189600. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új policiklusos éter-származékok és az azokat tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 189 600 2 pánból származó talajmintából izolált Streptomyces halstedii ATCC 31812 vizes táptalajon, süllyesztett aerob tenyésztésével állítunk elő. Az antibiotikum és kationos sói sokféle mikroorganizmussal szemben hatásosak, és hatékonyan befolyásolják a kokcidiózist, enteritiszt, sertés dizentériát és a teileriózist, valamint hatásosan elősegítik a baromfiak és a kérődzők növekedését. A mellékelt rajzokon a következő infravörös abszoprciós spektrumok (KBr) láthatók: 1. ábra: 53.607 antibiotikum (a találmány szerinti eljárással előállított vegyület) nátrium-só formában; 2. ábra: 53.607 antibiotikum, szabad sav formában. A találmány szerinti eljárással előállított antibiotikumot termelő mikroorganizmus törzset egy Japánban, Hirosimában vett talajmintából izoláltuk. A mikroorganizmus, morfológiai jellemvonásait tekintve Streptomyces. Kevés Actinomycetales gombafonalat találtunk, és légmicéliumot, a Streptomyces nemzetség spóraláncaival. A nemzetségi azonosítást sejtfal analízissel végeztük. A mikroorganizmus tenyészetet egy ferde agaros tenyészetről ATCC# 172 folyadékközegbe oltottuk és 4 napig 28 °C-on egy rázógépben tartottuk. Ezután kivettük a tenyészetet a rázógépből, centrifugáltuk, steril desztillált vízzel háromszor átmostuk és az Actinomycetales tagok azonosítására közönségesen használt közegekre telepítettük. Az inkubálás, ha csak külön meg nem említjük, 28 °C-on történt, és az eredményeket megfelelő időnként feljegyeztük; az itt megadott eredményeket két hetes inkubálás után kaptuk, az ettől eltérőeket külön említjük. A tenyészet jellemzésére használt azonosító közegeket, és az összetételükre vonatkozó referenciákat az alábbiakban soroljuk fel: 1. Tripton élesztőkivonat táptalaj - (ISP # 1 tápközeg, Difco). 2. Élesztőkivonat-malátakivonat agar - (ISP # 2 tápközeg, Difco). 3. Durva zabliszt agar - (ISP # 3 tápközeg, Difco). 4. Szervetlen sók - keményítő agar - (ISP # 4 tápközeg, Difco). 5. Glicerin - aszparagin agar - (ISP # 5 tápközeg, Difco). 6. Pepton - élesztőkivonat agar - (ISP # 6 tápközeg, Difco). 7. Czapek - szaharóz agar - S. A. Waksman, „The Actinomycètes”, Vol. 2. 1. számú tápközeg, 328. o„ 1961. 8. Glükóz aszparagin agar - Ibid, 2. számú tápközeg, 328. o. 9. Bennet-féle agar - Ibid. 30. számú tápközeg, 331. oldal. 10. Emerson-féle agar - Ibid, 28. számú tápközeg, 331. o. 11. Húsleves (Nutrient) agar - Ibid, 14. számú tápközeg, 330. o. 12. Gordon és Smith-féle tirozin Agar - R. E. Gordon és M. M. Smith, Jr. Bact. 69: 147-150, 1955. 13. Kazein agar - Ibid. 14. Kalcium malát agar - S. A. Waksman, Bact. Rév. 21: 1—29, 1957. 15. Zselatin - R. E. Gordon és J. M. Mihm, Jr. Bact. 73: 15-29, 1957. 16. Keményítő - Ibid. 17. Szerves nitrátos táptalaj - Ibid. 18. Dextróz nitrátos táptalaj - S. A. Waksman, „The Actinomycètes” Vol. 2. 1. számú tápközeg, 328. o. 1961, 30 g szaharózzal helyettesített 3 g dexti ózzál, az agar elhagyva. 19 Burgonya - sárgarépa agar - M. P. Lechevalier, Jr. Láb. and Clin. Med. 71; 934-944, 1968, de csak 30 g burgonyát, 2,5 g sárgarépát és 20 g agart használtunk. 20 2% Csapvizes agar. 21 Lefölözött tej - Difco. 22 Cellulóz hasznosítás -a) H. L. Jensen, Proc. Linn. Soc. N. S. W. 55: 231-248, 1930. b) M. Levine and H. W. Schoenlein, „A Compilation of Culture Media”, 2511 számú tápközeg, 1930. 23. Szénhidrátok - ISP 9 tápközeg, Difco; Nonomi ra and Ohara féle C-2 közeg, lásd: Nonomura, h. and Y. Ohara, J. Ferment. Technoi. 49: 887-894, 1971. 24. Hőmérséklet-tartomány - ATCC 172 tápközeg, „ATCC Culture Collection Catalogue”, 14. kiadás, 518. o. 1980. Az új tenyészetet (Pfizer N393-39) az alábbiakban jellemezzük a különböző közegeken: a színeket az általános terminológiának megfelelően írjuk le, de a pontos színárnyalatokat a Color Harmony Manual negyedik kiadásában levő színmintákkal történt összehasonlítás alapján határoztuk meg. Elesztőkivonat - malátakivonat agar - A növekedés jó, a krémszínűtől a világossárgáig (2 ca-hoz közel i, mérsékelten kidomborodó, sima, a durvától a barázdásig, légmicélium nincs, a hátoldal ugyanolyan mint a felület; nincs oldható pigment. Durva zabliszt agar - A növekedés mérsékelt, a szürkétől a barnásszürkéig (2 ge, 2 Ig-től a 2 ni-ig), a vékonytól az enyhén kidomborodóig, sima kis fehér pontokkal; szórványos légmicélium, fehértől a halvány szürkésig; a hátoldal ugyanolyan mint a felület ; világossárgás színű oldható pigment. Szerves sók - keményítő agar - A növekedés mérsékelt, sárgásbarnától a barnáig (2 ic, 3 ne-tól 3 le-ig), vékony, sima, légmicélium nincs; a hátoldal ugyanolyan mint a felület; nincs oldható pigment. Glit erin - aszparagin agar - A növekedés a gyengétől £ mérsékeltig, matt fehér; vékony, sima, kevés kis fehér-pontocskával; szórványos légmicélium, fehér; a hátoldal ugyanolyan mint a felület; nincs oldható pigment. Gordon és Smith féle tirozin agar - A növekedés a gyengétől a mérsékeltig, a színtelentől a krémszínűig (2 ca), vékony, sima, nincs légmicélium; a hátoldal ugyanolyan mint a felület, nincs oldható pigment. Czapek-szaharóz agar - A növekedés gyenge, színtelentől a mattfehérig, vékony, sima, kevés kis fehér pontszerű légmicéliummal; a hátoldal ugyanolyan mint a felület; nincs oldható pigment. G lül óz-aszparagin agar - A növekedés mérsékelt, sárgásszürkétől a levendulaszürkéig (2 ig. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
