192406. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1,4-dihidropiridin-származékok és a vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 2 számú sebességgel centrifugáltuk. A felső réteg mint trombocitában dús plazma (PRP) vált el. Az alsó réteget tovább 'centrifugáltuk és trombocitában szegény plazma különült ,-el (PPP). A trombociták számát 5xl0'5 (/Ld-6xI05) (A állítottuk be oly módon,hogy a PRP-t PPP-vei hígítottuk. Az alábbi módon előállított teszt-vegyületek 25 /d-ét adagoltuk 25 jul PRP mennyiségben a fenti beállítás után és az elegyet 37 °C-on két percig előinkubáltuk, majd 75 jumól (végső') AA-t adtunk hozzá. Aggregométert alkalmaztunk (37 °C, 1100 rpm) és a transzmisszió változásait feljegyeztük. A teszt-vegyületet etanolban oldottuk és így 10 mg/ml koncentrációjú anyagot kapunk. Amikor a hatását mértük, pH = 7,4 értékű foszfát-pufferrel hígítottuk. A pufferes hígítás után a teszt-vegyületet 0 °C-on 4 óra hosszat állni hagytuk és a teszt-vegyület hatását hasonlóan mértük. A trombocita aggregáció gátló hatás mértékét a következő egyenletből határozuk meg: Gátlási mérték (%) = (1 - T/T0) x 100 Az eredményeket a 10. táblázat mutatja. Vegyület ■ 10. táblázat Koncentráció (juMól) Gátlási % AA 75 /umól (140)-hidroklorid 100-1,1 ± 1,4 (156)-hidroklorid 100-1.9*2,5 Nicardipin-hidroklorid 100 35,2±9,4X XP < 0,05 lényegesen eltér a kontrolitól A 10. táblázatból látható, hogy a találmány szerint előállított vegyületek nem gátolják a trombocita aggregációt, ezzel szemben ellenkező a Nicardipin-hidroklorid gátolja a trombocita aggregációt. A fenti tény azt mutatja, hogy a találmány szerint előállított vegyületek specifikusabb gyógyhatással rendelkeznek, mint a Nicardipin-hidroklorid. 30. példa A kémiai stabilitás mérése 1 mg (156) számú vegyület hidrokloridját 100 ml metanolban feloldottuk. Az oldatot átlátszó üvegű kémcsőbe helyeztük, majd szorosan lezártuk a kémcsövet és a laboratóium ablakánál állni hagytuk. Az oldat egy részét szabályoz időközönként kivettük és nagynyomású folyadékkromatográfiának vetettük alá, hogy meghatározzuk az oldatban visszamaradt (156) vegyület hidrokloridjának mennyiségét. Ugyanezt a kísérletet elvégeztük kontrollként a Nicardipin-hidrokloriddal is. A kísérlet eredményét all. táblázat mutatja. Ebből kitűnik, hogy a (156) vegyület hidrokloridjának jobb a fénystabilitása, mint a Nicardipin-hidrokloridé. JJL táblásai Enyhe stabilitás metanolos oldatban Vegyület Maradék százalék 2 óra 4 óra 6 óra (156)-hidroklorid 100 99 100 Nicardipin-hidroklorid 98 87 78 31. példa Tabletta előállítása Egy tablettában 3 mg (140) vegyület hidrokloridját tartalmazó tablettát állítunk elő a következő öszszetétellel: (140)-vegyület hidtoklorid 3 mg Laktóz 87 mg keményítő 30 mg magnézium-sztearát 2 mg 32. példa Injektálható oldat előállítása 1 ml 0,05 mg (140) vegyület hidrokloridját tartalmazó vizes injekciós oldatot állítottunk elő a következő összetétellel: (140) vegyület hidrokloridja 5 mg nátrium-klorid 900 mg injektálható víz 100 ml 33. példa Por előállítása A következő komponensekből állítjuk elő a port: (140) vegyület-hidrokloridja 5 mg laktóz 100 mg keményítő 100 mg hidroxi-propil-cellulóz 10 mg 34. példa 2-Propil-6-metil-4-(2-fluor-3-nitro-fenil)-l ,4-dihidropiri din-3 -karbon sav-[3 -(N -benzil-N -metil-amino)-2,2-dimetil-propil]-5-karbonsav-metilészter szintézise (242) 330 mg 2-fluor-3-nitro-benzaldehid, 580 mg 3-amino -kroton sa v-3 -(N-benzil -N-metil-amino)-2,3 -dime til-propilészter 2 ml 2-propanollal készített elegyéhez 260 mg butiril-ecetsav-metilésztert adunk. Az elegyet 12 óra hosszat melegítjük visszafolyató hűtő alatt. A kapott reakcióelegyet ugyanúgy kezeljük, mint a 8. példában és így 300 mg kívánt (242) vegyületet kapunk. Analízis a C3, H38 FN3C>6 képlet alapján számított :C%=65,6, H%=6,7, N%=7,4, talált: C%=6 5,5, H%=6,8, N%=7,2. 35. példa 6-Etil-2-metil-4-(2-fIuor-5-nitro-fenil)-l,4-dihidropiridin -3 -karbonsav-[3 -(N-benzil -N-metil-amino)-2,2-dimetil-propil]-5-karbonsav-metilészter (170) 165 mg 2-fluor-5-nitro-benzaldehid, 305 mg 3-(N-benzil-N-metil-amino)-2,2-dimetil-propil-propioacetát 1 ml izopropanollal készített oldatához 123 mg 3-amino-krotonsav-metilésztert adunk. Az elegyet 12 óra hosszat melegítjük visszafolyató hűtő alatt. A kapott elegyet a 8. példában leírt módon kezeljük és így 125 mg kívánt (170) vegyületet kapunk. Analízis a C30H36FN3Oe képlet alapján számított: C%=65,1, H%=6,6, N%=7,6, talált: C%=65,1, H%=6,4, N%=7,5. 36. példa 2,6-Dimetil-4-(2-f]uor-3-nitro-fenil)-l ,4-dihidropiridin-3-karbonsav-[2-(N-benzil-N-metil-amino)-1,2-dimetil-etil]-5-karbonsav-metilészter 169 mg 2-fluor-3-nitrobenzaldehid, 116 mg3-amino-metil-krotonát és 277 mg 2-(N-benzil-N-metilamino)-l,l-dimetil-etil-acetoacetát 1 ml 2-porpanollal készített elegyét 8 óra hosszat melegítjük visszafolyató hűtő alatt. Az elegyet a 10(i) példa szerint dolgozzuk fel és 105 mg kívánt vegyületet kapunk. 1R(CHC13) cm'1: max 1684,1348. NMR(CDC13) ppm: 7,5-7,5 (m, 2H). 7,3-7,1 (m, 6H), 6,19 (brs, 1H), 5,38 (s, 1H), 3,95 (s, 2H), 3,63 192.406 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 20
