189207. lajstromszámú szabadalom • Eljárás foszfortart L-prolinn-származékok előállításásra
hidroxid diszperziót adunk, és argongázatmoszférában 20 percig forraljuk visszafolyó hűtő alatt. A kapott tiszta oldatot hagyjuk szobahőmérsékletre lehűlni, hozzáadunk 4,75 g (lOmmól) 4-toluolszulfonsav-[4-fenil-2-(4-toluolszulfonil-amino)butil]-észtert, és szobahőmérsékleten keverjük argongáz alatt. Mintegy 15 perc múlva fehér szilárd anyag válik ki, erre további 50 ml tetrahidrofuránt adunk hozzá, és éjszakán át tovább keverjük. Az elegyet 50 ml etil-acetáttal és 50 ml 5%-os kálium - hidrogén-szulfát oldattal rázzuk össze. Az. etilacetátos fázist alaposan mossuk telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát oldattal és telített vizes nátrium-klorid ‘oldattal, nátrium-szulfáton szárítjuk, és bepároljuk. A maradékot diizopropil-éterrel eldörzsölve 3,9 g metil-[4-fenil-2-(4-toluolszulfonilamino)-butil]-foszfinsav-etil-észtert kapunk fehér kristályos anyagként, amelynek olvadáspontja 107-108 °C. Etil-acetátból átkristályosítva analitikai tisztaságú mintát kapunk, amelynek olvadáspontja: 108-109 °C. Rf = 0,18 (etil-acetát). Az elemanalízis eredményei a C20H28NO4Ps összegképletre: számított: C% 58,66; H% 6,89; N% 3,42; P% 7,56; S% 7,83, mért: C% 58,36; H% 6,81; N% 3,34; P% 7,3; S% 7,57. c) [(2-Amino-4-fenil-butil)-hidroxi-foszfinil]ecetsav. 3,40 ml (24,3 mmól) diizopropil-amin 40 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készített oldatát 0 °C-on (jeges fürdő) argongáz alatt fecskendővel 12,0 ml (19,2 mmól) 1,6 mólos hexános butil-lítium oldattal elegyítjük. Az elegyet 0 °C-on 20 percig keverjük, utána lehűtjük —78 °C-ra (szárazjeges fürdő), és motorikus mozgatású fecskendővel 0,48 ml/perc sebességgel hozzáadjuk 3,30 g (8,07 mmól) metil[4-fenil-2-(4-toluolszulfonil-amino)-butil]-foszfinsav-etil-észter 20 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készített oldatát. A kapott elegyet - 78 'C-on további 45 percig keverjük, és utána 30 percig 5 Â méretű molekulaszitán átengedett száraz széndioxidot vezetünk bele. A reakcióelegyet utána hagyjuk szobahőmérsékletre felmelegedni, 30 percig keverjük, és etil-acetáttal és 5%-os káliumhidrogén-szulfát oldattal rázzuk össze. Az etilacetátos réteget telített vizes nátrium-klorid oldattal mossuk, nátrium-szulfáton szárítjuk, és bepároljuk. A maradékot telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát oldattal oldjuk, etil-acetáttal kétszer mossuk, tömény sósavoldattal pH 1-re savanyítjuk, és diklór-metánnal alaposan extraháljuk. Az egyesített diklór-metános extraktumokat nátriumszulfáton szárítjuk, és bepárolva 3,45 g nyers monosavat kapunk fehér habként. Rf = 0,15 (10% metanolt tartalmazó diklórmetán). A 3,45 g (7,62 mmól) nyers monosav 3,7 g (39,4 mmól) fenol és 35 ml 48%-os vizes hidrogénbromid oldat elegyét 2,5 óra hosszáig forraljuk visszafolyó hűtő alatt. A lehűtött elegyet 70 ml vízzel hígítjuk, és 2 x 25 ml etil-acetáttal mossuk. A vizes fázist szárazra pároljuk, 30 ml vízzel oldjuk, és újból bepároljuk. Ezt a műveletet még kétszer megismételjük. Végül a halványsárga váladékot vízzel oldjuk, és 40 ml hidrogénciklusú AG50W-X2 gyantával töltött oszlopra öntjük, és előbb vízzel majd 5%-os piridines vízzel eluáljuk. A kívánt terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, és szárazra pároljuk. A szilárd maradékot acetonitrillel eldörzsölve 1,50 g [(2-amino-4-fenilbutil)-hidroxi-foszfinil]-ecetsavat kapunk fehér kristályos anyagként, amelynek olvadáspontja 214 °C (bomlás). Rr = 0,40 (izopropanol : tömény ammóniumhidroxid oldat : víz = 7 : 2 : 1). Az elemanalízis eredményei a Ci2H18N04P öszszegképletre: számított: C% 53,13; H% 6,69; N% 5,16; P% 11,42, mért: C% 52,99; H% 6,40; N% 5,12; P% 11,4. d) {[2-(Benzoil-amino)-4-fenil-butil]-hidroxi-foszfinil}-ecetsav-dilítiumsó. 1,0 g (3,69 mmól) [(2-amino-4-fenil-butil)-hidroxi-foszfinil]-esetsav 6 ml dioxán és 3 ml víz elegyével készített szuszpenzióját jeges fürdőben lehűtjük, és hozzáadunk 2,0 ml (14,5 mmól) trietil-amint. Tiszta oldatot kapunk. Az elegyhez utána 5 perc alatt hozzácsepegtetünk 0,65 ml (5,60 mmól) benzoil-kloridot. A reakcióelegyet 0 °C-on két óra hosszáig keverjük, utána tömény sósavoldattal pH 1-re savanyítjuk, és az oldószer nagyrészét vákuumban eldesztilláljuk. A maradékot etil-acetáttal és vízzel összerázzuk, az etil-acetátos réteget telített vizes nátrium-klorid oldattal mossuk, nátrium-szulfáton szárítjuk, és bepároljuk. A maradékot 5 ml (5 mmól) l n lítium-hidroxid oldattal oldjuk, és 40 ml lítium-ciklusú AG50W-X8 gyantával töltött oszlopra öntjük, és vízzel eluáljuk. A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, és bepároljuk. A nyers terméket 2,54 cm (1 inch) átmérőjű 200 mles HP-20 oszlopon kromatografáljuk víz-acetonitril (0 -> 100%) lineáris gradienssel 5 ml/perc sebességgel eluálva, és 5 ml-es vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat után egyesítjük, bepároljuk, vízzel oldjuk, millipore szűrőn szűrjük, és liofilizáljuk. így 0,95 g {[2-(benzoil-amino)-4-fenil-butil]-hidroxifoszfinil}-ecetsav-dilítiumsót kapunk fehér szilárd anyagként. Rf = 0,53 (izopropanol : tömény ammóniumhidroxid oldat : viz = 7 : 2 : 1). Az elemanalízis eredményei a C19H20NOSPLi2 • H20 összegképletre: számított: C% 56,31; H% 5,47; N% 3,46; P% 7,64, mért: C% 56,13; H% 5,33; N% 3,45; P% 7,8. e ) 1 -[{[2-(Benzoil-amino)-4-fenil-butil]-hidroxi-foszfinil}-acetil]-L-prolin-benzil-észter. 0,85 g (2,2 mmól) d) pontban előállított dilítiumsót 50ml In sósavoldat elegyével rázunk össze. A vizes fázist 50 ml diklór-metánnal visszaextraháljuk, és az egyesített extraktumokat nátrium-szulfáton szárítjuk, és bepároljuk. A 0,82 g maradékot 15 ml vízmentes tetrahidrofuránban oldjuk, lehűtjük 0 °C-ra (jeges fürdő) argongáz alatt, és 0,4 g (2,47 mmól) N,N'-karbonil-diimidazolt adunk hozzá. A reakcióelegyet 1 óra keverés után 1,1 ml (7,95 mmól) trietil-aminnal elegyítjük, és 0,65 g (2,69 mmól) L-prolin-benzil-észter-hidrokloridot adunk hozzá. Hagyjuk szobahőmérsékletre felmelegedni, és éjszakán át keverjük. A reakcióelegyet utána etil-acetáttal és 5%-os kálium-hidrogén-szulf 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
