189127. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az arginin-vazopresszin antidiuretikus és/vagy vazopresszor hatását antagonizáló új oktapeptidszármazékok előállítására
1 189 127 2 A találmány szerinti előnyös vegyületek a koráb- ! ban ismert antidiuretikus antagonista hatású vegyületeknél szelektívebb hatást mutatnak, ha az antivazopresszor hatásokat is figyelembe vesszük, úgy mint ezt az antivazopresszor hatás és az antidi- 5 uretikus antagonista hatás alábbi táblázatban bemutatott hányadosai is mutatják: Vegyület Hatásos dózis (antivazopresszor hatás) Hatásos dózis (antidiuretikus antagonista hatás) d(CH2)5 D-Tyr(Et) VAVP 0,41 15 d(CH2)5 D-Phe VAVP 0,87 d(CH2)5[D-Valz]VAVP 12 d(CH2)5[D-Ile2]VAVP 12 20 10. példa a) [l-(ß-merkapto-ß,ß-ciklopentametil0n-propionsav), 2-(0-alkil)-tirozin, 4-valin]-(L- és D-)-arginin vazopresszin-származékoknak az endogén (a szervezetben jelenlévő) antidiuretikus hormon hatását antagonizáló aktivitását úgy mutatjuk ki, hogy e vegyületeket intraperitoneálisan (a hasüregbe adva) éber patkányoknak adtuk be. A vegyületek beadását követő 4 órán át gyűjtöttük a vizeletet. Az alábbi táblázatban megadjuk a 4-6 patkányból álló csoportokon kapott átlagértékeket és a standard szórást. A *P kisebb 0,05 és **P kisebb 0,005 jelzéseket az antagonistákkal kezelt állatokon kapott átlagértékek és az ugyanezen, de csak oldószerrel kezelt állatokon kapott átlagértékek különbségére adjuk meg. Az oldószerrel kezelt kontroll állatok átlagos vizelet-ürítése 0,9 ±0,1 ml/ kg per óra volt, és az átlagos ozmolalitás: mOsm/kb H20 (n = 32), 1544 ±85. Vegyület Dózis úg/kg Vizelettérfogat ml/kg per óra Ozmolalitás mOsm/kg H20 d(CH2)5Tyr-(Me)-VDAVP 100 1,5 ±0,3 1341 ±428 300 2,2 ±0,4* 961 ±204** d(CH2)5T yr-(Et)-VDAVP 30 2,8 ±0,3** 640 ±47** 100 9,5 ±1,8** 234 ±25** d(CH2)5Tyr-(Me)-VAVP 10 1,1 ±0,5 1303 ±190 30 3,4 ±0,9* 514 ±105** d(CH2)5Tyr-(Et)-VAVP 10 7,4 ±1,0** 316 ± 38** 30 13,3 ±2,5** 194 ±17** b) Az l-(ß-merkapto-ß,ß-ciklopentameti^n-, propionsav)-2-(0-etil)-tirozin-4-valin-arginin- 35 vazopresszin hatását intraperitoneális adagolásban 200-240 g testsúlyú nőstény patkányokon, blokkelrendezésű kísérletben határoztuk meg, ebben az elrendezésben minden egyes patkánynak beadtuk a kontrollként szolgáló oldószert, majd az antidiure- 40 tikus hormon antagonistájának mindkét dózisát. Az egyes adagolások között legalább 2 nap szünetet tartottunk. A patkányok vizet ad libitum (tetszés szerint) kaptak. A vegyületeket délelőtt 11 órakor adtuk be, majd a spontán ürített vizelet 45 térfogatát 4 órán keresztül óránként megmértük. Az 1. példán bemutatjuk a vizelet ozmolalitását az idő függvényében. A (csak oldószerrel kezelt) kontroll csoport vizeletének ozmolalitását a vizeletürítés rendszertelensége miatt egy 2 órás időtartam- 50 ra átlagoltuk. A 2. ábrán bemutatjuk az ürített vizelet térfogatát az idő függvényében. Mindkét ábrán a mérési pontokon átmenő függőleges szakaszok a standard szórást jelzik. 55 11. példa A találmány szerinti azon vegyületeket, ahol a 60 2-es helyzetben D-tirozin van, és a tirozin nem éteresített (X' jelentése hidrogénatom), az 1-5. példákban leírt módon állítjuk elő. A Z helyén L-arginint tartalmazó vegyület nagyon erősen antagonizálja az arginin-vazopresszin antidiuretikus hatását. A fenti példákkal szemléltetett eljárásokat hasonló sikerrel megismételhetjük akkor is, ha a fentiekben különösen megadott reagensek helyett ezekkel szerkezeti rokonságban álló más reagenseket használunk, és/vagy a reagensekkel a fenti példákban leírt reakciókörülmények között dolgozunk. A szakemberek számára a fenti leírásból a jelen találmány lényeges jelei nyilvánvalóak, és a szakemberek előtt ismeretes, hogyan lehet a találmány szerinti eljárást különféle körülmények között alkalmazni anélkül, hogy eltérnének a találmány szerinti eljárás szellemétől és meghaladnák oltalmi körét. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás a (VIII) általános képletű, ahol X jelentése Tyr(X’), D-Phe, D-Val, D-Leu, D-Ile, D-Arg, ahol a tirozin D- vagy L-konfigurációjú, W jelentése L-Pro, Z jelentése D- vagy L-Arg, és X’ hidrogénatom, metil-, etil-, n-propil-, izopropil- vagy butilcsoport, oktapeptid-származékok előállítására, azzal jellemezve, hogy (VI) általános képletű, a peptidkémiában ismert módon védett ß-(S-benzil-merkapto)-ß,ß-ciklopentametil0npropionil-oktapeptid-amidot - ahol X, Z és W a fenti - a peptidkémiában ismert módon redukálunk, majd a keletkezett két merkaptocsoportot 13
