190643. lajstromszámú szabadalom • Eljárás N-[N'-(2-klór-etil)- N'-nitrozo-karbamoil]-oligo-peptidészterek és -amidok előállítására
2 190643 3 A találmány tárgya eljárás új N-[N’-(2- -klór-etil)-N’-nitrozo-karbamoil)-oligopeptidészterek 6b -araidok előállítására. Az utóbbi években az alkilezószerek között új vegyületek jelentek meg a rák kemoterápiájában, 5 nevezetesen a nitrozo-karbamid-azármazékok, például az l,3-bisz(2-klór-etil)-l-nitrozo-karbamid (BCNU), l-(2-klór-etil)-3-ciklohexil-l-nitrozo-karbamid (CCNU) és l-(2-klór-etil)-3- ( 4-metil-ciklohexil) -1 -ni trozo-kar bamid 10 (MeCCNU) [Proceeding of the 7th new drug seminar on the nitrosoureas, (Washington, D.C., Dec. 15-16, 1975) Cancer Treat. Rep., 60, 645-811 (1976)). A jobb terápiás indexű vegyületek előállítása céljából az utóbbi 15 időkben egy sor új, különböző csoportokkal, (gy cukor-származékokkal szubsztituált nitrozo-karbamid-származékot szintetizáltak és próbáltak ki [Anderson et al., Cancer Res. 35, 761 (1976), Hayat et. al., Cancer Cheme- 20 ther. Pharmacol. 3, 217 (1979)) Olyan III általános képletű oligopeptidésztert, illetve-amidot állítottunk elő, amelynek aminocsoportján egy N-(2-klór-etil)-N-nitrozo-karbamoil-csoport van. A III 25 általános képletű N-[N’-(2-klór-etil)-N’-nitrozo-karbamoill-oligopeptidészterek és - amidok előállításéhoz kiindulási vegyietekként szolgálnak az N-[N’-(2-klór-etil)-N’-nitrozo-karbamoil]-aminosavak vagy -oligo- 30 peptidek, amelyek célszerűen N-(2-klór-elil)-N-nitrozo-karbamoil-azidnak aminosavakkal ill. oligopeptidekkel való reakciójával állíthatók elő. Az ismert kondenzálószer, így a diciklohexil-karbodiimid (DCC) hatására alakul- 35 nak át amidokká az előbb említett N-[N’-(2- -klór-etil)-N’-nitrozo-karbamoil)-arainosavak, illetve -oligopeptidek úgy, hogy egy másik aminosav, illetve egy másik oligopeptid észterével vagy amidjéval peptidkötést létesite- 40 nek. A reakciót az [A] reakcióvázlat mutatja be. A képletekben Rí jelentése hidrogénatom, metil-, izopro-—pil—, 1 -metil- n-propil- 2-metil-tio-etil- 45 vagy benzilcsoport, R» jelentése hidroxilcsoport vagy -NH-CHj-COOH csoport, Ra jelentése hidrogénatom, metil-, izopropü-> 2-metil-n-propil-, 2-metil-tio-etilvagy benzilcsoport és R. jelentése metoxi- vagy aminocsoport vagy olyan Gly-, Tyr-, Gly-Phe-, Leu-Met- vagy Gly-Leu-csoport, amely terminális aminocsoportján keresztül peptidkótéssel kapcsolódik és véghelyzetű karboxilcsoportja amid alakjában van és az összes aminosav L-konfigurációjú. A III általános képletű N-[N'-(2-klór-etil)-N’-nitrozo-karbamoil)-oligopeptid-8zármazékok leukémia ellenes hatását és toxieitését vizsgáltuk. A vegyieteket 10* L 5222 leukémiás sejttel fertőzött patkányoknak a fertőzés utáni 6. napon egyszeri í.p. adagban adtuk be. Jelentős antileukémiás hatást, valamint igen kismértékű toxieitást tapasztaltunk a CNC-aminosav-amidokhoz képest. A CNC-glicinamid toxieitása (LDso) 20 mg/kg. Az eredményeket a kővetkező táblázatban ismertetjük. Vegyület max. ILS1 Toxicités2 CNC-glicil-glicin--metilészter 219% 44,2 CNC- glicil-glicin-amid 275% 44,2 CNC-alanil-alanin-amid 306% 44,2 1) A túlélési idő maximális növekedése százalékban; 2) Az első adag (mg/kg), amely kifejezetten letális toxieitású. Ez az adag nem azonos az LDso-nel, amely lényegesen nagyobb, így a CNC-glicin-amid legalább háromszor toxikusabb, mint a vizsgált oligope p tid - s zá rmazé kok. A következő táblázat néhány további III általános képletű vegyülettel L 1210 leukémiával fertőzött egéren végzett vizsgálat eredményeit mutatja be. Példa Optimális adag Gyógyulás Első toxikus adag 10. 100-200 praol/kg > 50% 400 pmol/kg 11. 100 pmol/kg > 50% 400 pmol/kg 12. 200 pmol/kg > 50% 800 pmol/kg 13. 100 pmol/kg > 50% 400 pmol/kg 15. 400 pmol/kg > 50% 800 pmol/kg A találmány szerinti vegyületek leukémia-ellenes hatását és loxicitását az előző vizsgálatban ismertetett módon L 1210 típusú egérleukémián és L 5222 típusú patkányleukémián is vizsgáltuk. 10* sejttel való fertőzés utáni 6. napon logaritmikusán növekvő mennyiségben i.p. egyszeri adagban adtuk be a hatóanyagot. A vegyületek hatását a I-V CNC-aminosav-Bzármazékokkal hasonlítottuk össze és a kapott eredményeket a következő táblázatban ismertetjük. Vegyület L 1210*1 L 5222*1 Toxici tás2> (mg/kg I CNC-Gly-Gly + + n.v. II CNC-Ala-Ala ++ + n.v. III CNC-Gly-Leu ++ n.v. n.v. 3
