190083. lajstromszámú szabadalom • Eljárás karbapenem-vázat tartalmazó antibiotikumok előállítására
44 190083 45 elegyet 2 órán át 25 °C hőmérsékleten keverjük. Utána az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, és a maradékot 30 ml dietil-éterrel eldörzaőljük. Az így kapott szilárd anyagot kiszűrjük, majd 25 ml diklór-metánban szuszpendáljuk és 25 °C hőmérsékleten, 1,75 órán át gázalakű hidrogén-szulfiddal kezeljük. Ezután az oldatlan részeket kiszűrjük, a szűrletról az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, a maradékot vízzel hígítjuk, és felvisszük egy 1,5 x 6,0 cm méretű, Cis-Mikrobondapak fordított fázisú szilikagéllel töltött oszlopra. Az oszlopot acetonitril és víz 15 : 85 arányú elegyével eluáljuk, és a megfelelő frakciókat fagyasztva szárítjuk. Ily módon színtelen, sűrű szirup formájában 0,179 g (hozam: 76%) terméket kapunk. E termék analitikai adatai azonosak az A) módszer szerint előállított termék adataival. e) lépés l-(2-Merkapto-etil)-piridinium-klorid A) módszer ( O-reakcióvázlat ) 9,4 g (0,04 mól) nyers l-(2-merkapto-etil)-piridinium-metán-szulfonát vizes oldatát felvisszük egy 2,5 x 41 cm méretű, klorid-fázisú Permutit S-l jelzésű anioncseréló gyantával töltött oszlopra, az oszlopot 0,5 ml/perc sebességgel vízzel eluáljuk, és a megfelelő frakciókat egyesítve, fagyasztva szárítjuk. Ily módon sárgásszlnü szirup formájában 7,0 g (hozam: 100%) terméket kapunk, amelyet további tisztítás nélkül, közvetlenül felhasználunk a következő reakciólépéshez. ^-NMR-spektrum (DzO, delta): 3,22 (2H, m), (CHzS), 4,88 (m, CHzN*), 8,18 (2H, m, a piridiniumcsoport meta-helyzetü hidrogénjei), 8,7 (1H, m, a piridiniumcsoport para-helyzetű hidrogénje), 9,0 ppm (2H, m, a piridiniumcsoport orto-helyzetű hidrogénjei). B) módszer (P-reakcióvázlat) 5,6 ml (70 mmól) pirídinhez jeges fürdőben hozzáadunk 4,05 g (35 mmól) piridin-hidrokloridot, és 2,1 ml (35 mmól) etilén-szulfidot. A reakcióelegyet 75 percig 65 °C hőmérsékleten keverjük. így kétfázisú elegy keletkezik. Az alsó fázist leválasztjuk, 5 x 10 ml dietil-éterrel mossuk, majd nagymértékben csökkentett nyomáson megszárítjuk. Ily módon 90-100%-os hozammal kapjuk a cim szerinti vegyületet, amelyet további tisztítás nélkül, közvetlenül felhasználunk a következő reakciólépéshez. f) lépés 3-(2-(Piridinium-l-il)-etilmerkapto]-6ac-11-(R)-hidroxi-etilJ- 7-oxo-l-aza biciklo( 3.2.0)hept-2-én~2-kar bonsav-( p-nilro-benzilj-észter-klorid (Q-reakcióvázlat) 6,09 g (17,5 mmól) 6oc-ll-(R)-hidroxi—etil]—3,7-dioxo-l-azabiciklo(3.2.0) hept- 2-én-2-karbonsav-(p-nitro-benzil)-észter 20 ml acetonitrillel készült oldatét nitrogén atmoszférában +5 °C hőmérsékletre hűtjük és hozzáadunk először 3,65 ml (21,0 mmól) diizopropil-etil-araint, majd 4,34 ml (21,0 mmól) difenil-klór-foszfátot. Az elegyet félórán át 5 °C hőmérsékleten keverjük, majd -5 °C hőmérsékletre hűtve hozzáadjuk 4,3 g (24 mmól) nyers l-(2-merkapto-etil)-piridinium-klorid 1,0 ml N,N-dimetil-formamiddal készült oldatát, majd hozzácsepegtetünk 3,65 ml (21,0 mmól) diizopropil-etil-amint. A reakcióelegyet 1 órán ét 0 °C hőmérsékleten keverjük, majd -30 °C-ra hűtve további negyedórán át keverjük. A kivált szilárd anyagot kiszűrjük és -30 °C hőmérsékletre hütött acetonitrillel mossuk. Ily módon 5,77 g (hozam: 65%) terméket kapunk. IR-spektrum (nujol), nÜMx: 3300 (OH), 1775 (béta-laktám-karbonil), 1690 (p-nitro-benzil-észter karbonil), 1630 (piridinium), 1605 (p-nitrobenzil-észter fenilcsoportja), 1515 (NOz), 1335 -1 (NOz). Hl-NMR-spektrum (DMSO-ds, delta): 1,17 (3H, d, J = 6,1 Hz, CHsCHOH), 3,2-3,75 (5H, H-4, H-6, CH2S), 3,75-4,5 (2H, H-5, CHaCHOH), 4,92 (2H, széles t, J = 6,5 Hz, CHzN*)* 5,18 (1H, d, J = 4,9 Hz, OH), 5,37 (AB quartett középpontja, Ja.b = = 14,2 Hz, p-nitro-benzil-csoport CH2), 7,69 (2H, d, J = 8,7 Hz, p-nitro-benzil-csoport orto-helyzetü hidrogénjei), 8,24 (d, J = 8,7 Hz, p-nitro-benzil-csoport méta-helyzetű hidrogénjei), 8,0-8,4 (411, p-nitro-benzil-csoport és a piridiniumcsoport meta-helyzetü hidrogénjei), 8,66 (1H, m, a piridiniumcsoport parahelyzetű hidrogénje), 9,17 (2H, széles d, J = 5,5 Hz, a piridiniumc6oport orto-helyzetű hidrogénjei). A szűrletet és a mosófolyadékot egyesítjük, és 150 ml dietil-éterrel hígítjuk. A felülúszó folyadékot elöntjük, és a maradék mézgaszerü anyagot feloldjuk 40 ml vízben, arae'y annyi acetonitrilt tartalmaz, hogy az oldatlan részek oldódjanak. Ezt az oldatot felvisszük egy 3 x 10 cm méretű, Cis-Mikrobondapak fordított fázisú szilikagéllel töltött oszlopra. Az oszlopot először 15 ml acetonitril 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
