190787. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új 9-(szubsztituált 4-hidroxi-butil)-guanin-származékok előállítására
1 190 787 2 III. Állatkísérletek A) Nyúlon végzett kísérletek azt mutatták, hogy a VIS 707-t tartalmazó 30. példa szerinti, helyi alkalmazásra előállított készítmény a herpes keratitis fertőzést gyógyítja. Az Alenius és munkatársai által (Acta Ophthalmologica 1980, 58,167-73) leírt módszert alkalmaztuk. A kezelést a fertőzés után 3 nappal kezdtük és 5 napig folytattuk. Minden kezelést naponta négyszer végeztünk. Az eredmények a 4. táblázatban láthatók, ahol 0 a normális szaruhártyát és a 3 kiterjedt szaruhártya fekélyesedést jelent. 4. táblázat 3% VIS 707-t tartalmazó kenőcs hatása nyúlon lévő felületi keratitisre Nap: 3 5 7 10 12 a keratitis súlyossága 3% VIS 707-t tártál- 1,0 mazó kenőcs 0,75 0 0 0 Placebo kenőcs 0,6 1,6 2,5 0,4 0,6 B) Tengerimalacon, cutan herpessel végzett kísérletek azt mutatták, hogy a VIS 707 a 30. példa szerinti helyi alkalmazásra előállított készítmény formájában gyógyító hatást fejt ki. Az Alenius és munkatársai által (Archives of Virology 1978, 58, 277-88) leírt módszert alkalmaztuk. A kezelést a fertőzés után 24 órával kezdtük és 4 napig folytattuk. Minden kezelést naponta négyszer végeztünk. Az eredmények az 5. táblázatban láthatók. 5. táblázat A VIS 707 hatása a gyógyulás idejére és összegzett gyógyulás A gyógyulási idő Összegzett Kezelés napokban gyógyulás átlag S.D. átlag S.D. 5% VIS 707-t tartalmazó ke6,6 1,8 9,0 '4,1 nőcs Placebo kenőcs 9,8 1,5 19,8 4,4 C) Szisztémás HSV-2 fertőzéssel egéren végzett kísérletek szerint az orálisan adagolt VIS 707 gyógyhatású. Az Olsen és munkatársai által (The Journal of Infections Diseases 1978, 426-436) leírt módszert alkalmaztuk. A kezelést a fertőzés után 1 órával kezdtük és 10 napig folytattuk. Az egereknek naponta per os adagoltunk 75 mg/kg VIS 707-t vagy foszfát pufferes nátriumklorid placebót. Az eredmények a 6. táblázatban láthatók. A VIS 707 csökkentette a halálozások számát és a halál bekövetkeztéig eltelt napok átlagát. 6. táblázat Elpusztult állatok A halál bekövet-Kezelés száma/ % vizsgált állatok száma keztéig eltelt napok átlaga VIS 707 3/10 30 13,7 Placebo 10/10 100 9,3 Az állatkísérletek azt mutatták, hogy a VIS 707 a herpes keratitis, a cutan herpes fertőzések és szisztémás herpes fertőzések kezelésekor gyógyhatást fejt ki, mint az a 4., 5. és 6. táblázatokban látható. A vizsgálatot az R( + )-9-(3,4-dihidroxi-butil)guaninnal (a továbbiakban R-VIS 707) is elvégeztük placebóval és az ismert 9-(2-hidroxi-etoximetil)-guaninnal (aciklovir) hatásával összehasonlítva. 15±0,9 g-os nőstény NMRI egereket i.p. megfertőztünk 104 PFU 2-típusú herpes simplex vírussal. 10-10 állatból álló 5 csoportot alakítottunk ki. Két csoport R-VIS 707-et és két csoport aciklovirt kapott. Mindkét vegyület adagja 15 mg/kg testsúly volt. A kezelést a fertőzés után 1 órával kezdtük és a hatóanyagokat 10 napig naponta kétszer perorálisan adtuk be. A kezeletlen csoport placebót kapott. Az R-VIS 707-tel kezelt csoportban a mortalitás 30%-os volt, az aciklovirral kezelt csoport mortalitása viszont 70%-os. Az eredményeket a következő táblázatban ismertetjük. 7. táblázat Vizsgált vegyület y 8 9 %-os mortalitás, a fertőzés után 10 11 13 14 17 nappal placebo 20 50 90 90 aciklovir (ismert) 10 20 40 40 70 70 (R)-VIS 707 10 10 20 20 30 30 Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás az I általános képletű 9-(szubsztituált 4-hidroxi-butil)-guanin-származékok és gyógyászatilag elfogadható sóik, valamint optikai izomerjeik előállítására - a képletben R! és R2 egymástól függetlenül hidrogén- vagy fluoratomot vagy hidroxilcsoportot jelent azzal a megkötéssel, hogy R, vagy R2 hidrogénatom, ha R! és R2 különböző és Rj és R2 fluoratom vagy hidroxilcsoport, ha Rj és R2 azonos - azzal jellemezve, hogy a) egy II általános képletű vegyületet - a képletben Rj és R2 jelentése a fenti és R1 hidrogénatom vagy észterképző csoport, előnyösen 1—4 szénatomos alkilcsoport - redukálunk vagy b) egy IV általános képletű vegyületet - a képletben Y hidroxilcsoport vagy kilépőcsoport, így klór-, bróm- vagy jódatom, —SH, —OR2, —SR2 vagy —S02R2 csoport, amelyekben R2 1-8 szénatomos alkilcsoport, fluorozott 1-8 szénatomos alkilcso-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 12
