190809. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új 76-11 jelű antibiotikum előállítására
1 •2 190 809 tozás nélküli formában, a szabadalom oltalmi ideje lejártáig - amennyiben a bejelentés alapján szabadalmat engedélyeznek - fenn kívánjuk tartani, ily módon az említett mikroorganizmus törzs harmadik felek számára bármikor hozzáférhető lesz, a 5 bejelentés alapján engedélyezett szabadalom teljes oltalmi ideje alatt. Az Sp. 76-11 a következő mikrobiológiai tulajdonságokkal rendelkezik. Az Sp. 76-11 tulajdonságait, különböző táptalajokon, 20-30 nappal a beoltás után figyeltük meg. 19 A zárójelben megadott színárnyalatok a színmegje- . lölési leíró szótáron alapulnak. (I.) Morfológia Az Sp. 76-11 növekedést mutat zabliszt agaron és malátakivonat-élesztőkivonat agaron, de nem 15 vagy alig nő más táptalajokon, ezért a morfológiát zabliszt agaron, malátakivonat-élesztőkivonat agaron, 3 % zablisztet tartalmazó folyékony táptalajon figyeltük meg. Az eredmények a következők: (i) Szubsztrát-micélium 20 A szubsztrát-micélium mind az agaron, mind a folyékony táptalajon terjed és elágazásokat képez. Hosszabb időtartamú tenyésztés után a szubsztrátmicélium osztódni kezd és elliptikus spórákat képez, amelyek mérete 0,8-1,2 x 1,5-1,6 p. Légmicéli- 25 um nem képződik a különböző táptalajokon, de zabliszt agaron, 33 °C-on több, mint 20 napon át tartó tenyésztés után olykor vékony, fehér légmicélium képződik - amely hajlított, szalagszerű vagy köteges, kissé elágazó - és nem képez spórát. 30 (ii) Légmicélium Számos különböző táptalajon nem képződik, de zabliszt agar táptalajon, több, mint 20 napon át tartó tenyésztés után olykor megfigyelhető. A képződött légmicélium szabálytalanul hajlott. Elekt- 35 ronmikroszkóppal nem figyelhető meg spóra. (II.) Sejt-alkotók Az Sp. 76-11-et 1 % glükózt, 1 % élesztőkivonatot és 0,1% zablisztet tartalmazó táptalajon 33 °C-on 7 napig tenyésztjük, rázatás mellett. A sejteket ősz- 40 szegyűjtjük és mossuk abból a célból, hogy mintát vehessünk a sejt összetételének meghatározására. Meghatározzuk a diamino-pimelinsavat és a cukor-összetételt. Mezo-diamino-pimelinsav, galaktóz és maduróz mutatható ki. 45 (III.) Növekedés különböző táptalajokon (i) Szacharóz-nitrát agar (Czapek agar) tenyészet: Növekedés: nagyon gyenge. 30 napos tenyésztés után gyenge növekedés figyelhető meg. A telep át- 50 látszó. A felület világosbarna (2 ea), a fonák oldal világos elefántcsont színű (2 ca). Légmicélium : nem képződik. Oldható pigment: nem képződik. (ii) Glükóz-aszparagin agar tenyészet 55 Növekedés nem figyelhető meg. (iii) Glicerin-aszparagin agar tenyészet Növekedés nem figyelhető meg. (iv) Szervetlen só-keményítő agar tenyészet: Növekedés: nagyon gyenge. Gyenge növekedés 50 figyelhető meg 30 napos tenyésztés után. A felület világos sárgás-barna (3 gc) és a fonák oldal sárgásbarna (3 ie). Légmicélium: nem képződik. Oldható pigment : nem képződik. 65 (v) Tirozin agar tenyészet Növekedés : nagyon gyenge. A felület világossárga (3 ca), a fonák oldal pedig világos elefántcsont színű (2 ca). Légmicélium: nem képződik. Oldható pigment: nem képződik. (vi) Tápagar tenyészet: Növekedés : nagyon gyenge. 30 nap után mind a felszín, mind a fonák oldal világos elefántcsont színű (2 ca). Légmicélium : nem képződik. Oldható pigment: nem képződik. (vii) Élesztőkivonat-malátakivonat agar tenyészet (ISP 2.) Növekedés: jó. A felület barázdált, vastagon bevont ; mind a felület, mind a fonák oldal világosbarna (2 e), olykor kékes (10 ie). Légmicélium: hosszú tenyésztési idő után olykor fehéres színű légmicélium képződik. Oldható pigment: nem képződik. (viii) Zabliszt agar tenyészet (ISP 3.): Növekedés : jó. A felület sima, mintegy festékkel bevont és indigókék színű (10 ie), a fonák oldal pedig fehér, végül indigókék (10 ne). Légmicélium : 30 nap után olykor fehér légmicélium képződik. Oldható pigment: nem képződik. (ix) Pepton-élesztőkivonat-vas agar tenyészet (ISP 6.): Növekedés nem figyelhető meg. (x) Lefölözött tej (37 °C) : Növekedés: lassú. Koaguláció és peptonizáció. (xi) Glükóz pepton zselatin tenyészet (20 °C) : Növekedés : nagyon lassú. Elfolyósítás figyelhető meg. (IV.) Fiziológiai jellemzők (i) Optimális növekedési hőmérséklet: 27-37 °C, előnyösen 33-37 C\ (ii) Zselatin folyósítás : igen. (iii) Keményítő hidrolízis: nem. (iv) Lefölözött tej : koaguláció, enyhe peptonizáció. (v) Melamin-szerű pigment termelése: nem. (vi) Savállóság: saválló. (V.) Különböző szénforrások hasznosítása : Az Sp. 76—11-et különböző cukrokat tartalmazó Pridham-Gottlieb agaron (ISP 9.) tenyésztettük, de növekedés nem volt megfigyelhető. Ezért ehelyett a fent leírt táptalajt alkalmaztuk, 0,1 % élesztőkivonat hozzáadása mellett. A kapott eredmények a következők: L-arabinóz + + + D-xilóz + + + D-glükóz D-fruktóz + + + + + + szacharóz + + + 1-inozit + + L-ramnóz + + + raffinóz + + mannit + + + + kontroll ± (cukor nélkül) Jelölés: + + + + nagyon jó növekedés + + + jó növekedés + + növekedés ± kontroll 3
