránt, 25 ml foszfát puffert és 900 mg 10%-os palládium/szén katalizátort tartalmazott. (A foszfát puffert úgy állítottuk elő, hogy 1,36 g(0,01 mól) kálium-dihidrogén-foszfátot 100 ml vízben oldottunk, és az oldat pH-ját 45%-os vizes káliumhidroxid-oldat hozzáadásával 7,4-re állítottuk be. A hidrogénezést 1 órán át végeztük 276 kPa nyomáson, majd a szerves fázist elválasztottuk, és 2 x 5 ml vízzel mostuk. Az egyesített vizes fázisokat szűr;tűk, majd nagy vákuumban bepároltuk. A visszamaradó oldatot 35 x 120 mm méretű fordított fázisú oszlopon kromatografáltuk, és az • oszlopot vízzel eluáltuk. A karbapeném vegyületet tartalmazó frakciókat egyesítettük és liofilizáltuk. Ilyen módon 1,21 g halványzöld szilárd anyagot kaptunk. Ezt nagynyomású folyadékkromatográfiás tisztítottuk (10 x 300 mm méretű vizes Microbandapack C-18 oszlop, azeluálószer víz). így 480 mg (41%) cím szerinti vegyületet kaptunk tiszta alakban. MMR-spektrum (deutériumoxid) delta -értékek : 1,23 (3H, dublett, J = 6,4 Hz), 3,11 (2H. dublett, J = = 9 Hz), 3,37 (1H, kvartett, J = 3,0 és 6,1 Hz), 4,02 (7H, multiplen), 5,18 (2H, szingulett), 8,53 (1H, szingulett). Infravörös-spektrum (nujol): 1750 cm’1. Ultraibolya spektrum (foszfát puffer, pH = 7,4): W=Í?5nm(e = 78IO)' 5. példa 3-[5-<1,4-Dimetil-l ,2,4-triazolium)-metil-tio]-6alfa-[l-(R)-hidroxi-etil]-7-oxo-l-azabiciklo[3.2.0]-hept-2-cn-2-karboxilát - (XIV) képletű vegyület A. l-Metil-5-(acetil-tio-metil)-l ,2,4-triazo! (Az eljárást az N. reakcióvázlat szemlélteti) 565 mg (5,0 mmól) 1 -metil-5-(hidroxi-metil)-l ,2,4- -triazol (R.G. Jones és C. Ainsworth, J. Amer. Chem. Soc., 77, 1938 /1955/) és 0,91 ml (6,5 mmól) trietilamin 5 ml diklórmetánnal készült, jéggel hűtött és kevert oldatához hozzácsepegtettünk 0,46 ml (6,0 mmól) rnetánszulfonil-kloridot. 20 perc elteltével további 1,05 ml (7,5 mmól) trietil-amint, majd 0,53 ml (7,5 mmól) tiolecetsavat adtunk hozzá, és a keverést 45 percig folytattuk. A reakcióelegyet ezután diklórmetánnal hígítottuk és vízzel mostuk. A vizes fázist 3 x 5 ml diklórmetánnal extraháltuk, az egyesített szerves fázisokat magnéziumszulfáton szárítóttuk, és az oldószert lepároltuk. A maradékot szilikagéllel töltött oszlopokon kromatografáltuk. Ilyen módon 570 mg tiszta l-metil-5-(acetil-tio-metiI)-l ,2,4-triazolt kaptunk sárga olaj alakjában. Emellett 200 mgszenynyezett frakciót ismét kromatografáltunk szilikagélen, prepára tív vékony-rétegen. így további 100 mg tiszta anyagot kaptunk (össztermelés 85%). MMR-spektrum (deutero-kloroform) delta-értékek: 2,38 (3H, szingulett), 3,90 (3H, szingulett), 4,25 (3H, szingulett), 7,80 (1H, szingulett). B. 3-[5-(l ,4-Dimetil-l,2,4-triazoliurn)-metil-tio]-6-alfa-( I -(R)-hidroxi-etil ]-7 -oxo-1 -azabiciklo[3.2.0] hept-2-én-2-karboxilát (Az eljárást az 0. reakcióvázlat mutatja be) 730 mg (4,27 mmól) l-metil-5-acetil-tio-metü)-1,2,4-triazol 7 ml diklórmetánnal készült oldatához jeges hűtés közben hozzácsepegtettünk 1,20 ml (10,7 mmól) trifluor-metánszulfonsav-metilésztert. Hagytuk, hogy a reakcióelegy lassan szobahőmérsékletre melegedjen 3 óra alatt, majd az elegyet betöményítettük. A visszamaradó olajat éterrel trituráltuk. így nyers 1,4-dimetil-5-(acetii-tio-metiI)-l ,2,4-triazolium-trifiuor-metánszulfonátot kaptunk 1,46 g mennyiség192.431 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 9
