192246. lajstromszámú szabadalom • Eljárás kalcitonint tartalmazó galenikus készítmények előállítására
1 .192 246 2 I. példa Nazális adagolás céljára alkalmas, lazac-kalcitonint tartalmazó készítmény előállítása Komponensek Mennyiség (ml-enként) 1. Lazac-kalcitonin (hatóanyag) 0,1375 mg 10% felesleg 0,01375 mg 0,15125 mg 2. Nátrium-klorid 7,5 mg 3. Benzalkónium-klorid 0,1 mg 4. Sósav (normál) 3,7 pH-ig hozzáadva 5. Desztillált víz 1,0 ml végtérfogatra Az 1.-3. komponenseket nitrogéngáz védelme alatt a szokásos módon összekeverjük (összesen 2500 ml végtérfogatra számítva): 10% feleslegben adunk hozzá lazac-kalcitonint a szűrési veszteség pótlására. Ezután hozzáadjuk a sósavat a 3,7 pH érték eléréséig, majd desztillált vízzel 2500 ml-re töltjük. Az így kapott oldatot (például 0,2 pm pórusméretű szűrő alkalmazásával) szűrjük. így nazális adagolás céljára alkalmas készítményt kapunk, amelyet 2 ml oldattérfogatú nazális permetadagolóba töltünk. A készítmény milliliterenként körülbelül 550 MRC egység hatóanyagot tartalmaz, az adagoló berendezés egy alkalmazás során 55 egységet tartalmazó mennyiséget bocsát ki. 2. példa A viszonylagos biológiai hasznosulás vizsgálata nazálisán, illetve intramuszkulárisan adagolt lazac-kalcitonin esetében E vizsgálatot 12 egészséges önkéntes egyénen, hat férfin és hat nőn végeztük, akiknek testsúlya 50-85 kg volt. A vizsgálati egyének 4 alkalommal kaptak lazac-kalcitonint, egyszer intramuszkulárisan, háromszor nazális úton. Az adagolás során a következő mennyiségeket vittük be : A. Nazálisán: Al. 55 MRC egységet; A2. 110 MRC egységet; A3. 220 MRC egységet. B. Intramuszkulárisan: 50 MRC egységet. A nazális kezelést az 1. példában leírt készítménnyel olyan permetadagoló berendezéssel végeztük, amely egy alkalommal 55 MRC egységet tartalmazó dózist bocsátott ki. Adagolás céljára a vizsgálati egyént a hátára fektettük, és fejét 5 percen át hátrahajtottuk. Az orrlyukakat közvetlenül az adagolás előtti orrfúvással megtisztítottuk. Az intramuszkuláris adagolást az 1. példában leírt készítményhez hasonló, 1 ml térfogatú dózis befecskendezésével végeztük, ez az injekció azonban 50 MRC egység kalcitonin mellett benzalkónium-kloridot nem tartalmazott. Az oldatot a középső farizomba fecskendeztük. Az összes vizsgálati egyént véletlen sorrendben négyszer kezeltük. A kezelések között legalább 3 napos szünetet tartottunk. A kezeléseket reggel, vajat, tejet és sajtot nem tartalmazó könnyű reggeli elfogyasztása után végeztük. A vizelet mennyiségének állandósítása céljából a vizsgálati egyének óránként 100 ml vizet vagy narancslevet fogyasztottak. A kezelés után 4 órán belül táplálékot nem fogyasztottak. A vizsgálati egyénektől közvetlenül az adagolás előtt (kontroll céljából), majd az adagolás után 5, 15, 30, 60, 90, 120, 180, 240, 360 és 480 perccel vérmintákat vettünk. Kontroll céljára 20 ml, az összes következő minták céljára 2 ml vért vettünk. Az összes szérummintákban radioimmun-mérés segítségével meghatároztuk a lazac-kalcitonin koncentrációját. A kísérlet során ellenőriztük a vérnyomást, és a vizeletmintákat a lehetséges káros hatások szempontjából megvizsgáltuk. Megfigyeltük mellékhatások, például a hányinger tüneteinek fellépését. A lazac-kalcitonin plazmakoncentrációjának „görbe alatti területét” statisztikusan kiszámítottuk, egyrészt az összes értékek felhasználásával - beleértve a 26 pg/ml kimutatási határ alatti értékeket is -, másrészt úgy, hogy a kimutatás határa alatti értékeket zérusnak vettük. Meghatároztuk a maximális plazmakoncentrációt, továbbá e maximum elérésének időpontját. A nazális adagolás viszonylagos biológiai hasznosulását a viszonylagos, dózissal standardizált görbe alatti területből (50 MRC egységre alapozva) határoztuk meg egyrészt a nazális, másrészt az intramuszkuláris alkalmazás után. A kapott eredmények azt mutatják, hogy mind 110, mind 220 MRC egység orrnyálkahártyán való alkalmazása után kapott, görbe alatti területek öszszehasonlíthatók az 50 MRC egység intramuszkuláris adagolása után kapott, görbe alatti területekkel. 110 MRC egység nazális alkalmazása után a lazac-kalcitonin szérumkoncentrációja 8 órán át a kimutatási határ felett marad; ezzel szemben 50 MRC egység intramuszkuláris alkalmazása után a szérumkoncentráció 6 órán át marad a kimutatási határ felett. Nazális alkalmazás során még a legmagasabb, azaz 220 MRC egység adagolásakor sem figyeltünk meg káros mellékhatásokat. 3. példa Nazális adagolásra alkalmás, lazac-kalcitonint tartalmazó készítmények előállítása A készítmény sorszáma Az alkalmazott lazac-kalcitonin mennyisége 3a. 0,06875 mg/ml 3b. 0,275 mg/ml 3c. 0,55 mg/ml 3d. 1,1 mg/ml E készítményeket az 1. példában leirt eljáráshoz hasonlóan állítjuk elő. A 2. és 3. komponenseket azonos mennyiségekben (7,5 mg, illetve 0,1 mg/ml mennyiségben) alkalmazzuk, és a pH értékét 1 n sósav alkalmazásával szintén 3,7-re állítjuk. Ezután desztillált vízzel a kívánt végtérfogatra töltjük. Az így kapott 3a. készítmény milliliterenként 250, a 3b. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
