192003. lajstromszámú szabadalom • Eljárás indoli-glicil-cefem-származékok előállítására
1 192.003 2 glidnt nyerünk. Az Így keletkezett észter 1 g-jának . 1 n nátrium-hidroxid oldattal kivitelezett hidrolízisével 0,73 g 3-indolil-glicint nyerünk. 2. Készítmény N-terjC-butoxi-karbonil-3-indolil-glicin 3 g (9,27 mmól) 3-indolil-glicin 30 ml víz és 30 ml dioxán elegyében készült oldatához, amely 1,75 g nátrium-bikarbonátot tartalmaz, kevertetés közben egy adagban 2,63 g (12 mmól) di-terc-butil-dikarbonátot adunk. A reakcióelegyet 60°Cra melegítjük, öt órán át kevertetjük, majd25°C-rahűtjükés további 17 órán át kevertetjük. A reakcióelegyet besűrítjük és a terméket etil-acetáttal kivonatoljuk. A szerves fázist elválasztjuk, szárítjuk és az oldószer lepárlása után 2,13 g N-terc-butoxi-karbonü-3-indolil-glicint kapunk. MMR (DMSO-D6): delta 1,4 (s, 9H); delta 5,29 (d, 1H); delta 7,0-7,8 (m, 5H). 3. Készítmény D-(N-klór-acetil-3-indolil)-glicin A „Methods in Enzimology”-ban //44, 746 (1976)/ leírt eljárást követve 66,3 g (D,L-(N-klór-acetil-3-indolil)-glicint olyan oszlopon kromatografálunk amelyben 60 g, DEAE Sephadex szilárd tölteten 20 g N-acil-G amitfosav-hidroláz van. 0,1 mól 7,08 pH-jú kálium-hidrogén-foszfát puffer oldattal eluálunk. Azokat a frakciókat, amelyek vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat alapján a kívánt terméket tartalmazzák, egyesítjük, és a pH-t 1 n sósav oldattal 2,0-ra állítjuk be. A savas oldatot több ízben etil-acetáttal kivonatoljuk, a kivonatokat egyesítjük, vízzel mossuk, szárítjuk és az oldószert csökkentett nyomáson elpárologtatva 35 g D-(N- klór-ace til-3-indolil)-glicint nyerünk. 1. példa Terc-butil-D,G7-(N-terc -butoxi-karbonil-3-indolil) -glidl-ami do-3 -me til-3-cefe m-4-kar boxilá t 1,16 g (8,58 mmól) 1-hidroxi-benz-triazol 20 ml N,N-dimetil-acetamidos oldatához 0°Gon kevertetés közben 1,26 ml (9,04 mmól) trietil-amint és 0,68 ml (8,78 mmol) metán-szulfonil-kloridot adunl^ A reakdóelegyet 0°Gon 30 percig kevertetjük, 15 Gra melegítjük és 1,26 ml trietil-amin és.2,13 g (7,36 mmól) D.L-N-terc-butoxi-karbonil-3-indolil-glicin hozzáadásával hígítjuk. A reakcióelegy 70 perces kevertetése után 25öGon, egy adaban 510 mg (1,88 mmól) tercbutil-7-amino-3-metil-3-cefem-4-karboxilátot adunk hozzá. A reakcióelegyet 25°Gon három órán át kevertetjük és az oldószert elvátolítva szárazra pároljuk. A terméket 100 ml etü-acetátban oldjuk, 1 n sósav oldatta] többször mossuk, majd 5%-os vizes nátriumhidrogén-karbonát oldattal és vízzel való mosás után az oldószert csökkentett nyomáson lepároljuk. 5,3 g terc-butil-D,G7- (N-terc-butoxi-karbonÉ-3-índoIil)-glicil-amido-3-metil-3-cefem-4-karboxüátot nyerünk. NMR (CDG3): delta 1,5 (két szingjet, 9H); delta 2,03 és 2,04 (két szingjet, 3H); delta 2,9-3,55 (m, 2H); delta 4,9 (két dublett, 1H); delta 5,4-5,9 (m, 2H); delta (7,0-8,0 (m, 1H). Az így előállított termék 4 g-ját kétszer szilikagéloszlopon kromatografáljuk, majd a következő elegygyel eluálunk: 2 tf% etanol, 15 tl% etil-acetát és 83 tí% izooktán. A lassabban futó anyagot tartalmazó frakciókat egyesítjük és be pároljuk. Olajszerű maradékot kapunk, amelyet szilikagélen kromatografálunk majd hexán-etil-acetát grádienssel eluálunk 100% hexánnal indulva és 100%-etil-acetáttal végezve. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és szárazra párolva 650 mg terc-bútil-D-7-(N-terc- butoxi-karbonil-3- indolil)-glicil-amido-3-metil-3-cefem -4-karboxilátot nyerünk. 2. példa D-7-(3-indolil-glicü-amido)-e-metil -3-cefem-4-karbonsav-trifluor-acetát 500 mg terc-butil-D-7-(N-terc-butoxi -karbonil-3- indolil)-glicil-amido-3-metil-3-cefem-4-karboxilát (1. példa) 1 ml trietil-szilánt tartalmazó 5 ml diklór-metános 0°Gos oldatához kevertetés közben egy perc leforgása alatt 1 ml trifluor-ecetsavat csepegtetünk. A rekacióelegyet a hozzáadása után 5 percen át 0°Gon kevertetjük és az oldószereket csökkentett nyomáson lepároljuk. A terméket 5 ml dietil-éterrel péppé dörzsöljük, 5 ml vízben oldjuk és liofilizálás után 480 mg D-7-(3-indolil-glicil-amido)-3-metil-3-cefem -4-karbonsav-trifluor-acetátot nyerünk. NMR (D2O) : delta 1,68(s, 3H); delta 3,05 (q, 2H); delta 4,92 (d, 1H); delta 5,51 (s, 1H); delta 5,61 (d, 1 H); delta 7,1-7,7 (m, 5H). 3. példa Az 1. és 2. példa általános eljárást követve D,LN- terc-butoxi-karbonil-3-indolil-glicint terc-butil-7-amino-3-klór-3-cefem-4-karboxiláttal reagáltatunk. Kromatográfiás úton elválasztjuk az izomereket, majd a védőcsoportok eltávolítása után D-7-(3-indolil-gIicilamido)-3-klór-3-cefem-4-karbonsav-trifluor-acetátot nyerünk. 4. példa D-7-(3-indolil-glicil-amino) -3-metoxi-3-cefem-4- karbonsav 5 ml aceto-nitrilben oldva 0,5 g (l,87mmól) D-N- klór-acetü-3-indolil-glicint (3. készítmény) és 0,51 g (2,06 mmól) N-etoxi-karbonil-2-etoxi-l,2-dihidro-kinolint 5 percig kevertetünk, majd egy adaban 0°Gn kevertetés közben 2,36 g(l 1 mmól) 7-amino-3-metoxi-3-cefem-4-karbonsav acetonitriles oldatát adjuk hozzá, amely 12 ml bisz-(trimetil-szilil)-trifluor-acetamidot tartalmaz. A reakcióelegyet 0°C-on 30 percig kevertetjük, 25°Gra melegítjük és további 2 órán át kevertetjük. A reakcióelegyet vízbe öntjük és 1 n sósav oldatta] pH értékét 2,0-ra állítjuk be. A savanyú vizes oldatot, többszöretil-scetáttal kivonatoljuk, a kivonatokat egyesítjük és szárazra pároljuk, így egy olajat kapunk. Az olajat diklór-metánban oldjuk fölöslegben difenil-diazo-metánt adunk hozzá. Az oldószer eltávolítása után 0,7 g 7-D-(N-klór acetil-3-indolil)-glicil-amido-3-metoxi-3-cefem-4-karboxilátot kapunk. Az így keletkezett terméket 30 ml metanolban oldjuk, amely 2,0 g tiokarbamidot tartalmaz és a reakcióeíegyet 25°Gon egy órán át kevertetjük. Az oldatot vízhez öntjük és 1 n sósav oldat hozzáadásával a pH-t 2,0-ra állítjuk be. A savanyú vizes oldatot etil-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 4
