189371. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új triciklofoszfazén-származékok és ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 2 189 371 A szerkezet Rtg-analízis alapján: P2i (a tércsoport, a = 18,369(3)A, b * 9,715(1)A, c = 9,722(2)A, a = 90°C, ß * 94,79(1)°, 7 = 90°, V - 1728,9(5)A , Z = 4 (lásd az 1. és 2. ábrákat), R= 0,047. Ez a szerkezet azt igazolja, hogy a spiro burok nem síkban helyezkedik el, míg az N3P3 gyűrű a kísérleti hiba határain belül szigorúan plan ár is. A 3. ábra ezenkívül azt a változást mutatja, amely a 4 aziridinil , Je mez” szerkezetében megy végbe annak hatására, ha az NgPgAz^jG^ képletű vegyület két klóratomot hordozó"5 foszfora fontjára -(NH-ZCH^/g-NH)-csoportot kapcsolva ez a foszforatom a helyettesítőkkel gyűrűt alkot. 2. példa SpiroNjP^Az^ÇNH-'CHJo-NH) előállítása spiroNgPgU4(Nrí7CHJg-NHf képletű vegyületből kiindulva 48,5 mmől frissen desztillált aziridln 35 ml S elegyben készült oldatát 2 óra alatt hozzá csepegtetjük 11,0 mmól splroNjP3G4(HN-/CH-/yNH) és 44,5 mmól EtgN ,20 ml S efegyben késztut oldatához. A reagáltatást 0°C-on, közömbösgázatmoszférában, nitrogén- vagy argonatmoszférában, erőteljes keverés közben végezzük. Ezután a reakcióelegyet hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni, majd szobahőmérsékleten még 24 órán át keverjük. A képződött trietil-amin-hidrogén-kloridot kiszűrjük, majd a szürletet vákuumban bepároljuk. A kapott nyerstermék vékonyrétegkromatográfiásan 2 foltot ad, melyek R= értéke 0,17 és 0,68. A nyersterméket 20 térfogat szén-tetrakloridból kristályosítjuk át. Az oldatból az oldószert részben lepároljuk, majd az oldatot lehűtjük. Ily módon 87%-os hozammal nyerjük a kívánt kristályos terméket. A termék olvadáspontja: 134°C. A kapott termék analitikai jellemzői azonosak az 1. példa szerinti eljárással előállított termék jellemzőivel. 3. és 4. példa SpiroNgP3Az4(HN-/CH2/4-NH) előállítása A cím szérinti vegyületet az 1. vagy 2. példa szerinti eljárással állítjuk elő, az 1. példa szerinti eljárásban propilén-diamin helyett putreszcint, a 2. példa szerinti eljárásban spiroN3P3CL(HN-/CH^/3-NH) helyett spiroN3P3G4(HN-ÍCíT2/4-NH)-t alkalmazunk. A tiszta terméket mindkét eljárás esetén 90%-os vagy magasabb hozammal nyerjük. A kapott vegyület analitikai jellemzői a következők: Olvadáspont (korrigálatlan) 171°C. Vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat: metil-alkohol efuens alkalmazásával Rf = 0,41. Elemzési eredmények: számított: C% = 37,02, H% = 6,73, N% = 32,38, ’ P% = 23,87, talált: C% = 36,93, H% = 6,70, N% * 32,08, P%= 23,75, C% = 37’10’ H% = 6,75, N% = 32,47%, P % = 23,78. Tóniegspektruni: m/z 389 CM)* 83,3%, 347 (M-lAz)4 96,8%, 304 (M-2AZ.) 100%, 263 (M-3Az)+ 30,9%, 220 (M■4Az)4 20,6%. 261 (N3P,Az,X 36,5%, 177 5 10 0 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 (N3P3AZ)417,4%, 135 (N3P3) 3,9%. Megjegyezzük, hogy az ffi/z?304 és 220 csúcsok tulajdoníthatók az (N3P3Az.)4 és az (N,P-,Az,,)+ résznek is, mivel a 2Az rész és a (NH-jCH^L-NH) tömege azonos, egyaránt 84. 3IP NMR spektrum CHjC^-ben (85%-os foszforsavhoz viszonyítva) Az AX2 spektrumban düblet 38,74 és 37,77 ppmnél, triplet 23,65, 22,68 és 21,71 ppm-nél, intenzitásuk aránya 2 : 1, J (P-P) =35,29 Hz. Infravörös spektrum (cm'r) (KBr-ban) 3270 m, 3060 w, 2990 m, 2920 m, 2880 vw, 2865 s, 1230 s, 1190 vs, 1170 s, 1120 s, 1080 w, 1055 m, 955 m, 915 vs, 855 m, 845 m, 810 m, 720 w, 705 m, 690 m, 640 s, 525 w, 435 w. Az előbbi példák kiindulási anyagai a következő közleményekben ismertetett eljárásokkal vagy analóg eljárásokkal állíthatók elő: gem-N-gPgAz^jCig: - Y. Kobayashif L. A. Chasin és L. B. Gapp: Inorg. Chem., 2,212 (1963), - R. Ratz, E. Kober, C. Grundmahn és G. Ottmann, Inorg Chem., 3, 757 (1964) és a 3 197 464. számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás (1965. július 27.)- G. Guerch, J-F. Labarre, F. Sournies, M. Manfait, F. Spreafico és S. Fillppeschi: Inorg. Chim. Acta, 66,175-183 (1982), SplroN3P3G4(HN-/CHL)rNH).- G. Guerch, M. Graffeml, R. Enjalbert, R. Lahana, J-F. Labarre és F. Sournies: J. Mol. Struct., 85, 000 (1982), SpiroN,PgG4(HN-/CHJ4-HN): - G. Guerch, J-F. Labarre, R. Roques, és F. Sournies: J. Mol. Struct. 85,000 (1982). Farmakológia! sajátságok Megvizsgáltuk az előzőekben említett vegyületek farmakológiai sajátságait. Elsősorban is azt találtuk, hogy az-14. példák szerint előállított két vegyület oldhatósága vízben egyaránt 20 g/1 vagy ennél több, minek folytán belőlük vizes oldatban készíthető injekciós készítmény. A vegyületek toxicitását Swiss vagy CD2F1 nőstény egereken vizsgáltuk. A mortalitást, mely rendszeresen a szer beadását követő 5., 6. napon vált nyilvánvalóvá, a beadott dózis függvényében feljegyeztük és ebből számítottuk az LDQ értéket, mely a maximális nem letális dózist jelenti. Az eredmények a vizsgálatba bevont egerek fajtájától függetlenek. Azt találtuk, hogy a spiroN3P,Az4(HN-/CH-)/1-NH) (továbbiakban: SPIRODIAMj) LD_ értéke 75 mg/kg, és a spironN3P3Az,(HN-/CH2/d-NH) (továbbiakban SPIROD1AM 4) LD0 értéke 125 mg/kg. Tumorellenes aktivitás A tumorellenes aktivitás vizsgálatát az EORTC szkrinelő és farmakológia! csoportja (Milano, Institute Mario Negri) végezte. A vizsgálatok CD2F1 nőstény egereken folytak, ezeknek vagy egyetlen injekciót adtunk be (különböző dózisúakat) a tumor beültetését követő J ♦ l napokon, vagy krónikus OlD injekciósorozatot alkalmaztunk. A kapott eredményeket az 1. táblázatban ismer-4
