189735. lajstromszámú szabadalom • Eljárás dehidrogenázok kimutatására alkalmas diagnosztikai készlet előállítására
1 2 189.735 4. példa Az 1. példa szerint az anyagkeverék alább következő összetételű vizes oldatának alkalmazásával diagnosztikai berendezéseket állítunk elő, _______________Mennyiség DL-Nátrium-laktát NAD NET Meldola-kék Trie tan ol-amin hidroklorid Tisztított víz, amennyi összesen 57,6 mg 3.0 mg 50.0 /ng 2,5 *ig 50.0 mg 2,0 g-hoz szükséges. Az oldat pH-értékét 4,0-ra állítjuk. Az ezen oldattal kapott diagnosztikai berendezések tulajdonságai a 2. és 3. példa szerint előállított berendezésekével azonosak. 5 10 15 5. példa Az 1. példa szerint az anyagkeverék alább következő összetételű vizes oldatának alkalmazásával diagnisztikai berendezéseket állítunk elő. Komponensek_______ D L-Nátrium-laktát NAD NBT PMS Trietanol-amin hidroklorid Tisztított víz, amennyi összesen ______mennyiség 37.0 mg 2,0 mg 490.0 jrg 48,7 jug 49.0 mg 2,019 g-hoz szükséges. Az oldat pH-értékét 3 n sósavval 4,5-re állítjuk. Az így kapott diganosztikai berendezések sajátságai megfelelnek a 2., 3. és 4. példák szerint előállított berendezések tulajdonságainak. 20 25 30 35 6. példa Komponensek___________;_____ DL-Nátrium-laktát NAD TNBT (3 ß ’-(3,3 ’-dime toxi-4,4 -bisz-fenilén)-bisz-(2,5 -p-nitrofenil-2H-tetrazólium-klorid) PMS Trietanol-amin hidroklorid Tisztított víz, amennyi összesen Mennyiség 25,6 mg 1,33 mg 555.0 m 30,3 pg 49.0 mg 2,0 g-hoz szükséges. Az oldat pH-értékét 3 n sósavval 4,0-ra állítjuk. 7. példa Az 1. példa szerint előállított diagnosztikai berendezéseket különböző időszakon át burkolt állapotban tároljuk, majd hatóképességüket ellenőrizzük. A tamponokat a megfelelő tárolási idő eltelte után sötétben a burkolatból kivesszük, és kémcsőben 2 ml vizsgáló oldattal érintkezésbehozzuk. A vizsgáló oldat minden esetben egy 7,5 pH-értékű foszfát-pufferoldat. A vizsgáló oldat 2 ml térfogatú próbájának első részét tiszta foszfát pufferoldatként a különböző ideig tárolt tamponok üres értékének méréséhez alkalmazzuk. A vizsgáló oldat 2 ml térfogatú próbájának második részéhez 3 NE (nemzetközi egység) laktát-dehidrogenázt (LDH) adunk. A vizsgáló oldat 7 ml térfogatú próbájának harmadik részét 1% albuminon, nátriumkloridon és mucin on kívül (amelyeket a lentebb megadott mennyiségekben veszünk) még 3 NE LDH-t adunk. A tampon ezen in vitro működőképességi ellenőrzésének során az összes, fentebb megadott 2 ml térfogatú próbák a testfolyadékot utánozzák. Az egész felülvizsgálatot szobahőmérsékleten, energiadús fény kizárásával végezzük. Minden egyes mintát (tampont és vizsgáló oldatot a kémcsőben) 20 perccel a tampon vizsgáló oldattal való megnedvesítése után a tampon esetleges színeződésének intenzitására vonatkozóan szemre megítéljük, és le is fényképezzük, hogy ítéletünket később ellenőrizhessük. Az eredményeket az alábbi táblázatban foglaljuk össze. TÁBLÁZAT A tampon A vizsgáló oldat Az anyag-Tárolá-Puffer Puffer Puffer, Puffer, keverék si idő önmagá- LDH albumin, albiumin, pH-értéke (vak-NaCl, NaCl, próba) mucin mucin LDH 4,5 1 év (-) * .... ----4,5 1 év (-) +-tól *+-ig (-)-tól +-tól sárgáig ++-ig 4,5 1,5 év (-) +-tól ~-ig (-) +-tól ++-ig 4,5 2 év ' 0) * 4,5 2,5 év (-) (+)-tÓl Mg 4,5 3 év (-) +-tól ++-ig 4,5 3,5 év (-) +-tÓl +Mg (-) (+)-tÓl Mg (-) * színeződés nincsen = a diagnózis negatív (+) = rózsaszín = a diagnózis még negatív ♦ = világoskék, ibolyás = a diagnózis pozitív árnyalattal = a diagnózis pozitív ♦+ = kék 6
