190632. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a sejtlégzést serkentő hatóanyagok előállítására borjúvérből
G íjüG.C 7 szűrlel szárazanyagtartalmát a következő lépés, azaz az elektrodialízis szempontjából alkalmas értékre, például 180-230 mg/ml értékre koncentráljuk. A bepárlás során a konzerváló szer kicsapódik, előnyösen szűréssel távolltjuk el. Az oldalban esetleg még jelen lévő konzerválószer nyomok eltávolítása céljából az oldat pH-érlékét kis mennyiségű sósav hozzáadásával 5 körüli értékre állíthatjuk, és az így kicsapódó konzerválószert szintén kiszűrjük. A betöményitést szolgáló deszlillálást előnyösen alkalmas vákuumbepárlóbnn végezzük. A fenti betöményltéB során kapott koncenlrálumot a benne lévő szervetlen sók részleges eltávolítása, valamint izotónikus, illetve gyengén hipertónikus, 250-550 milliozmól ozmolaritású, 40-75 mS/cm vezetőképességű, 20 °C-on 1,05-1,08 g/ml sűrűségű oldat előállítása céljából az eljárás második lépcsőjében mintegy 300 dalion mólsúlyig, előnyösen mintegy 200 dalton mólsúlyig áteresztő, felváltva elrendezeti anionos és kationos cseremembránok segítségével elektrodializáljuk. Az elektrodializishez alkalmazható membránok a 300 mólsúlyú, előnyösen a 400 mólsúlyú szervetlen és szerves ionokat még átengedik, oligopeptideket és nagyobb molekulákat azonban még nem. Az ilyen membránok alkalmazása mellett a hatóanyagok mólsúlyának alsó határa 300, olónyösen mintegy 400 dalion értékkel adódik. Az eleklrodialízist a szervetlen sók vizes koncentrátumokból való eltávolítása során szokásos körülmények között folytathatjuk le, így például a szabad membrán keresztmetszetre vonatkoztatott áramsürűség 5-70 mA/cinJ, előnyösen 20-50 mA/cm2, a membránonként! egyenáramú feszültség 0,2-2 V, előnyösen 0,5-1 V, és a hőmérséklet 5-30 ®C. Az elektrodializishez szokásos eleklrodializáló berendezéseket alkalmazhatunk; ezek egy cellában csomagszerűen és felváltva elrendezett kationos és anionos, a kívánt mértékben áteresztő cseremembránokból állnak. A példában a 2. ábrán feltüntetett berendezést használjuk, amelybe a Berghof GmbH, Tübingen, NSZK-beli cég BEI,2-típusjelű terméke. A berendezés membránjai mintegy 400 mólsúlyig áteresztőek. Az elektrodializáló berendezés cellájának pontos leírását a 2 946 284 sz. NSZK-beli közrebocsátási iratban közük. A találmány szerinti eljárás során termékként a sejtlégzést serkentő hatóanyagokat tartalmazó oldat keletkezik, amely a kívánt alkalmazási formától függően vagy közvetlenül alkalmazható gyógyászati célokra, vagy adott esetben pirogénmentes vízzel hígítható vagy szükség esetén tovább töményíthető. A megfelelő készítmény-formák például aeroszol, kenőcsök, krémek vagy gelék lehetnek. Az ilyen készítmények sejtlégzésfokozó hatása - mint ahogy azt mér említettük - lényegében az 1 076 888 sz. NSZK-beli szabadalmi leírásban ismerteteti hatóanyagokéhoz hasonló. Ennek alapján a gyógyszerkészítmények főleg gyógyulási folyamatok befolyásolására és gyorsítására alkalmazhatók. A mindenkori dózis az alkalmazás módjától és a kezelendő állapot súlyosságától függ. A találmány szerint előállított készítménnyel való kezelésre alkalmasak például az égési sebek, fekélyek és felfekvési sebek. A hatóanyagot intravénásán, intramuszkulárisan, de inf.raarteriélisan is a szervezetbe juttathatjuk, nyitott seb esetén a helyi kezelés is lehetséges. A humán fekélyek kezelésére például az elején napi 200-800 mg hatóanyag szükséges vénába vagy ütőérbe adva, ezt követi az azonos beadási módon és 80-200 mg napi dózissal folytatott utókezelés. A hatóanyag ilyen jellegű, valamint egyéb alkalmazási lehetőségével kapcsolatban cégünk gyártmányismertetőjére („Solcoseryl reaktiviert den gestörten Energiestoffwechsel der Zelle, regeneriert das Gewebe”, Solco Base’ AG, Birsfelden, Svájc, publikálási sorszám: SS-CH(d-6.81) utalunk. A találmány szerinti eljárás sikeres alkalmazásának feltétele, hogy főleg az ultraszűrés és különösen az elektrodialízis során a borjúvérből nyert sűrítmény biológiai aktivitása nem károsodhat, hanem teljes mértékben megmarad. A találmány szerinti eljárás ilyen módon olyan vérextraktumhoz vezet, amely az 1 076 888 sz. NSZK-beli szabadalmi leírás szerint kapott termékkel egyenértékű, vagy annál jobb. Az ullraszűrés során a biológiai aktivitás lehetséges csökkenésének veszélye csekély, ugyanis az eljárás ezen lépésében csupán a proteineket és a nagyobb mólsúlyú anyagokat választjuk el, a biológiai aktivitás fő hordozói azonban - vizsgálataink szerint - a kinyerhető hatóanyagok mólsúlyának alsó tartományában helyezkednek el. Emellett abból lehet kiindulni, hogy lényegében az ultraszűrés sem fejt ki más befolyást a vér exlraktumra, mint az 1 076 888 sz. NSZK-beli szabadalmi leírásban ismertetett egyszerű dialízis. Ezért a biológiai aktivitásnak a találmány szerinti ullraszűrés okozta esetleges csökkenésének összehasonlító vizsgálatát nem tartottuk szükségesnek. Az ultraszűrést követő betöményítés szintén olyan körülmények között zajlik le, amelyek nem járhatnak a vér extraktum biológiai aktivitásának csökkenésével. Tehát ezen lépéssel kapcsolatban sincs szükség összehasonlító vizsgálatokra. A hatóanyag-koncentrátumban meglévő ezervellen sók elektrodialízis útján végzett eltávolítása azonban lehet kihalással a vér extraktum biológiai aktivitására, csökkentheti azt. Egyrészt viszonylag nagy mennyiségű sót kell elválasztani, másrészt az elválasztandó sók mólsúlya viszonylag közel van a ta5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
