192431. lajstromszámú szabadalom • Eljárás karbapeném antibiotikumok előállítására
lül 1 ml-es részletekben. A kapott szemcsés szuszpenziót szűrtük, a szilárd anyagot 5 x 75 ml tetrahidrofuránnal mostuk. Az egyesített tetrahidrofurános oldatokat vízmentes magnéziumszulfáton szárítottuk, és az oldószert lepároltuk. A visszamaradó sárga olajat 90 x 35 mm méretű szilikagél oszlopon kromatografáltuk. Az elúciót hexán, 1:1 és 13 arányú etilacetát/hexán elegyek 100-100 ml mennyiségével, végül 9:k arányú etilacetát/metanol elegy 100 ml mennyiségével végeztük. Ilyen módon 3,18 g (40%) 4-(hidroxi-metil)-l-metiM ,2,3-triazolt kaptunk színtelen olaj alakjában. NMR-spektrum (deutero-kloroform) delta-értékek: 4,07 (3H, szingulett), 4,73 (2H, dublett), 7,52 (1H, szingulett). Infravörös-spektrum (tisztán): 3320 cm'1. 4.67 ml (41,3 mmól) fenti alkohol, 7,47 ml (53,7 mmól) trietilamin és 20 ml diklórmetán elegyéhez hozzácsepegtettünk 3,82 ml (49,6 mmól) metánszujfonil-kloridot. 30 perc elteltével az oldószert lepároltuk, és a visszamaradó szilárd anyagot 30 ml acetonitrilben felvettük. Ezután hozzáadtunk 7,06 g (62,0 mmól) kálium-tioacetátot, és a szuszpenziót 3 órán át kevertük szobahőmérsékleten. További 3,0 g (26,3 mmól) kálium-tiolacetátot adtunk hozzá, és a szuszpenziót további 16 órán át kevertük. A sötét szuszpenziót betöményítettük, és 10 ml vizet adtunk hozzá. Az elegyet 5 x 40 ml diklórmetánnal extraháltuk. Az egyesített extraktumokat vízmentes magnéziumszulfáton szárítottuk, és az oldószert lepároltuk. A visszamaradó olajat 90 x 36 mm méretű szilikagél oszlopon kromatografáltuk. Az elúciót hexánnal, majd hexán és etilacetát 1:1 arányú elegyével végeztük. Ilyen módon 5,95 g (84%) 4^(acetil-tio-metil)-l-metil-1,2,3-triazolt kapunk halványvörös szilárd anyag alakjában. NMR-spektrum (deutero-klorform) delta-értékek: 2,40 (3H, szingulett), 4,10 (3H, szingulett),4,20 (2H, szingulett), 7,53 (1H, szingulett). Infravörös-spektrum (nujoi): 1675 cm'1. 1,00 g (5,85 mmól) kapott triazol és 1,48 ml (13,3 mmól) bróm-ecetsav-etilészter 10 ml vízmentes acetonitrillel készült oldatát 90 órán át hevítettük 60 °C- on nitrogén atmoszférában. Az oldószert lepároltuk, és a visszamaradó olajat 4 x 25 ml éterrel trituráltuk. Ilyen módon barna ragacsos anyag alakjában kaptunk 1 -metiI-3-(etoxi-karbonil-metil)-4-acetil-tio-metil-l ,2,- 3-triazoÜum-bromidot, amelyet közvetlenül felhasználtuk. 0,66 g (12 mmól) káliumhidroxid 5 ml vízzel készült hideg oldatát hozzáadtuk a fenti triazolium-bromid 20 ml vízzel készített, jéggel hűtött és kevert oh datához. 20 perc elteltével az elegyet 35 ml térfogatúra hígítottuk, és annyi szilárd kálium-dihidrogén-foszfátot adtunk hozzá, hogy az oldat pH-értéke 8,0 le?/en. Az oldatot ezután hozzáadtuk az enol-foszfát 5 ml tetrahidrofuránnal készült, kevert és jéggel hűtött oldatához. 30 perc elteltével és 1,5 g 10%-os palládium/szén katalizátort tartalmazott. A szuszpenziót 55 percig hidrogéneztük nyomáson. A szerves fázist elválasztottuk és 2 x 5 ml vízzel mostuk. Az egyesített vizes fázisokat szűrtük, a szűrletet pedig nagy vákuumban bepároltuk. A visszamaradó anyagot 35 x 120 mm méretű fordított fázisú oszlopon kromatografáltuk, eluálószerként vizet használva. A karbapeném-tartalmú frakciók liofilizálásával 1,20 g zöldszínüf 2 szilárd anyagot kaptunk. Ezt újból kromatografáltuk nagynyomású folyadékkromatográfiás módszerrel (Waters Prep. 500 HPLC készülék PrepPAK-500/Cjg oszlopon. Az eluálószer 2% acetonitrilt tartalmazó víz volt. A karbapeném vegyületet tartalmazó frakciókat egyesitettük és liofilizáltuk, majd ismét nagynyomású folyadékkromatografálásnak vetettük alá 10 x 300 mm méretű Waters Microbondapack C-18 oszlopon, eluálószerként vizet használva. Liofilizálás után 190 mg (17%) tiszta cím szerinti vegyületet kaptunk halványsárga szilárd anyag alakjában. NMR-spektrum(deutériumoxid)delta-értékek: 1,24 (3H, dublett, J = 6,4 Hz), 3,07 (2H, dublett, J = 9 Hz), 3,38 (1H, kvartett, J = 2,7 és 6,0 Hz), 4,02-4,30 (3H, multiplett), 4,29 (3H, szingulett). 5,23 (2H, szingulett), 8,52 (1H, szingulett). Infravörös-spektrum (nujoi): 1750 cm"1. Ultraibolya-spektrum (foszfát puffer, pH = 7,4): V',?,96“n’(e'7520)' 4. példa 3-[4-(l -Karboxiláto-metil-3-metil-l ,2,3-triazolium)-metil-tio]-6alfa[ 1 -(R)-hidroxi-etil]-7-oxo-l -azabiciklo[3.2.0]hept-2-én-karbonsav-káliumsó (XIII) képletű vegyidet (Az eljárást az M. reakcióvázlat mutatja be) 30.0 g (0,23 mól) azido-ecetsav-etilészter és 14,3 ml (0,23 mól) propionsav 75 ml toluollal készített oldatát szobahőmérsékleten kevertük. A reakció enyhén exoterm maradt 1,5 órán át, amikor igen exotermmé vált, és szükség volt jeges fürdővel történő hűtésre. Az exoterm szakasz után a reakcióelegyet 30 percig forraltuk visszafolyató hűtő alatt. Ezután az elegyet jeges fürdővel lehűtöttük, a kristályos anyagot szűrtük és kevés toluollal mostuk. 33,3 g (72%) nyers anyagot kaptunk, amely egyetlen izomerből állt, és feltehetően 1 -(etoxi-karbonil-metil)-l ,2,3-triazol-4- -karbonsav volt, egy korábban ismertetett reakció analógiájára (C. Pederson, Acta Chem. Scand., 13, 888/1959/). NMR-spektrum (deutero-dimetilszulfoxid) delta-értéleele * 1,20 (3H, tripíett, J = 7 Hz), 4,15 (2H, kvartett, J = = 7 Hz), 5,42 (2H, szineulett), 8,67 (1H). 5.00 g (25,1 mmól) kapott fenti karbonsav, 3,68 ml (26,4 mmól) trietií-amin és 50 ml vízmentes diklór-metán elegyét hozzáadtuk 2,52 ml (26,4 ml) klórhangyasav-etilészter 50 ml diklórmetánnal készült, jéggel hűtött és kevert oldatához. A bíborszínü oldatot 30 percig kevertük, majd 10 ml vízzel mostuk, vízmentes magnéziumszulfáton szárítottuk, és az oldószert lepároltuk. A nyers vegyes anhidridet 50 ml tetrahidrofuránban oldottuk, és lassan hozzáadtuk 0,72 g (18,9 mmól) nátrium-bór-hidrid 50 ml tetrahidrofuránnal készült jéggel hűtött szuszpenziójához. 30 perc keverés után további 0,30 g (7,9 mmól) nátrium-bór-hidridet adtunk hozzá, és a reakcióelegyet jeges fürdőben tartottuk 1 órán át. Ezután 5 ml vizet, majd 10 perc elteltével 3 ml 10%-os vizes sósav-oldatot adtunk a reakcióelegyhez. A gázfejlődés befejeződése után keverés közben hozzáadtunk 2 g szilárd káliumkarbonátot. A szerves fázist elválasztottuk, és a visszamaradó fehér kenőcsös anyagot további tetrahidrofuránnal extraháltuk. Az egyesített szerves fázisokat vízmentes magnéziumszulfáton szárítottuk, majd az oldószert lepároltuk. A maradékot szilikagél-192.431 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 8
