189110. lajstromszámú szabadalom • Eljárás (amido)N-helyettesített bleomicin származékok előállítására
szorbeáljuk a kívánt terméket. Az eluálást lineáris koncentrációgradiens módszerrel végezzük, amely szerint 1 liter 0,05 mól/l-es ecetsav-nátrium-acetát pufferoldathoz (pH 4,5) folyamatosan 1 liter metanolt adva a metanol-koncentrációt lineárisan növeljük. A 90% metanol-koncentráció közelében eluálódó kék frakciókat AmberliteR XAD-2-vel töltött 100 ml-es oszlopra vive adszorbeáljuk a kívánt terméket. Az oszlopot 200 ml vízzel mossuk, majd 0,02 n hidrogén-klorid-oldat és metanol 1 : 4 térfogatarányú elegyével eluálva összegyűjtjük a kék frakciókat. Az egyesített frakciókat DowexR 44-gyel (OH-típus, Dow Chemical Co.) semlegesítjük és szárazra pároljuk. 670 mg kék port kapunk. A port 50 ml vízben oldjuk. Az oldatot AmberliteR XAD-2-vel töltött 100 ml-es oszlopra vive adszorbeáljuk a kívánt anyagot. Az oszlopot 300 ml 5%os vizes EDTA.2Na-oldattal, 100 ml 2%-os vizes nátrium-klorid-oldattal, végül 200 ml vízzel mossuk. Ezután az anyagot 0,02 n vizes hidrogén-klorid-oldat és metanol 1 : 4 arányú elegyével eluáljuk, a 290 nm közelében abszorpciós maximumot mutató frakciókat összegyűjtjük. Az egyesített frakciók pH-ját DowexR 44-gyel (OH-típus) 6,0-ra állítjuk, majd liofilizáljuk. 640 mg rézmentes formában lévő dDD-PEP-hidrogén-kloridot kapunk, fehér amorf por formájában. A hozam 64%. Ultraibolya abszorpciós spektrum >„max nm (E 1%/1 cm): 285 (74,4) desztillált vízben. Infravörös abszorpciós spektrum (KBr) 9maxcrn~': 3400, 2900, 11 710, 1650, 1545, 1505, 1450, 1380, 1260, 1135, 1060, 1010, 800, 730 és 690. A többi fizikai-kémiai jellemző a 2. táblázatban található. Ha a C) lépésben bleomicin-származékként dAPMP-OCT-t használunk, dDD-OCT-t kapunk. Ha a C) lépésben 1. kiindulási anyagként B) lépésben kapott megfelelő APMP-dezamido-bleomicin-származékokat használunk, 2. aldehidként a kívánt terméktől függően ciklooktil-aldehidet, p-klór-benzaldehidet és p-cianobenzaldehidet használunk, 3. a fenti aldehideket 1 mól APMP-dezamidobleomicinre számolva 1,2 mól mennyiségben használjuk, és 4. a reakciót a fentebb ismertetett módon folytatjuk le, az 1. táblázatban ismertetett (I) általános képletű vegyületeket állíthatjuk elő. Ha a c) reakciólépésben ciano-bór-hidrid helyett bisz(trifluor-foszfin)-tetrahidro-boráto-rezet használunk, hasonlóképpen (I) általános képletű vegyületeket kapunk. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás az (I) általános képletű új (amido)-N- helyettesített-bleomicin-származékok - a képletben BM jelentése (a) képletű csoport, X jelentése adott esetben 1-4 szénatomos alkilamino-csoporttal, di(l-4 szénatomos)alkil-aminocsoporttal vagy di(l-4 szénatomos)alkil-amino(1-4 szénatomos)alkil-amino-csoporttaI helyettesített 1-10 szénatomos alkilcsoport, a fenti helyettesítő csoportokban az alkilcsoportok adott esetben fenilcsoporttal vagy halogén-fenil-csoporttal lehetnek szubsztituálva, R, jelentése 6-10 szénatomos cikloalkilcsoport, fenil-(l-4 szénatomos)alkil-csoport, halogén-fenil(1-4 szénatomos)alkil-csoport, vagy egy vagy két halogénatommal, cianocsoporttal vagy benzil-oxicsoporttal szubsztituált fenilcsoport, és R2 jelentése hidrogénatom vagy —CH2 — R, általános képletű csoport, ahol R, a fenti - előállítására, azzal jellemezve, hogy egy (III) általános képletű (amido)-N-helyettesített 3-[N-metil-N-(3-amino-propiI)-amino]-propil-amino-bleomicinszármazékot - a képletben BM és X jelentése a tárgyi körben megadott - egy (IV) általános képletű aldehiddel - a képletben R! jelentése a tárgyi körben megadott - kondenzálunk redukáló körülmények között, célszerűen egy bór-hidrid vagy bisz(trifenil-foszfin)-tetrahidro-boráto-réz jelenlétében. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy (IV) általános képletű aldehidként 5-13 szénatomos cikloalkil-aldehidet, fenil- vagy halogén-fenil-csoporttal helyettesített 1-5 szénatomos telített alifás aldehidet, vagy adott esetben egy vagy több halogénatommal, ciano- vagy benzil-oxicsoporttal helyettesített benzaldehidet használunk. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy (III) általános képletű vegyületként olyan vegyületet használunk, amelynek képletében X jelentése 6-10 szénatomos alkilcsoport vagy olyan amino-(rövidszénláncú)alkil-csoport, amelyben az aminocsoport egy vagy két 1-5 szénatomos alkilcsoporttal van szubsztituálva, és az aminocsoporton lévő alkilcsoportok is tartalmazhatnak szubsztituálatlan (rövidszénláncú)alkil-amino-, fenil(rövidszénláncú)alkil-amino- vagy halogén-fenil(rövidszénláncú)alkil-amino-csoport szubsztituenseí. 4. A 3. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy (III) általános képletű kiindulási anyagként olyan vegyületet használunk, amelynek képletében X jelentése oktil-, fenil-etil-amino-propil-, N-metil-N-[3-di(klór-fenil-etil)-amino-propil]amino-propil- vagy dibutil-amino-propil-csoport. 5. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy (III) általános képletű kiindulási anyagként olyan vegyületet használunk, amelynek képletében X jelentése oktil-, fenil-etil-amino-propil-, N-metil-N-[3-di(klór-feniI)-amino-propil]-aminopropil- vagy dibutil-amino-propil-csoport, és (IV) általános képletű aldehidként R! helyén ciklooktilmetil-, halogeno-fenil-etil- vagy di(benzil-oxi)fenil-metil-csoportot tartalmazó ciklooktil-aldehidet, halogeno-fenil-acetaldehidet vagy di(benziloxi)-benzaldehidet használunk. 6. Az 1. igénypont szerinti eljárás 3-{N-metil-N-[3-(2-(p-klór-fenil)-etil-amino)-propil]-amino}-propil-amino-(amido)N-[3-((S)-1 ’-fenil-etil-amino)-propil]-bleomicin, 3-{N-metil-N-[3-(p-ciano-benzil-amino)-propil]-amino}-propil-amino-(amido)N-[3-((S)-l'-fenil-etil-amino)-propil]-bleomicin, vagy 3-{N-metiI-N-[3-(ciklooktil-metiI-amino)-propiI]-amino}-propiI-amino-(amido)N-[3-((S)-l'\ I 5 10 15 20 25 30 '35 40 45 50 55 60' 65
