189207. lajstromszámú szabadalom • Eljárás foszfortart L-prolinn-származékok előállításásra
1- 189 207 2 A megfelelő mennyiségű (S)-l-[{[2-(benzoilamino)-3-fenil-propil]-hidroxi-foszfinil}-L-prolindinátriumsót, Avicelt és a sztearinsav egyrészét öszszekeverjük. A keveréket granuláljuk, és 2. sz. szitán átszitáljuk, majd összekeverjük a hidroklorotiaziddal, laktózzal, kukoricakeményítővel és a maradék sztearinsavval. A keveréket tablettaprésen 350mg-os kapszulaalakú tablettákká préseljük. A tablettákat felezésre szolgáló rovátkával látjuk el. Hasonló módon készíthetők 100 mg 2-7. példák bármelyike szerinti terméket tartalmazó tabletták. 14. példa: l-({[4-Fenil-2-(2-furoil-amino)-butil]-hidroxi-foszfinil}-acetil]-L-prolin-dilítiumsó. 0,40 g (1,48 mmól) 3. példa c) pontjában előállított aminodisav 8,0 ml vízmentes acetonitrillel készített szuszpenziójához 0°C-on argongáz alatt 1.4 ml (5,27 mmól) N,N-bisz-(trimetil-szilil)-trifluor-acetamidot adunk, hagyjuk az elegyet szobahőmérsékletre felmelegedni, és 1,5 óra hosszáig keverjük. A keletkező tiszta oldatot jeges fürdőben lehűtjük, és 10 perc alatt apránként hozzáadunk 0,16 ml (1,62 mmól) 2-furoil-kloridot. A reakcióelegyet hagyjuk szobahőmérsékletre felmelegedni, majd 2.5 óra hosszáig keverjük, és utána szárazra pároljuk. A maradékot körülbelül 10 ml etil-acetáttal oldjuk, hozzáadunk 2 ml vizet, 10 percig keverjük, és szárazra pároljuk. A maradékot körülbelül 5 ml tetrahidrofuránban oldjuk, és 4-5 g Celítre bepárlással rászáritjuk. A Celitet egy zsugorított üvegszűrőbe rakjuk, és először körülbelül 100 ml dietíléterrel majd tetrahidrofuránnal mossuk. A tetrahidrőfurános oldat bepárlásával 0,55 g (100%) {[4-fenil-2-(2-furoil-amino)-butil]-hidroxi-foszfinil}ecetsavat kapunk halványsárga habként. A vékonyrétegkromatográfia adatai: izopropanol : tömény ammónium-hidroxid oldat : víz = = 7:2:1; Rr=0,48. A fenti 0,55 g anyag 10 ml vízmentes “tetrahidrofuránnal készített oldatához 0 °C-on (jeges fürdő) 0,29 g (1,79 mmól) N,N'-karbonil-diimidazolt adunk, és argongáz alatt 1 óra hosszáig keverjük. A keletkező tiszta oldathoz utána 0,42 g (1,74 mmól) L-prolin-benzil-észter-hidroklorídot és 0,75 ml (5,42 mmól) trietil-amint adunk, és hagyjuk szobahőmérsékletre felmelegedni. A reakcióelegyhez 16 óra múlva etil-acetátot és 5%-os kálium-hidrogén-szulfát oldatot adunk, összerázzuk, a szerves fázist alaposan mossuk 5%-os káliumhidrogén-szulfát oldattal (pH 4,5 puffer) és telített vizes nátrium-klorid oldattal, nátrium-szulfáton szárítjuk, és bepároljuk. A 0,74 g nyersterméket 50 g LPS-1 szilikagélen diklór-metán : metanol : ecetsav (20: 1 : 1) eluálószerrel kromatografálva tisztitjuk. A kromatografált terméket 50 ml etilacetáttal oldjuk, és 1 n sósavoldattal és telített vizes nátrium-klorid oldattal mossuk a színes szennyezések eltávolítása céljából, majd nátrium-szulfáton szárítjuk, és bepároljuk. így 0,55 g (68%) 1—[{[4-fenil-2-(2-furoil-amino)-butil]-hidroxi-foszfinil}acetil]-L-prolin-benzil-észtert kapunk halványsárga habként. A vékonyrétegkromatográfia adatai: izopropanol : tömény ammónium-hidroxid oldat : víz = 7:2:1; egyetlen folt; Rf = 0,65. A 0,55 g (1,0 mmól) fenti benzil-észter 3 ml dioxánnal készített oldatához 2,5 ml (2,5 mmól) 1 n lítium-hidroxid oldatot adunk, és szobahőmérsékleten 45 percig keverjük. Az elegyet szárazra pároljuk, és a maradékot 2,54 cm (1 inch) átmérőjű, 200 ml töltettérfogatú HP-20 oszlopon kromatografáljuk víz/acetonitril (0->I00%) lineáris gradienssel 5 ml/perc átfolyási sebességgel eluálva, és 5 ml-es frakciókat szedünk. A vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat alapján a kívánt terméket tartalmazó frakciókat (93-107) egyesítjük, és bepároljuk. A maradékot vízzel oldjuk, millipore szűrőn szűrjük, és liofilizáljuk. így 0,41 g (87%) 1 -[{[4-fenil-2-furoil-amino)-butil]-hidroxi-foszfinil}-acetil]-L- prolin-dilítiumsót kapunk habszerü fehér szilárd anyagként. A vékonyrétegkromatográfia adatai: izopropanol : tömény ammónium-hidroxid oldat : víz = 7 : 2 : I; egyetlen folt; Rf = 0,51. [a]D= -38,0° 6c = 1,13; metanol). Az elemanalízis eredményei a C22H25N207PLi2 • 1,3 H20 összegképletre: számított: C% 53,09; H% 5,59; N% 5,63; P% 6,22, mért: C% 53,14; H% 5,40; N% 5,62; P% 6,1. Olvadáspont: 210-218 °C (bomlás). 15. példa: (S)-l-[{[2-(BenzoiI-amíno)-hexil]-hidroxi-foszfinil}-acetilj-L-prolin-dilítiumsó. a) L-Norleucin-etil-észter-hidroklorid. 6,50 g (49,5 mmól) L-norleucin 70 ml abszolút etanollal készített szuszpenzíóját 0 °C-ra hűtjük (jeges fürdő) és sósavgázzal telítjük. Az elegyet hagyjuk szobahőmérsékletre felmelegedni, és éjszakán át keverjük. Utána nitrogéngázt buborékoltatunk át az oldaton a sósavgáz nagyrészének eltávolítása céljából, és végül az elegyet szárazra pároljuk. A szilárd maradékot diizopropil-éterrel eldörzsöljük, szűrjük, és megszárítjuk. így 9,10 g (94%) L-norleucin-etil-észter-hidrokoridot kapunk fehér szilárd anyagként, amelynek olvadáspontja 131-132 °C. Rf = 0,51 (ecetsav : metanol : diklór-metán = 1:1:8). [a]D = + 15,4° (c= 1,10; metanol). Az elemanalizis eredményei a C8Hl7N02 • HC1 összegképletre: számított: C% 49,10; H% 9,27; N% 7,16; Cl% 18,12, mért: C% 48,82; H% 8,92; N% 7,19; Cl% 18,18. b ) (S)-2-(4-T oluolszuifonil-amino)-1 -(4-toluolszulfoniloxi)-hexán. 7,80 g (206 mmól) nátrium-borohidrid 120 ml 50%-os vizes etanollal készített oldatához szobahőmérsékleten cseppenként hozzáadjuk 8,6 g (43,9 mmól) L-norieucin-etil-észter-hidroklorid 120 ml 5 10 15 20 25 30 ,35 .40 45 50 55 60 15
