191647. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vinka alkaloid immunoglobulin konjugátumok előállítására
1 191 647 A találmány tárgya eljárás új. gyógyászati, elsősorban cytos/tatikus hatású vinka-alkaloid-immunoglobulin-konjugátuniok. valantint ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására. A vinka(indol-dihidroindo])-alkaloidákról és az ezekből előállított gyógyszerekről ismert cytosztatikus hatásuk, aminek alapján széleskörűen alkalmazzák rákos megbetegedések kezelésére. Kemoterápiás alkalmazásukat azonban sok esetben gátolja, hogy nemkívánatos mellékhatások lépnek fel, amelyek kiküszöbölésére irányuló próbálkozásokkal a kutatások egész sora foglalkozik. így például a 2 090 837 számú nagy-britanniai szabadalmi leírásban olyan vindesin- (ez a fent említett vinka-alkaloidák egyike) -immunoglobulin-konjugátumot írnak le, amelynél a kapcsolódás a vindesin molekula 3-as helyzetében történik. Ha az immunoglobulin egy antitest, a konjugátum a hatás helyén koncentrálódva csökkenti a más szövetekre kifejtett toxikus hatást, valamint egyéb mellékhatásokat. A találmány tárgya új konjugátum előállítása, amelynek vinka-része kovalens kötéssel, a 4-es helyzetében -OCOXCO-csoporton keresztül — amelyben X jelentése 1—4 szénatomos alkiléncsoport — kapcsolódik egy immunoglobulinhoz, vagy immunoglobulin fragmenshez. Az új konjugátum egy vinka-származék, így például a daganatellenes 4-acetoxi- vagy 4-hidroxi dimer indol-dihidroindol alkaloida származék, és kovalens kötéssel egy vagy több vinka-részt tartalmazhat. Az immunoglobulin vagy fragmens antitest, vagy egy antitest fragmens, antigén felismerő képességgel. Előnyös immunoglobulin anyag az emberi testben előforduló nemkívánatos sejtek felületén antigének felismerésére alkalmassá tett antitest vagy antitest fragmens. Mindazonáltal más egyéb immunoglobulin anyagok is a találmány szerinti oltalmi körébe tartoznak, mivel alkalmasak állatok kezelésére, valamint ellenőrzési és vizsgálati kísérleteknél való felhasználásra. A találmány szerinti eljárással előállított új konjugátumok alkalmasak többek között rákos megbetegedések kezelésére. Tulajdonságai révén sokkal hatásosabb és kevesebb mellékhatása van, mivel képes növelni a cytotoxikus anyag koncentrációját a hatás helyén. A gyógyszer rész (drog-rész) egy közbenső, ún. „spacer -csoporton — -OCOXCO-csoporton — keresztül való kapcsolódása lehetővé teszi a képződő immunoglobulinon a nagyobb gyógyszer-koncentrációt, és így fokozni képes a konjugátum hatásosságát. A találmány szerinti eljárással előállított konjugátumok alkalmasak indirekt rendszerekben, sejt felületi antigénre specifikus antitestek felismerésére való felhasználásra. A találmány szerinti eljárással előállított konjugátumokat az (1) általános képlettel írhatjuk le. Az (1) általános képletben lg jelentése egy immunoglobulin vagy egy immunoglobulin fragmens, X jelentése a fenti, R1 jelentése metoxi-karbonil- vagy karbamoil-csoport R2 jelentése -CH3 - vagy -CHO-csoport; R5 jelentése H, R4 jelentése etilcsoport. Az immunoglobulin vagy a fragmens egy vagy több vinka-részt tartalmazhat. Néhány olyan ismert vinka-alkaloidában. amelyekből például a fenti konjugátumokat származtathatjuk, az (I) általános képletű vegyület vinka-része a 4-es helyzetben-I különbözőképpen szubsztituálva lehet. így például vinblastin esetében: R1 -COOCHj-csoportot, R2 metilcsoportot, R3 hidroxilcsoportot, R4 etil cső portot, R5 hidrogénatomot jelent és a 4-es helyzetben levő szubsz.tituens acetoxi-csoport; vindezin esetében: R’-CONIL-csoportot, R2 metilcsoportot, R3 hidroxilcsoportot, R4 etilcsoportot, R5 hidrogénatomot jelent, és a 4-es helyzetben levő szubsztitucns -OH csoport; vinerisztin esetében: R1-COOCH3-csoportot, R2 formilcsoportot, R3 hidroxil-csoportot, R4-etilcsoportot, és R5 hidrogénatomot jelent, és a 4-es helyzetben levő szubsztituens acetoxi-csoport; VLB ,,A” (4-dezoxi-vinblasztin) esetében: R1 COOCH3- csoportot, R2 metilcsoportot, R3 és Rs hidrogénatomot, R4 etilcsoportot jelent és a 4-es helyzetben levő szubsztituens jelentése acetoxi-csoport; Az anya-alkaloidákra való hivatkozásokat a következő irodalmi helyeken találhatunk: VLB (3,097,137 sz. amerikai Szabadalmi leírás), Ieurosídin vínrozidin és (vinerisztin (mindkettő 3,205,220 számú amerikai szabadalmi leírás) dezmetil VLB(3,354,163 számú amerikai szabadalmi leírás), vindezin és más 3-karboxamidok (4.203,898 számú amerikai szabadalmi leírás), vinblasztinsav, vinkrisztinsav, stb. (4,012,390 számú amerikai szabadalmi leírás), 4 -epivineristin (4,143,041 számú amerikai szabadalmi leírás), és dezoxi VLB „A” és B” [Tetrahedron Letters, 783 (1958(]. Egyéb vinka alkaloidák leírása a 4,166,810 számú amerikai szabadalmi leírásban és RE 30,560-ben található. Az X csoport jelentése 1—4 szénatomos alkiléncsoport és tulajdonképpen a megfelelő HOOCXCOOH általános képletű dikarbonsavból származtatható. X jelentése közül megemlítjük például a következőket: metilén-, etilén-, propilén-, butiléncsoport. Az immunoglobulinok, amelyek az elpusztítani kívánt sejtek felületi antigénjeire specifikusak, valamint az immunizált állatokból, vagy a monoidon termékeket kiválasztó hibridomák tenyésztésével való előállítási eljárásuk egyaránt jól ismert (pl. Handbook of Experimental Immunology, 3. kiadás, D.M.Weir szerk. 1978.). A találmány szerinti eljárásnál előnyösen alkalmazható antitest típusok az IgG osztályhoz tartozó immunoglobulinok. Az immunoglobulinok néhány képviselője például az alább felsoroltak elleni mono- vagy poliklon antitestek (i) emberi vagy állati tumorral kapcsolatos antigének (ii) emberi B- vagy T-sejt antigének, (iii) emberi la antigénéi, (iv) vírus, gomba vagy baktérium antigének, (v) emberi gyulladásos és allergiás reakciók sejtjei. Az emberi vagy állati tumorokkal kapcsolatos antigének elleni antitestek közül előnyösek az alábbiak: (i) carcinoembrionális antigénnel immunizált kecskékből vagy birkákból származó lg: (ii) nyúl antiakut lymplioblasztikus leukémia szérumból származó lg, (iii) különböző emlősök antiszérumaiból nyert lg, amely antiszérumokat akut lymphoblasztikus leukémia, akut myleoblasztikus leukémia, krónikus lymphoblasztikus leukémia és krónikus granulocytikus leukémia ellen tenyésztettek, (iv) tüdő carcinoma anyaggal immunizált kecskékből vagy birkákból származó lg; (v) anti-human colorektális carcinoma antitesteket kiválasztó egér-hybridomákból származó monoklon lg: b 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 85
