190730. lajstromszámú szabadalom • Eljárás spergualinszármazékok és ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 190 730 2 kapott csoport testsúlyváltozása és a kontroll csoport testsúlyváltozása közötti különbséggel fejeztük ki. A kontroll csoport fiziológiás sóoldatot kapott, és nem ültettünk be sejteket. (2) Teszt eredmények A 6. táblázatban összefoglaltuk a találmány szerinti vegyületek toxicitására és egér laukémia L1210 esetén az élet-meghosszabbító hatására vonatkozó vizsgálataink eredményeit. Az élet-meghosszabbító hatást T/C értékekben, és a toxicitást a testsúly változás értékeiben fejeztük ki. 6 táblázat A találmány szerinti vegyületek toxicitása és élet-meghosszabbító hatása egér-leukémia L1210 esetén Vegyület Dózis T/C (%) Testsúlyvál(Példa száma) (mg/kg/nap) tozás (g) Kontroll 0,00 100 1,8 50,00 12,9 — 25,00 >279-1,6 12,50 >528 +0,2 1. 6,25 >769 +0,9 3,13 >667 +0,8 1,56 >388 + 1,0 0,78 >250 +2,7 0,39 126 + 1,8 50,00 2,8 — 25,00 100 — 12,50 >621-0,2 2. 6.25 >705 1,0 3,13 >769 +0,6 1,56 >769 + 1,3 0,78 >346 + 1,5 0,39 124 +2,7 50,00 >342 +0,2 25,00 >524 + U 12,50 >700 +0,8 Spergualin 6,25 >769 +0,9 3,13 >665 + 1,2 1,56 >224 +2,5 0,78 129 +0,8 Amint a fenti kísérleti példákból látható, a találmány szerinti vegyületek jó biológiai aktivitással, nagy stabilitással rendelkeznek, és alkalmasnak látszanak daganatellenes gyógyszerekként. Az (I) általános képlett! vegyületek közül jobb aktivitásértékei következtében előnyösek azok, amelyekben m értéke 4, 5 vagy 6, Rí jelentése hidrogénatom vagy hidroxilcsoport és az R2 aminocsoportmaradék glicil, szeril, /3-alanil, -^amino-butanoil vagy fenilalanil. A találmány szerinti eljárást a következő példákkal szemléltetjük közelebbről. A példákban említett Rf értéket vékony rétegkromatográfiásan (TLC) határoztuk meg, ahol F254 jelű szilikagél lemezre (0,25 mm vastag, Merck gyártmány) vittük fel a találmány szerinti vegyületek oldatát a kezdőpontra, és a kifejleztő oldattal 8 cmig futtattuk, majd a kezdőponttól a folt közepéig mért távolságot osztottuk a kezdőpont és a kifejlesztő zóna vége közötti távolsággal. A detektálást UV fény (2537 Á), ninhidrin és Sakaguchi-reagens (Houben-Weyl, methoden der organischen Chemie, 4. kiadás 15/2. kötet 480. oldal) használatával végeztük. 1. példa 10-[N-(7-guanidino-heptanoil)-glicil]-l,5,10-triazadekán-trihidroklorid 20,8 g (kb. 24 mól) 10-[N-(7-guanidino-heptanoil)-glicil]-l,5-dibenzil-oxi-karbonil-l,5,10-triazadekán-hidrokloridot, amely olajos anyag, feloldottunk 300 ml metanol és 10 ml ecetsav elegyében. 0,50 g 5% Pd-tartalmú szénhordozós palládiumot adtunk az oldathoz, és az elegyet 3 óra hosszat katalitikusán redukáltuk szobahőmérsékleten és atmoszférikus nyomáson. A reakció után a katalizátort kiszűrjük az oldatból, a szűrletet csökkentett nyomáson bepároltuk, és így 19,5 g olajos anyagot kaptunk. Az olajos anyagot feloldottuk 70 ml desztillált vízben, és az oldatot átengedtük egy 1500 ml-es CMSephadex C-25 )Na+) oszlopon. Gradiens-eluálást végeztünk 7500 ml desztillált víz és 7500 ml 1 mól/1 koncentrációjú nátrium-klorid oldat között. Az aktív frakciókat összegyűjtöttük, és szárazra pároltuk csökkentett nyomáson. A maradékhoz metanolt adtunk, és az oldhatatlan nátrium-kloridot leszűrtük. Ezt a tisztítási lépést mégegyszer megismételtük. A kis mennyiségű maradék nátrium-klorid eltávolítása céljából a kapott olajos anyagot 50 ml metanolban oldottuk, és az oldatot egy 400 ml-es Sephadex LH-20 oszlopon engedtük át. Az oszlopot metanollal eluáltuk, és az aktív frakciókat összegyűjtöttük, majd csökkentett nyomáson bepároltuk, és 5,30 g olajos anyagot kaptunk. Az olajos anyagot feloldottuk 20 ml desztillált vízben, és az oldhatatlan maradékot leszűrtük. A szűrletet fagyasztva megszárítottuk, és 5,20 g terméket kaptunk. Kitermelés: 45,1%. Fizikai adatok: Op: 163-165 °C NMR (DMSO-d6): Ô = 0,9-1,8 (b, 12H), 18-2,4 (b, 4H) 2,6-3,3 (b, 10H), 3,63 (d, 2H, J = 5 Hz) 6,9-9,2 (b, 12H) IR(KBr): 3410, 3310, 3150, 2930, 1640, 1520, 1470, 1410, 1160, 965 TLC (n-propanol):piridin:víz:ecetsav = 6:4:3:2 térf.) Rf = 0,4 MS (FD): m/z 372 (M+l) 2. példa 10-(N-(7-guanidino-heptanoil)-L-szeril]-l,5,10-triazadekán-trihidroklorid 2,50 g (3,14 mmól) 10-[N-(7-guanidino-heptanoil)-0- -benzil-L-szeril]l,5-dibenzil-oxi-karbonil-l,5,10-triazadekán-hidrokloridot feloldottunk 30 ml metanol és 1 ml ecetsav elegyében. 0,1 g 5% Pd-tartalmú szénhordozós palládiumot adtunk az elegyhez, és az elegyet 5 óra hoszszat katalitikusán redukáltuk atmoszférikus nyomáson 50 °C-on. A reakció után a katalizátort leszűrjük, és a szűrletet csökkentett nyomáson betöményítettük, és 1,7 g olajos anyagot kaptunk. Az olajos anyagot feloldottuk 6 ml desztillált vízben, és az oldatot kromatografáltuk egy 300 ml-es CM-Sephadex C-25 (Na+) oszlopon. Az oszlopot gradiens eluálás-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 14
