190083. lajstromszámú szabadalom • Eljárás karbapenem-vázat tartalmazó antibiotikumok előállítására
46 190083 és 135 ml viz elegyével, majd 50 ml acetonitril és 50 ml víz elegyével eluáljuk. A megfelelő frakciókat egyesítjük, az acetonitrilt csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, majd a maradék vizes oldatot fagyasztva szárítjuk. Ily módon sárgás, porszerü anyagot kapunk. Az 'H-NMR-spektrum szerint ez a termék cím szerinti vegyület, és 3-[2-(piridinium-l-il)-etilmerkaptoj-6oc-ll-(R)-hidroxi-etil]-7-oxo-l-azabiciklo(3.2.0)hept-2-én-2-karbonsav-(p-nitro-benzil)-észter-difenil-foszfát 2 : 1 arányú keveréke. Ezt a terméket feloldjuk a lehető legkisebb mennyiségű vízben, és átfolyatjuk egy 1,5 x 21 cm méretű, klorid-fázisú Permutit S-l jelzésű anioncserélő gyantával töltött oszlopon, az oszlopot vízzel eluáljuk. A megfelelő frakciókat fagyasztva szárítva 1,8 g (hozam: 20%) cím szerinti vegyületet kapunk. g) lépés 3-[2-(Piridinium~l-il)-etilmerkaptoJ-6cc-[l-(R)-hidroxi-etil]-7~oxo~l~azabiciklo(3.2.0)hept-2-én-2-karbonsav-(p-nitro-benzil)-észter-difenil-foszfát ( R- reakcióvázlat ) 0,174 g (0,50 mmól) 6cc-[l-(R)-hidroxi-etil]-3,7-dioxo-l-azabiciklo(3.2.0)-heptán-2- -karbonsav-(p-nitro-benzil)-észter 2 ml acetonitrillel készült oldatát nitrogén atmoszférában 0 °G hőmérsékletre hütjük, majd hozzáadunk először 0,105 ml (0,60 mmól) diizopropil-etil-amint, majd 0,124 ml (0,60 mmól) difenil-klór-foszfátot. Az elegyet félórán át 0 °C hőmérsékleten keverjük, majd hozzáadjuk először 0,170 g (0,72 mmól) l-(2-merkapto-etil)-piridinium-metán-szulfonát 0,6 ml acetonitrillel készült oldatát, majd 0,105 ml (0,60 mmól) diizopropil-etil-amint. A reakcióelegyet negyedórán át 0 °C hőmérsékleten keverjük, utána 7 ml 0 °C-ra hűtött vízzel hígítjuk, és a hígított oldatot felvisszük egy 1,5 x 6,4 cm méretű, CiB-Mikrobondapak fordított fázisú szilikagéllel töltött oszlopra. Az oszlopot növekvő %-ban acetonitrilt tartalmazó vízzel eluáljuk, az acetonitril kezdeti mennyisége 25%, és az elúció befejezésekor az. acetonitril mennyisége 50%. A megfelelő frakciókat egyesítjük, az acetonitrilt csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, és a maradék vizes oldatot fagyasztva szárítjuk. Ily módon sárgás, porszerű anyag formájában 0,33 g (hozam: 92%) terméket kapunk. IR-spektrum (KBr), nü«u«: 3600-3000 (OH), 1765 (béta-laktám karbonil, 1690 (p-nitro-benzil-észter-karbonil), 1625 (piridinium), 1585 (fenil), 1510 (nitro), 1330 (nitro), 885 cm-1 (nitro). 1H-NMR-spektrum (DMSO-ds, delta): 1,16 (3H, d, J = 6,2 Hz, CH3CHOH), 4,87 (2H, széles t, J = 6,6 Hz, CHzS), 5,37 (AB quartett középpontja, J*.b = 14,3 Hz, p-nitrobenzil-cBoport CHz), 6,7-7,5 (fenil), 7,68 (d, J = 8,8 Hz, p-nitrobenzil-csoport orto-helyzetű hidrogénjei), 8,23 (d, J = 8,8 Hz, pnitro-benzil-csoport meta-helyzetú hidrogénjei), 8,0-8,3 (m, piridiniumcsoport meta-helyzetü hidrogénjei), 8,4-8,8 (1H, piridiniumcsoport para-helyzetü hidrogénjei) 9,09 (2H, dd, J = 6,7 Hz, J = 1,3 Hz. piridiniumcsoport orto helyzetű hidrogénjei). 47 h) lépés 3-f2-(Piridinium-l~il)-etilmerkapto]-6oc-[l-(R)-hidroxi-etil]-7-oxo-l-azabiciklo(3.2.0)hept-2-èn-2-karboxilàt A) módszer ( S-reakcióvázlat) 0,16 g (0,22 mmól) 3-[2-(piridinium-l-il)~ -etilmerkapto]-6cc-[l-(R)-hidroxi-etil]-7-oxo-l-azabiciklo(3.2.0)hept-2-én-karbonsav-(p-nitro-berizil)-èszter-difenil-foszfét 10 ml nedves Letrahidrofuránnal készült oldatéhoz hozzáadunk 10 ml dietil-étert, 16 ml 0,05 mólos, kálium-dihidrogén-foszfátot és nátrium-hidroxidot tartalmazó puffert (pH = 7,4) és 0,16 g 10%-os csontszenes palládiumot. Az elegyet 2,76 x 105 Pa nyomáson, 25 °C hőmérsékleten 1 órán át hidrogénezzük. Utána a két fázist elválasztjuk és a szerves fázist kétszer 3 ml vízzel kimossuk. A vizes részeket és mosófolyadékot egyesítjük, kétszer 10 ml dietil-éterrel mossuk, a vizes részbe beoldódott szerves oldószereket csökkentett nyomáson eltávolítjuk, és az így kezelt vizes oldatot felvisszük egy 1,5 x 6,2 cm méretű, Cw-Mikrobondapak fordított fázisú szilikagéllel töltött oszlopra. Az oszlopot vízzel eluáljuk, és a megfelelő frakciókat fagyasztva szárítjuk. Ily módon sárgás, porszerű anyag formájában 0,062 g (hozam: 84%) terméket kapunk. IR-spektrum (KBr), nüux: 3700--3000 (OH), 1755 (béta-laktém karbonil), 1630 (piridinium), 1590 cm"1 (karboxilát). íH-NMR-spektrum (D2O, delta): 1,22 (3H, d, J = 6,4 Hz, CHsCHOH), 2,92 (d, J = 9,1 Hz, H-4), 2,97 (d, J = 9,1 Hz, H-4), 3,20 (dd, J = 2,5 Hz, J = 6,1 Hz, H-6), 3,44 (t, J = 6,0 Hz, CH2S), 3,93 (dd, J = 9,1 Hz J = 2,5 Hz, H-5), 4,82 (t, J = 6,0 Hz, CH2N*), 8,04 (m, piridiniumcsoport meta-helyzetű hidrogénjei), 8,5 (m, piridiniumcsoport para-helyzetü hidrogénje), 8,82 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
