189519. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 2'''-O-demetil-makrocin-származékok előállítására
_ 189 519 2 A találmány tárgya eljárás a jól ismert, terápiás lilozinho/ [lásd például Tetrahedron Letters, 2339 ( I97())| hasonló makrolid antibiotikumok előállítására. A lilo/in nagyértékü antibiotikum, annak ellenére azonban, a rezisztens törzsek megjelenésének lehetősége miatt állandó igény van új antibiotikumok kifejlesztésére. Ezenkívül a vegyületek szerkezetének változtatásai az érzékeny mikroorganizmusok spektrumának változásával járhat. Sajnos, a tilozinhoz hasonló makrolidok szerkezetmódosítása különösen nehéz. Például a J. Org. Cliem., 44 (12). 2050-2052 (1979) közleményben utalnak rá. hogy milyen nehézségekbe ütközik a tilozin mieinozil-glükozid kötésének hasítása kémiai módszerekkel. Valóban; az esetek nagy részében a lenti területen működő kutatók az új szerkezetű vegyületek szűrővizsgálatát új mikroorganizmusok kutatásával végzik, abban a reményben, hogy a természetben előforduló, vagy más, előállított törzsek tenyésztésekor rokon szerkezetű vegyületekhez jutnak. Úgy találtuk, hogy a Streptomyces fradiae bizonyos törzseinek süllyesztett, levegőztetett fermentációs körülmények közötti tenyésztésekor tilozinhoz hasonló vegyületek keletkeznek. A találmány tárgya eljárás új. az (I) általános képleten bemutatott szerkezetű, antibiotikum előállítására, ahol az általános képletben: Q aldehidcsoport, vagy hidroxil-metil-csoport. és Y hidroxilcsoport, vagy mikarozil-oxi-csoport. Az (I) általános képletü vegyületek 2"'-0-demetil-makrocinok, a továbbiakban demetil-makrocinnak, vagy DOMM-nak nevezzük őket, szerkezetüket a (II) képleten mutatjuk be. A DOMM dihidroszármazékát. azaz a 2()-dihidro-2"-0-demetilmakrocint a továbbiakban dihidro-DOMM-nek nevezzük, szerkezeti képletét a (III) képleten mutatjuk be. A 2"-de-O-metil-aktenocint a továbbiakban DOML-nek nevezzük, szerkezetét a (IV) képleten mutatjuk be. Az (V) képletü 20-dihidro-2"'-de-O- metil-aktenocinl a továbbiakban dihidro-DOML- nek nevezzük. A találmány szerinti vegyületek sztereokémiája azonos a jól ismert makrolid-típusú tilozinéhoz. (Lásd például Tetrahedron Letters, 4737, 1970). A mikaminóz a vegyületben az aminocukor, a baloldali semleges cukor 6-dezoxi-D-allóz, és a (II) és (III) képletekben a semleges cukor mikaróz. A DOMM és a dihidro-DOMM 2'-, 4"-, 3"-, 2"'-, 3'"-, 4"'- és 3-helyzetű hidroxilcsoportjai értékes acil-észter-származékok előállítására észterezhetök. A DOML és a dihidro-DOML 2'-, 4'-, 2"'-, 3"'-, 4"'- és 3-helyzetü hidroxilcsoportjai észterezhetők, ami után értékes acil-észter-származékokat kapunk. Ezenkívül a dihidro-DOMM és a dihidro- DOML észterezhető a 20-hidroxil-csoporton. A DOMM és a dihidro-DOMM 2'-hidroxilcsoportjának észterezése könnyen megy. A DOML és a dihidro-DOML 2'- és 4'-hidroxil-csoporljai szintén könnyen észtereződnek. Jellemző észterek a monokarbonsavval alkotott észterek, vagy egy 2-18 szénatomos dikarbonsavval alkotott hemiészter. A DOMM, a dihidro-DOMM, a DOML, a dihidro-DOML és ezek acil-észter-származékai bázikus vegyületek, savakkal kombinálva savaddíciós sókká alakulnak. A savaddíciós sók szintén a találmány oltalmi köréhez tartoznak. Az egyszerűség kedvéért a DOMM jelzést használjuk a DOMM, a dihidro-DOMM, a DOML, a dihidro-DOML és ezen vegyületek specifikus acil-észtereinek, a DOMM, a dihidro-DOMM, a DOML, a dihidro- DOML és ezen vegyületek acil-észter-származékainak gyógyszerészeti szempontból elfogadható savaddíciós sóinak jelölésére. A találmány értelmében úgy járunk el, hogy Streptomyces fradiae ATCC 31 669 törzset süllyesztett, levegőztetett körülmények között addig tenyésztünk, míg jelentős mennyiségű antibiotikum halmozódik fel. Adott esetben a (IV) vagy (V) képletű vegyületek előállítására a tenyésztést enyhén savas körülmények között végezzük. A találmány szerinti eljárást a Streptomyces fradiae mikroorganizmussal végezzük, ezt NRRL 12.187. számon letétbe helyeztük. A DOMM vízben oldódik, oldódik továbbá a legtöbb poláris, szerves oldószerben, például acetonban, metanolban, etanolban, kloroformban, dimetil-formamidban és dimetil-szulfoxidban. A DOMM savaddíciós sói vízben jobban oldódnak, mint maga a bázis. A DOMM a tilozintól papir- és vékonyrétegkromatográfiával megkülönbö/lethelö. A/ 1. cs II. táblázatban megadjuk a DOMM és a lilo/in R,- cs R,-értékeit. A II. táblázatban megadott R^-értékek a tilozin elmozdulásához viszonyított elmozdulást jelzi, a tilozin futásának helyét l.0-val jellemezzük. A bioautográtiát Bacillus subtilis mikroorganizmussal végeztük. /. Túhh'tiiit A DOMM1 re kimyrctci’ l\ mnnitoi’iálniia Vegy iílet R-et tek A1, B C tilozin DOMM 0.53 0.53 0.67 0.05 0.44 0.44 ■' = gél: Merek. Darmstadt s/ilikagél 60 b = oldós/er-elcgy : A ~ elil-aeelál és dielil-amiu 96:4 arányú elegye B = acélon és etanol 2:l arányú elegye C = kloroform és metanol 3:l arányú elegye. A DOMM" //. Táblázat papir kminaio^ráliája Vegy ület R,-érték jy. ......|. tilozin DOMM 1.0 1.0 0.17 0.88 “ = papir: Whatman No. L. ezt 0.75 mólos káliumdihidrogén-foszfát 4.0 pH-jú púderrel kezeltük és szárítottuk. I 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
