191677. lajstromszámú szabadalom • Eljárás biciklo[3,2,1]oktán-karbonsav-származékok, és az azokat hatóanyagként tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 191.6^7 2 gyászát! készítmények görcsoldó- és anoxéiniaellenes szerként használhatók. A toxikológiai és farmakológia! vizsgálatokat Charles River (CDI) törzshöz tartozó hím egereken végeztük. Toxikológiai vizsgálatok A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek kiválóan tolarálhatók és alacsony toxidtásüak. A Finney módszerével [Probit analysis, University Press Cambridge, 19711 meghatározott orális LDS0 érték egérben 3000 mg/kg az 5. vegyület esetén, és az összes találmány szerinti eljárással előállított vegyület esetén 1000 mg/kg-nál nagyobb. A vegyületekkel elvégeztük az akut, krónikus, szubkrónikus és késleltetett toxicitási teszteket és teratogén vizsgálatokat is, és nem találtunk rendellenességet egy vizsgálat során sem. A vizsgálatok során meghatároztuk a vegyületek szedatív hatását is, forgó henger módszerrel [Boissier, J.R.: Therapie 13,1074 (1958)]. A fenti vizsgálati módszer segítségével meghatározható az állatok mozgás-koordináló képessége. A vizsgálatot egy 4,8 cm átmérőjű,4 fordulat/perc sebességgel forgó fahengerrel végezzük. A vizsgált egerek testsúlya közel 22 g. A vegyületeket orálisan adagoljuk, csoportonként 10 állatnak. A vegyület beadása után 15 perccel az állatot a készülékre helyezzük, és feljegyezzük azon állatok számát (%-ban), amelyek elvesztették egyensúlyozó reflexüket, vagyis nem tudják magukat 2 percen át fenntartani a hengeren. Finney módszerével kiszámítjuk az 50%-os neurotoxikus dózist (NTDS0), amely a vizsgált anyag hatására bekövetkező első neuromuszkuláris károsodás átlagos dózisszintjét jelenti. A fenti vizsgálat eredményét az alábbi táblázatban adjuk meg. Vegyület száma NTD50 (mg/kg) 2. 600 5. 365 6. 400 7. 230 8. 500 Farmakológiai vizsgálatok 1. Görcsoldó hatás 1. Pentetrazol teszt A vizsgálatot csoportonként 10 egérrel végezzük, melyeket a vizsgálat megkezdése előtt egy napon át éheztetünk, és az állatokat egyenként elkülönítjük [Oieymol JActa Pharmacol. 2,1-55 (1950)]. Az állatokat orálisan kezeljük a vizsgálandó vegyületekkel, majd 15 perc múlva 125 mg/kg pentetrazolxrldatot injektálunk intraperitoneálisan. A tónusos görcs elleni védőhatást %-ban kifejezve feljegyezzük Az 50%-os hatásos dózist mg/kg-ban kifejezve Finney módszerével számítjuk ki (ED50). A vizsgálat eredményét az alábbi táblázatban közöljük. Vegyület száma EDS0 (mg/kg) 2. 90 5. 53 6. 75 7. 120 8. 115 nátrium-valproát 200 *ismert hatásos görcsoldószer, melyet kontrollként vizsgáltunk. 2) Szupramaxinrális elektromos sokk A vizsgálat Swinyard és munkatársai [Am. J.Pharmacol. Ther. 168-175 (1952)] módszere szerint végezzük. Csoportonként Í0 állatot kezelünk orálisan, a szupramaximális elektromos sokkot 30 perccel megelőzően, a sokkot fülbe vezetett elektródon keresztül adjuk, 50 Hz-es, <50 voltos váltakozó árammal, 0,4 másodperc alatt. Minden csoportban feljegyezzük azon állatok számát, amelyeknél nem figyelhető meg tónusos túlnyújtás a koponyán keresztüli elektromos stimulálás hatására, és kiszámítjuk az EDS0 értéket. Az alábbi eredményeket kapjuk. Vegyület száma ED Vegyület száma ED5 o (mg/kg) 2. 400 5. 210 6. 210 7. 260 8. 310 3) Bikukullin-teszt A vizsgálatot Perez de la Móra és Tapia [Biochem. Pharmacol. 19, 303-3IC (1973)] módszerével végezzük. Csoportonként 10 egeret orálisan kezelünk a vizsgálandó vegyületekkel, majd 30 perc múlva az állatoknak intravénásán 0,65 mg/kg bikukullin-injekciót adunk. Az injekció beadását követően 30 percen át feljegyezzük a tónusos görcsök jelentkezését, és kiszámítjuk az ED5o értékeket. A kapott eredményeket az alábbi táblázatban közöljük. Vegyület száma ED50 (mg/kg) 5. 68 6. 61 7. 145 8. 75 4) ő-Merkapto-propi on sav-teszt A ß-merkapto-propionsav a glutamát y-amino-vajsawá (GABA) alakítását katalizáló enzimnek, a glutamát-dekarboxiláznak (GAD) működését gátolja. Hatása a GABA-szint csökkenését és beadása után 3—4 perccel tónusos, rángógörcsös rohamok fellépésében nyilvánul meg. A 0-merkapto-propionsavat 60 mg/kg dózisban intraperitoneálisan adagoljuk az állatoknak. A 0-merkapto-propionsav injekció előtt 15 perccel az egereknek orálisan adjuk a vizsgálandó vegyületeket. A fenti módon meghatározott EDJ0 értékeket az alábbi táblázatban foglaljuk össze. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 4
