189916. lajstromszámú szabadalom • Eljárás helyettesített-1-etil-1,4-dihidro-4-oxo-kinolin-3-karbonsavak és 1-etil-1,4-dihidro-4-oxo-1,8-naftiridin-3-karbonsavak 7-(1-pirrolil)-származékainak és ilyen vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítményeknek az előállítására
7 189916 8 J=6,lHz, 1H), 8,10 <d, J=U,4Hz, 1H), 8,92 (s, IH) és 14,65 (s, 1H). IR (KBR): 1620 és 1720 cm“. 3. példa l-Etil-l,4-dihidro-4-oxo-7-(l-pirrolil)l,8-naftiridin-3-karbonsav (4. lépés) 4,6 g, a 3 149 104 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásból ismert l-etil-l,4-dihidro-4-oxo-7-amino-l,8-naftiridin-3-karbonsav és 2,7 g 2,5-diraetoxi-tetrahídrofurán 70 ml jégecettel készült oldatát visszafolyató hűtő alkalmazásával 30 percen át forraljuk, majd lehűlni hagyjuk és ezután 8 órán ál 5 °C-on tároljuk. A kivált csapadékot kiszűrjük, majd acetonitrilből átkristályosítjuk. így 4,3 g mennyiségben 230-232 °C olvadáspontú tűkristályok alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk. Spektroszkópiai adatok ‘H-NMR (delta, ds-DMSO): 1,47 (t, 3H), 4,57 (q, 2H), 6,30 (m, 2H), 7,70 (m, 2H), 7,80 (d, J=8,4 Hz, 1H), 8,53 (d, J=8,4 Hz, 1H), 8,95 (s, 1H) és 14,62 (s, 1H). IR (KBr): 1625 és 1720 cm“. 4. példa l-Etil-l,4-dihidro-4-oxo-6-fluor-7-(l-pirrolil)-l,8-naftiridin-3-karbonsav (4. lépés) Kiindulási anyagként 299-303 ®C-on bomlás közben olvadó l-etil-l,4-dihidro-4- -oxo-6-fluor-7-amino-l,8-naftiridin-3-karbonsavat használunk, amelynek spektroszkópiai adatai a kővetkezők: ‘H-NMR (delta, CFaCOOH): 1,70 (t, 3H), 4,83 (q, 2H), 8,10 (d, J=9,4 Hz, 1H) és 9,11 (s, 1H). IR (KBr): 1650, 1720, 3320 és 3425 cm“. Ebből a vegyületből 1,4 g-ot ecetsav és dimetil-formamid 1:1 térfogatarányú elegyéből 20 ml-ben szuszpendálunk, majd a szuszpenzióhoz 0,8 g 2,3-dimetoxi-tetrahidrofuránt adunk. A reakcióelegyet ezután visszafolyató hűtő alkalmazásával 10 percen át forraljuk, majd lehűlni hagyjuk és 5 ®C-on tartjuk 8 órán át. A kivált csapadékot kiszűrjük, majd acetonból átkristályosítjuk. így 0,95 g mennyiségben 257-259 °C olvadáspontú tűkristályok alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk. Spektroszkópiai adatok ‘H-MNR (delta, CFaCOOH): 1,67 (t, 3H), 4,88 (q, 2H), 6,36 (ra, 2H), 7,68 (m, 2H), 8,40 (d, J=U Hz, 1H) és 9,23 (s, 1H). IR (KBr): 1625 és 1725 cm“. A kiindulási vegyületet a következőképpen állítjuk elő. 1 g, például a 0 027 752 számú európai közrebocsátási iratból ismert l-etil-l,4-dihidro-4-oxo-6-fluor-7-klór-l,8-naftiridin-3-karbonsavat összekeverünk 25 ml olyan tömény ammónium-hidroxid-oldattal, amely 20 térfogata elanolt tartalmaz. Az így kapott elegyet lezárt csőben 4 órán át 120-125 °C-on tartjuk, majd lehűtjük és addig adunk hozzá ecetsavat, míg pH-ja gyengén savassá válik. Az ekkor kivált csapadékot kiszűrjük, majd vízzel mossuk és szárítjuk. így 0,8 g menynyiségben 299-303 ®C olvadáspontú 1-etil-l,4-dihidro-4-oxo-6-fluor-7-amino-l,8-nafliridin-3-karbonsavat kapunk. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek antimikrobiális gyógyhatásút a Daquet, G. L. és ' Chabbect, Y. A. által a „Techniques en bactériologie" c. könyv 3. kötetében ( a könyv 1972-ben Párizsban a Flammarion Medecine Sciences kiadó gondozásában jelent meg), valamint a Hugo, W. B. ób Rusell, A. D. állal a „Pharmaceutical Microbiology" c. könyvben (megjelent 1977-ben Londonban a Blackwell Scientific Publications kiadó gondozásában) ismertetett módszerekkel vizsgáljuk. Táptalaj és oldószer I. számú antibiotikus táptalaj (oltóagar; az Oxoid cég CM 327 jelzésű terméke) tripton-szója folyékony táptalaj (az Oxoid cég CM 129 jelzésű terméke) Ringer-féle fiziológiás oldal 1/4 (az Oxoid cég BR 52 jelzésű terméke) dextróz-agar (BBL-11165) 0,1 N nálrium-hidroxid-oldat Mikroorganizm usok Bacillus sublilis ATCC 6633 Citrobacter freundii ATCC 11606 Enterobacter aerogenes ATCC 15038 Enterobacter cloacae CHSP 20 Escherichia coli ATCC 10536 Escherichia coli R-1513 Klebsiella pneumoniae ATCC 10031 Micrococcus flavus ATCC 10240 Proteus mirabilis ATCC 4675 Proteus morganii CHSP 16 Pseudomonas aeruginosa ATCC 25115 Pseudomonas aeruginosa ADSA 47 Salmonella typhimurium AMES 98 Salmonella typhimurium AMES 100 Sarcina Lutea 9341 Serratia marcescens ATCC 13880 Shigella flexnerii Staphylococcus aureus ATCC 5488/23 Staphylocuccus aureus ATCC 25178 Streptococcus faexalis ATCC 10541 Az oltóanyagok elkészítése Mindegyik mikroorganizmussal beoltást végzünk úgy, hogy kémcsövekben az 1. számú antibiotikus táptalajt (oltóagart) bekenjük a mikroorganizmus-tenyészettel, majd 37 ®C-on 20 órán át inkubálást végzünk. Oltókaccsal ezután a tenyészetből átoltást végzünk a tripton-szója folyékony táptalajra, majd az utóbbit 37 ®C-on 20 órán át inkubáljuk. Az Így kapott tenyészetei negyedére hígítjuk a Ringer-féle fiziológiás oldattal, olyan standardizált szuszpenziókat kapva, amelyek egy-egy mikroorganizmusból 107- 10®/ml mennyiséget tartalmaznak. Az (I) általános képletű kísérleti vegyületeket tartalmazó táptalaj elkészítése 1000 yug/ml koncentrációjú, 0,1 n vizes nátrium-hidroxid-oldattal készült oldatokból kiindulva mindegyik kísérleti vegyületet elő-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
